天然脑活素的记忆改善效果及其分子机理研究.doc

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1、天然脑活素的记忆改善效果及其分子机理研宄作者：吴正治李映红李明陈熳茵杨敏【摘要】目的：研究中药古方强记汤及天然脑活素对记忆障碍动物模型在记忆改善方面的作用效果；并运用转基因技术进一步验证天然脑活素对学习记忆分子开关CREB基因表达的促进作用。方法：将强记汤及天然脑活素分别以g/kg和g/kg的量每日经口灌胃给予SPF级小鼠，连续5d，第6天给药lh后制备成记忆障碍模型，第7天给药~lh后分别用跳台法和避暗法测试记忆成绩；另用不同剂量天然脑活素水煎液处理大鼠大脑BI04CNS神经细胞，以荧光素酶方法检测CREB表达水平。结果：强记汤及天然脑活素水煎液对动物记忆障碍模型小鼠记忆成

2、绩中的潜伏时间、错误次数与模型对照组比较均有统计学意义；而且天然脑活素的改善效果明显优于原方；不同剂量天然脑活素水煎液CREB表达水平与对照组比较有统计学意义，且有剂量反应关系。结论:中药古方强记汤及天然脑活素对实验动物被动回避反应能力的记忆获得、记忆保持及记忆再现均有的改善作用，能显著增加在B104CNS神经元细胞中CREB基因的表达。【关键词】天然脑活素；记忆障碍；记忆成绩；CREB;基因表达AbstractObjectiveToexploretheeffectsofemedicineancienttionMemory-EnhancingDecoction(MEDDonm

3、emoryimprovementofdysmnesiaythepromotionofheexpressionof1earningandmemoryCREBgene.MethodetreatedwithMEDindoseofg/kgaspectivelybyintrationforfivedaydthen,thevarioumodelswerepreparthScopolamine(3ide(120mg/kg)bynjectionand40%aodywEight)byintrationonthesixtemoryresultwasetraditionalChinescompou

4、ndprescrip)andoptimizedMEanimal,andverifoptimizedMEDontmolecularswitchsTheSPFmiceweroroptimizedMEDndg/kgperdayreagastricadministrscontinuously.Ansdysmnesiamouseedrespectivelywimg/kg),Cycloheximintraperitonealilcohol(mL/10gbragastricadministhday.Nextday,mstimatedbyusingStep-downTestandDark-a

5、voidingTestafterthemicewereadministeredforhalforanhour.Inaddition,ratcerebrumcentralnervoussystem(CNS)nervescelllineB104cellswereincubatedwithoptimizedMEDindifferentdoseof50g/mLand150g/mLforacertaintime.Then,wedeterminedtheexpressionofCREBgenebymeansofluciferaseenzymemethod.ResuitsBothofMED

6、andoptimizedMEDimprovedthememoryresultsaboutlatenttimeanderrorfrequencyofdysmnesiamousemodeIssignificantlycomparingwithmodelcontrolgroup(P〔KeyWords)OptimizedMemory-EnhancingDecoction；Dysmnesia；Memoryresult；CREB；Geneexpression学习记忆和认知障碍已成为现代生命科学和神经科学研究的前沿热点之一［1，2］，尤其是在是神经病学、神经生物学等相关领域的研究中成为最为

7、活跃的方向之一［1-5］。本研究以小鼠为实验对象，用现代行为科学和分子生物学方法观察了经多年筛选的天然脑活素对动物记忆获得障碍、记忆巩固障碍和记忆再现障碍模型记忆功能改善的影响，以期探讨天然脑活素对改善认知障碍特别是在对学习记忆过程不同阶段、不同环节的作用效果及其基因分子作用靶点和机理。1材料与方法材料受试样品天然脑活素是结合临床经验和现代药效学正交实验优化筛选形成，研究用药由深圳市中西医结合研究所进行生药鉴定并制备成150%的水煎浓缩液，离心过滤，封装消毒，冰箱储藏备用。实验动物、细胞株及质粒昆明种小