bayer1650全自动生化分析仪检测血清总胆汁酸的试剂交叉污染及消

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1、Bayer1650全自动生化分析仪检测血清总胆汁酸的试剂交叉污染及消Bayer1650全自动生化分析仪检测血清总胆汁酸的试剂交叉污染及消除措施　全自动生化分析仪具有微量、快速、多项、准确等特点，已广泛应用于临床生化检验中。检验的工作效率得到了大大提高。但同时出现的交叉污染问题却给工作带来了不少麻烦，特别是随着仪器使用时间的累加，仪器状况的下.L.降，交叉污染的程度会日益加剧。如果不能及时排除交叉污染，甚至有可能影响病人的检测结果，造成误诊。我们实际工作中发现，在批量检测中经常会出现一些总胆汁酸（T

2、BA）的异常高值，而单独复查后又正常。为此，我们调整了项目的检测顺序[1]，又设置了试剂针特殊清洗程序[2]，但仍不能解决该问题。据文献报道[3]，试剂的交叉污染以比色杯污染更为严重，当比色杯清洗不完全或者黏附性增加时，比色杯中残留物会对在这个比色杯中进行的下一个检测项目造成影响。为了找到确切的原因，我们进行了一系列相关的实验。　　　　1材料与方法　　1.1仪器与试剂　　仪器请为Bayer1650全自动生化分析仪。试剂：总胆汁酸采用循环酶法测定，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇

3、(LDL-C)采用直接法测定，试剂均购自上海执诚生物技术有限公司。三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)采用酶法测定，试剂均购自北京康大泰科医学科技有限公司。胆碱酯酶采用丁酰硫代胆碱法测定，试剂购自宁波博泰生物技术有限公司。混合血清采用朗道公司的质控血清。　　1.2方法　　1.2.1疑似交叉污染项目的筛选将35个常规生化项目的试剂1（R1）和试剂2（R2）作为样本在bayer1650上直接检测TBA2次，取均值，筛选出TG、TC、HDL-C、LDL-C和CHE5个疑似交叉污染项目。　　1.2.2可疑项

4、目的确认将筛选出来的疑似对TBA检测有交叉污染的5个项目随机分成5组，分别为TG组、TC组、HDL-C组、LDL-C组和CHE组。保养仪器后，确认仪器状态良好，以朗道混合质控血清为标本进行实验。TG检测组：先测221份混合血清的TG，紧接着立即测221份TBA。因为bayer1650共有221个比色杯，如果实验是按连续进行的话，当使用完一圈之后则会出现共用比色杯的情况。其他4个检测组的检测过程同TG组。另外，单独检测221份混合质控血清中的TBA作为无污染时的对照组。　　1.2.3设置比色杯特殊清

5、洗程序，消除交叉污染在仪器自动清洗比色杯的基础上，设置比色杯特殊清洗程序，每次用150μLPol／L)　　试剂TG（单）TC（单）HDL-CLDL-CCHE　　R197.297.00.30.215.7　　R2112.3112.10.2　　　　2.25种试剂对TBA检测的交叉污染情况　　通过分析TG、TC、HDL-C、LDL-C、CHE5个检测组的TBA的结果发现，TG、TC、HDL-C、LDL-C4个项目对TBA的测定有显著干扰（P0.05　　　　2.3设置特殊清洗　　设置比色杯特殊清洗程序后，各

6、组的交叉污染能被有效消除，与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表3。　　表3设置比色杯特殊清洗程序后交叉污染污染情况（μmol／L)　　组别例数TGTCHDL-CLDL-C　　检测组22124.6±0.2#24.4±0.2#24.5±0.2#24.2+0.2#　　对照组22124.3±0.2.L.　　注：与对照组比较，#P>0.05　　3讨论　　TBA是临床实验室的常规检测项目，对肝功能损害，胆管阻塞及肝内胆汁淤积的诊断具有重要的价值。鉴于总胆汁酸在临床应用方面的重要作用，须重视试剂间

7、的交叉污染对总胆汁酸测定的影响，并采取措施尽可能避免交叉污染的发生。试交叉污染问题较为普通，相对隐匿且消除麻烦，主要包括：试剂针污染、搅拌棒污染和比色杯污染。实际工作中通常以比色杯污染最为突出。由表2可知，TGTCHDL-CLDL-C4个项目对TBA的检测存在着明显的正干扰，其中以TG的干扰最大，偏倚率高达63.68%，且重复性差(S=43.6)。说明TG试剂中的某些成分可能比另外几个项目更难清洗，反应杯交叉污染程度参差不齐，有的反应杯未能彻底洗净造成了较大的污染。试剂间的交叉污染原因是多方面的，

8、主要有：①试剂成分中含有某种被污染的项目；②试剂中含有下一个测试所要测定底物或含有的某种试剂成分，与下一反应所测定的底物有作用，因而直接影响下一反应测定的结果；③该试剂所引导的反应给下一个项目反应进程带来了间接干扰[4]。经与试剂研发人员共同探讨，发现是试剂中胆酸盐的成份干扰了TBA的测定，这与有些文献报道相一致[5,6]。胆酸盐是试剂中加速终点反应的辅助成分，往往很多试剂说明书中并没有标明。它易沉积在反应杯的内壁，很可能具有胆汁酸的反应特性，易与TBA试剂反应，从而干扰了TBA的