骨髓间充质干细胞修复假体周围骨缺损及对假体界面骨

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1、骨髓间充质干细胞修复假体周围骨缺损及对假体界面骨【摘要】观察骨髓间充质干细胞修复假体周围骨缺损及对假体界面骨整合的影响。［方法］取新西兰大白兔15只。将骨髓间充质干细胞分离、扩增、骨向诱导，体外与珊瑚羟基磷灰石复合构建组织工程骨。将动物双侧股骨髁制作0.6cm×1.2cm的骨缺损，分别植入钛合金植入体，左侧植入体周围骨缺损充填组织工程骨，右侧植入体周围仅充填珊瑚羟基磷灰石为对照组。于术后4周、8周和12周分别行X线检查、扫描电镜、能谱分析及脱钙骨组织学观察。［结果］X线检查示，实验组术后4周缺损区内可见部分骨痂形成，与周围骨质分界清

2、晰；8周可见大量模糊高密度骨痂影；12周缺损区已基本被高密度骨痂所填满，与周围骨质间分界变模糊。对照组4周、8周无明显改变，12周仅边缘有少量的骨痂形成；X射线能谱分析示，不同时间点实验组较对照组内Ca、P的百分含量增高（P＜0.05），随着时间的变化两组Ca、P百分含量都呈增高的趋势。实验组钙/磷比值随时间变化有逐渐升高的趋势，8周时达高峰，随后又降低。组织学结果示实验组术后12周可见明显的新骨形成，但仍可见到未吸收的羟基磷灰石颗粒。对照组各时间点均未见骨长入。［结论］骨髓间充质干细胞骨性诱导后复合珊瑚羟基磷灰石构建组织工程骨可修

3、复假体周围骨缺损，促进假体骨界面骨整合。【关键词】骨整合组织工程骨髓间充质干细胞珊瑚羟基磷灰石人工关节Abstract［Objective］Toinvestigatetheeffectsofbonemarroalstemcells(MSCs)onthebonedefectaroundtheimplantandtheosteointegrationofimplant-boneinterface.［Method］FifteenhealthycleanNe）urcondyleinrabbits.Titaniumalloycolumns(0

4、.3×1.0cm)plantedintobothdefects.Tissueengineeringboneplantedaroundthelefttitaniumalloyimplant，butonlyhydroxyapatiteceramicintheright.Thebiologicalcharacteristicsination,SEM,energydispersiveX-rayanalysisandhistologicstudiesat4,8,and12inationshoplantplantandboneentalgrou

5、pat12ogeneous,andlobraexistedintheinterspaceinthecontrolgroup.EnergydispersiveX-rayanalysisshoentalgroupepoints（P＜0.05）SCscanrepairthebonedefectaroundtheimplantandimprovetheosteointegrationofimplant-boneinterface.Keyarroalstemcell;coralhydroxyapatiteceramic;arthroplast

6、y人工关节置换技术被认为是20世纪骨科最成功的治疗方法之一。人工假体的出现解决了许多从前不能实现的难题，但其也不是毫无瑕疵的，如感染、松动等，其中假体无菌性松动是导致人工关节置换术后中远期失败的主要原因。大量的分析研究表明假体-骨组织界面微动磨损是导致人工关节松动的一个主要因素。文献报告假体材料、表面特性及周围微环境等均可影响生物性假体周围骨长入。本文应用骨髓间充质干细胞(bonemarroalstemcell，MSCs)骨向诱导后复合珊瑚羟基磷灰石构建组织工程骨修复假体周围骨缺损，观察骨髓间充质干细胞对假体骨界面骨整合的影响。1材

7、料与方法1.1实验动物5～7月龄健康清洁级新西兰大白兔(济南军区总医院动物中心，编号：SCKX204057)15只，5个月月龄，体重2.5～2.9kg，雌雄不限，分笼、颗粒干饲料喂养。饮用自来水。1.2材料珊瑚羟基磷灰石为颗粒状5P10R（直径1～4mm），孔径大小400～500μm，空隙率30%～70%，由北京意华健科贸有限公司提供。钛合金植入体为Ti-6Al-4V，直径3mm,由北京百慕高科股份有限公司提供。1.3方法1.3.1骨髓MSCs的分离、培养与骨向诱导无菌条件下于兔股骨大转子下穿刺，抽取骨髓约5ml后缓慢注入含10ml

8、淋巴细胞分离液的离心管中；2500r/min离心15min,吸取界面层细胞,用D-Hanks平衡盐溶液洗2次,2500r/min离心10min；将细胞悬液按4×105/mL接种于75ml培养瓶内,按贴壁筛选法分离骨髓MSCs。7d后细