不同衰老大鼠模型大脑皮层细胞凋亡状况的比较

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1、不同衰老大鼠模型大脑皮层细胞凋亡状况的比较：高会丽王丹巧汪晓燕王志国王香明吴兆恩刘红马琰岩牛晓红李连达【摘要】目的比较不同方法建立的衰老大鼠模型大脑皮层细胞凋亡与线粒体膜电位的变化状况。方法实验分为正常对照组、单纯腹腔注射D半乳糖组、单纯摘除胸腺组、D半乳糖注射联合胸腺摘除组、维生素E、C治疗组。造模及投药6itochondriamembranepotentialofcerebralcortexcellsinagingratsinducedbydifferentmethods.MethodsTheagingratsmode

2、lsusglandremovalandperitonealinjectionD–galbinedthymusglandremovalrespectively.ThetreatmentgroupratsinistratedinE.C.AftersixactivitiesofSODandTAOCitochondrialmembranepotentialeasuredbymeansofchromatometryandfloetry.ResultsAftersixalcontrolgroup,theserumlevelsofSODa

3、ndTAOCinthreedifferentmodelgroupsarkablyandmitochondriamembranepotentialofneuronalcellsodelgroups(P<0.05).Especially,thereodelgroupinducedbyperitonealinjectionDgalbinedthymusglandremovalparedodelgroups(P<0.05).ConclusionsTheagingratsmodelsinducedbyperitoneal

4、injectionDgalbinedthymusglandremovalmanifestepathologicalcharacteristicsofagingbetter.　　【Keyusglandremoval;Nervecellsapoptosis;Mitochondriamembranepotential;Agingmodel　　大脑皮层神经元的衰老被认为是整体衰老过程中的重要特征之一，而神经元的细胞凋亡又是脑衰老的具体表现。用于衰老实验研究的动物模型多种多样，除遗传背景及机制明确的转基因模型外，D半乳糖、γ射线辐照

5、、胸腺摘除、臭氧损伤等衰老大鼠模型等也常被选用。本实验根据衰老过程中氧化应激与免疫功能下降的机制，采用腹腔注射D半乳糖复合胸腺摘除的方法造成衰老大鼠模型，并比较单一造模方法对大脑皮层神经细胞凋亡、线粒体膜电位以及机体抗氧化能力的影响，为延缓衰老特别是延缓神经系统衰老的药物筛选及作用机制研究提供可用的模型。　　1材料与方法　　1.1实验动物SD大鼠，50只，雄性，体重250～300g，SPF级，由中国药品生物制品检定所实验动物中心提供，合格证号：SCXK(京)20050004。　　1.2药物与仪器维生素E、C颗粒，购自北京双

6、鹤药业股份有限公司，国药准字H11022348，每袋含维生素E0.1g，维生素C0.2g。D半乳糖(Sigma)。血清超氧化物歧化酶(SOD)和血清总抗氧化能力(TAOC)测定试剂盒(南京建成生物研究所)。凋亡检测试剂(AnnexinVFITC)，碘化乙啶(PI)凋亡检测试剂盒(北京宝赛生物技术有限公司)。罗丹明123(Sigma)。荧光活化细胞分类计(FACSAriaTM)、流式细胞仪(美国BD公司)、BSA223SCl/100g体重)麻醉，沿颈中线剪开皮肤及皮下组织，分开气管前肌并暴露气管。于胸骨上窝沿胸骨柄中点向

7、下剪开胸骨约1.3cm，暴露胸腺上极，用显微镊牵引并以湿棉签迅速分离，完整取出胸腺两叶，立即用止血钳夹紧、关闭胸腔，待大鼠呼吸平稳后，手术部位投予青霉素粉末，缝合大鼠肌层和皮肤。　　1.4动物分组及给药实验动物按体重随机分为正常对照组，单纯腹腔注射D半乳糖组，单纯摘除胸腺组，腹腔注射D半乳糖联合胸腺摘除组(复合衰老模型组)，维生素E、C治疗组(阳性药组)。10只/组，常规饲料喂养。阳性药组采用腹腔注射D半乳糖联合胸腺摘除造模法。单纯腹腔注射D半乳糖组大鼠每日腹腔注射20%D半乳糖400mg/kg，连续注射6g/kg，

8、连续注射6w。阳性药对照组同时给予维生素E、C0.054g·kg-1·d-1灌胃给药，给药6w。正常对照组、单纯腹腔注射D半乳糖组、单纯摘除胸腺组、复合衰老模型组每日灌胃等量蒸馏水。　　1.5观察指标及检测方法　　1.5.1血清SOD和TAOC测定腹主动脉取全血5ml，室