制何首乌对大鼠肝损伤的实验研究

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1、制何首乌对大鼠肝损伤的实验研究:耿增岩,陈金铭,于德红【摘要】目的研究不同剂量的野生制何首乌对大鼠的肝损伤。方法本实验给药组每天按不同剂量(分别相当于成人每日12g临床用量的20,50,100,200倍)灌胃大鼠一次,前3个月为给药期,第4个月为停药恢复期,分别于给药后的2个月、3个月及4个月末采取血液进行生化检测,同时在3个月末摘取大鼠肝脏匀浆进行丙二醛(MDA)、单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽-S转移酶(GSH-ST)检测及进行大鼠肝脏组织病理学检测。结果与对照组相比,大剂量和较大剂量给药组对大鼠肝脏转氨酶AST在3个月时有一定的影响(P<0

2、.05),MDA有显著性升高(P<0.05)。肝脏组织病理切片显示光镜下大剂量给药组可见散在炎细胞浸润,肝血窦充血,枯否氏细胞增生活跃并可见吞噬色素颗粒。结论制何首乌大剂量长期灌胃对大鼠肝脏有轻度的肝损害,常用剂量各阶段应用则未见毒副作用。停药后可恢复正常。【关键词】制何首乌;毒性实验中药何首乌别名首乌、赤首乌。为蓼科植物何首乌PolygonummultiflorumThunb.的干燥块根[1]。是一味较常用的中药,临床多以制首乌入药,制首乌味甘、涩、微温,具有补益精血、固肾乌须之功效。何首乌自古以来即为常用补药,今人又用于治疗动脉硬化症、高脂血

3、症[2]等疾病。与此同时临床出现的不良反应也逐渐被人们重视起来。本试验旨在探求制何首乌不同剂量长期服用对大鼠肝脏损伤的程度,为临床更好的应用此药提供参考依据。现将对野生何首乌制品所进行长期毒性[3]动物实验研究的结果报告如下。  1材料  1.1动物健康SD大鼠100只,雌雄各半,体质量(100±10)g,由西安交通大学医学院动物实验中心提供,动物合格证号:医动字第08-004号。  1.2药材选用陕西野生何首乌,按照《中国药典》2005版Ⅰ部制何首乌标准进行炮制。然后将制何首乌水煎液浓缩至含生药4g/ml,定容,密封后放于4℃冰箱储存备用。MDA,M

4、AO,GSH-ST试剂盒购自南京市建成生物工程研究所。  2方法  2.1长期毒性实验健康SD大鼠100只,按性别体质量随机分成5组,即小剂量组、中剂量组、较大剂量组、大剂量组及对照组。每组20只,雌雄分笼饲养。给药组剂量依次为4,6,22,40g/kg(分别相当于成人每日临床用量的20,50,100,200倍),对照组给予等体积蒸馏水。灌胃给药1次/d。每周称体质量1次,根据体质量调整给药容积[4]。前3个月给药,第4个月停药恢复。分别于给药后的2个月、3个月及4个月末采取血液进行生化检测,同时在3个月末摘取大鼠肝脏匀浆进行丙二醛(MDA)、单胺氧化

5、酶(MAO)、谷胱甘肽-S转移酶(GSH-ST)检测,并进行大鼠肝脏组织病理学检测。  2.2统计方法统计方法计量资料以均±s表示,用t检验进行组间比较,以P<0.05为差异显著。  3结果  3.1大鼠2个月血液生化学检测指标结果显示大剂量组、较大剂量组AST、ALT无显著性变化。见表1。表1给药2个月大鼠血液ALT,AST指标各给药组与对照组比较,P>0.05;n=10  3.2大鼠3个月血液生化学检测指标 结果显示大剂量组、较大剂量组ALT无显著性变化,大剂量组AST显著升高(P<0.05)。同时肝组织匀浆检测与对照组比,大剂量

6、组MDA有显著升高(P<0.05)。见表2。  3.3大鼠4个月血液生化学检测指标 结果显示大剂量组AST,ALT无显著性变化。见表3。表2给药3个月大鼠血液ALT,AST及组织中MDA,MAO,GSH-ST指标各给药组与对照组比较,*P<0.05;n=10表3给药4个月大鼠血液ALT,AST指标各给药组与对照组比较,P>0.05;n=10  3.4肝脏组织病理学检测肉眼观察各给药组大鼠肝脏,其形态正常,质地柔软,多呈红褐色,未见结节、包块、囊肿等;3个月末大剂量给药组可见个别大鼠肝脏略微发黄,其它给药组肝脏无肉眼可见的病理性改变。 

7、 肝脏病理切片光镜下,对照组肝细胞轮廓清晰,呈多边形,细胞分界清晰,核圆,位于细胞中央,胞浆丰富(见图1)。大剂量组血窦充血及炎细胞浸润较明显,枯否氏细胞增生并可见吞噬色素颗粒(见图2)。其它给药组以及恢复期大鼠肝脏组织病理性变化不明显。  图1对照组肝脏组图2大剂量组肝脏组  织病理学观察织病理学观察  4讨论  何首乌为临床常用中药,以往多认为无毒副作用,被广泛用于临床多种慢性病证;有人亦将何首乌当作延年益寿之补品,长期应用。但近年,临床发现某些患者服用何首乌后引起肝损害,导致肝功能异常,出现黄疸、过敏反应等。因此进一步评价何首乌的药理作用,尤其是

8、对肝脏的作用具有重要意义。  近年来的研究结果表明,肝损伤的病理生理过程是多因素参与的复杂过程

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