应用pva构建妊娠相关血浆蛋白a固相时间分辨荧光免疫试剂

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1、应用PVA构建妊娠相关血浆蛋白A固相时间分辨荧光免疫试剂［］目的：合成(SA)z?(Bio)x?PVA?(BCPDA)y?Eu3+复合物，并用于构建妊娠相关血浆蛋白A固相时间分辨免疫荧光试剂。方法：用PVA作为载体结合BCPDA?Eu3+和生物素?亲和素，以双抗体夹心法原理，结合生物素标记抗体和包被抗体建立PAPP?A时间分辨免疫荧光试剂，并进行方法学评价。结果：成功的合成了活性的(SA)z?(Bio)x?PVA?(BCPDA)y?Eu3+复合物，构建PAPP?A试剂检测灵敏度为0.7mIU/L；批内变异系数在3.89%～4.96%之间,批间变异系数在7.35%～9.27%之间。

2、结论：合成的(SA)z?(Bio)x?PVA?(BCPDA)y?Eu3+复合物较高的反应活性，可以用于多种试剂的构建。构建的PAPP?A试剂灵敏度高，具有潜伏的临床应用价值。　　［］妊娠相关血浆蛋白A；固相时间分辨荧光免疫；亲和素—生物素—聚乙烯胺—4,7二氯磺苯基?1，10啡罗啉?2，9二羧酸—铕复合物；唐氏综合征　　DevelopADirectSolidPhaseLanthaneTime?resolved　　应用PVA构建妊娠相关血浆蛋白A固相时间分辨荧光免疫试剂［］目的：合成(SA)z?(Bio)x?PVA?(BCPDA)y?Eu3+复合物，并用于构建妊娠相关血浆蛋白A固相

3、时间分辨免疫荧光试剂。方法：用PVA作为载体结合BCPDA?Eu3+和生物素?亲和素，以双抗体夹心法原理，结合生物素标记抗体和包被抗体建立PAPP?A时间分辨免疫荧光试剂，并进行方法学评价。结果：成功的合成了活性的(SA)z?(Bio)x?PVA?(BCPDA)y?Eu3+复合物，构建PAPP?A试剂检测灵敏度为0.7mIU/L；批内变异系数在3.89%～4.96%之间,批间变异系数在7.35%～9.27%之间。结论：合成的(SA)z?(Bio)x?PVA?(BCPDA)y?Eu3+复合物较高的反应活性，可以用于多种试剂的构建。构建的PAPP?A试剂灵敏度高，具有潜伏的临床应用价

4、值。　　［］妊娠相关血浆蛋白A；固相时间分辨荧光免疫；亲和素—生物素—聚乙烯胺—4,7二氯磺苯基?1，10啡罗啉?2，9二羧酸—铕复合物；唐氏综合征　　DevelopADirectSolidPhaseLanthaneTime?resolvedFluoroimmunoassayReagentofPAPP?AutilizingPVA　　Abstract:ObjectiveTodevelopadirectsolidphaselanthanetime?resolvedfluoroimmunoassayreagentofPAPP?Abysynthesizingaplexof(SA)z?(B

5、io)x?PVA?(BCPDA)y?Eu3+.MethodsPolyvinylamine(PVA)chelateof4,7?bis(chlorosulfophenyl)?1,10?phenanthroline?2,9?dicarboxylic?acid(BCPDA).UsinglabeledPVAplex,munoassayofPAPP?AandevaluatedassaycharacteristicsofPAPP?Akit.ResultsitsachievedIU/L.ThecalibrationcurveIU/L.Intra?andinterassayimprecision(

6、CV)aproteinA;Directsolidphaselanthanetime?resolvedfluoroimmunoassay;Streptavidin?biotin?Polyvinylamine?europiumchelateof4,7?bis(chlorosulfophenyl)?1,10?phenanthroline?2,9?dicarboxylic?acid;Doe　　妊娠相关血浆蛋白A(PregnancyassociatedplasmaproteinA，PAPP?A)是一种高分子α2糖蛋白，20世纪70年代在孕妇血清中被发现［1］。在孕妇血中主要PAPP?A是胎

7、盘滋养层组织分泌，它是一种异源四聚体，由两个分子量为200000~250000亚基构成。PAPP?A亚基和两个嗜红细胞主要基础蛋白(Proformofeosinophilmajorbasicprotein)以二硫键结合而成［2］，在孕妇血中只存在微量游离单体PAPP?A。PAPP?A亚基由1547个多聚核苷酸构成，包括1个拉长的锌指结构，3个Lin—notch重复序列，以及5个短一致重复序列［3］。在体内PAPP?A是一种蛋白酶，主要针对胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP?4