黄连解毒汤治疗大鼠急性肝损伤的实验研究

《黄连解毒汤治疗大鼠急性肝损伤的实验研究 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、黄连解毒汤治疗大鼠急性肝损伤的实验研究尹兵祥马喜桃蔡义勇扈晓宇钟森【摘要】目的观察黄连解毒汤对D-Galn诱导的大鼠急性肝损伤的治疗作用及中药的量效关系。方法32只SD大鼠，雌雄各半，随机分为正常组，模型组，黄连解毒汤低剂组，高剂组；除空白组外，其余各组均以1000mg/kgD-Galn腹腔注射造模，空白组则以等量NS腹腔注射；造模后立即对中药组给予相应浓度中药10ml/kg灌胃，每日一次，余组则以等量NS灌胃。染毒24h后，股动脉取血，测血清ALT,AST,并解剖肝脏，光镜下观察其病理变化，操作同前。结果模型组与正常组相比，模型组ALT、AST活

2、性明显增高；治疗组与模型组相比，治疗组转氨酶活性降低，差异有统计学意义（均p＜0.05）；两治疗组间相比，转氨酶活性差异无统计学意义。肝脏病理组织学检查显示，治疗组肝细胞坏死及炎细胞浸润程度均较模型组减轻。结论对1000mg/kgD-Galn诱导的大鼠急性肝损伤，黄连解毒汤干预24h后，有一定的治疗作用。【关键词】黄连解毒汤急性肝损伤D-氨基半乳糖胺量效关系黄连解毒汤方出自《肘后备急方》，名见《外台秘要》，由黄芩、黄连、黄柏、栀子四药组成，有清热燥湿、泻火解毒的功效，主治三焦火毒证，尤其对热毒炽盛证型的急性肝炎，有一定的临床效果[1]。有学者已对该

3、复方进行了研究[2]，但为预防性研究，与临床实际应用有一定的差距。本实验重点观察该方对D-Galn诱导的大鼠急性肝损伤的治疗作用。1材料与方法1.1材料1.1.1药物：D-氨基半乳糖（D-galactosanine,D-Galn）由sigma公司提供，批号7499531，黄连解毒汤的四味药材为中药免煎剂型，购自成都中医药大学附属医院中药房，各药物的剂量比遵守《肘后备急方》原方比例，以蒸馏水煮沸冲为不同浓度的中药汤剂，其中低剂量组(T1组)浓度为0.49g/ml，高剂量组（T2组）浓度为0.99g/ml。1.1.2动物：清洁级SD大鼠32只，体重20

4、0±20g，雌雄各半，由四川大学华西动物实验中心提供,饲养于成都中医药大学附属医院病理生理实验动物中心，自然明暗周期，室温21～23℃。1.1.3主要试剂：肝功ALT、AST试剂盒购自中生北控生物科技股份有限公司，批号080211，10%福尔马林缓冲液由华西医科大学药理实验室提供。1.1.4仪器：KDC-2046低速冷冻离心机（科大创新股份有限公司中佳分公司），Sartorius,R180-D电子分析天平，日立7170全自动生化分析仪，LeicaDM4000型显微图像分析系统。1.2方法1.2.1动物分组及给药量清洁级SD大鼠32只，雌雄各半，适应

5、性喂养3天后，称重编号。随机分为4组，每组8只，即正常组（C组）、肝损伤模型组（M组，1000mg/kgD-Galn）黄连解毒汤低剂量组（T1组，0.49g/ml，临床等效剂量）、黄连解毒汤高剂量组（T2组，0.99g/ml，2倍临床等效剂量）。1.2.2操作过程：试验前一天对大鼠称重，禁食不禁水。实验前D-Galn以无菌NS配制为10%的浓度，根据文献资料[3]及预试验提示，各组（除C组外）以1000mg/kgD-Galn腹腔注射，C组以等量NS腹腔注射；治疗组造模后，立即以中药10ml/kg灌胃，每日1次，M组、C组则以等量NS灌胃，染毒24h

6、后，对所有动物股动脉放血取血，置于-20℃冰箱待检，随后断颈处死，解剖，观察肝脏大体形态后，取肝脏右叶组织块置于10%甲醛溶液中固定。离心取血清，全自动生化分析仪以连续监测法检测血清ALT,AST，肝脏病理则送四川大学华西医学中心药理实验室常规方法制作HE切片，以Leica显微图像分析系统，以200×的放大率观察。1.2.3统计方法据SPSS13.0统计分析，数据以x-±s表示，采用Dunt’s检验，α＝0.05。2结果2.1对血清ALT、AST的影响：24h时，两治疗组均有降低血清转氨酶的作用，差异有统计学意义（P＜0.05）。2.2肝组织病理学

7、影响光镜下观察，C组：肝索排列整齐，小叶结构完整，肝细胞无变性坏死。M组：肝索排列欠齐，肝细胞脂肪样变，点状坏死，血窦内充血，小叶内广泛炎性浸润。T1组:肝索排列整齐，肝细胞少量变性，血窦内少量充血，小叶内点灶状炎性浸润。T2组：肝索排列较齐，肝细胞脂肪变性明显，血窦内少量充血，散在炎症浸润，与T1组无明显差别。3讨论急性肝损伤是由多种病因引起并有多种因素参与的复杂过程，也是是所有肝病慢性化的始动因素。急性肝损伤,特别是急性重型肝炎,发病急,进展迅速,现代医学对此尚无特效治疗。中医学认为其发病主要和热毒有关，热毒炽盛，加以湿邪秽浊之气，凝胶成痰，或

8、热毒深入营血而导致诸种症状发生。黄连解毒汤便是清热解毒，清热除湿的代表方[1]。方中选用大苦大寒的黄连为君，清泻心火及中焦