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时间:2018-10-30
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1、层黏连蛋白α1、α2、α3、α5亚基在人脑胶质瘤中的表达【关键词】脑肿瘤神经胶质瘤肿瘤转移层粘连蛋白免疫组织化学ABSTRACT:ObjectiveToexploreexpressionpatternsoflamininα1、α2、α3、α5subunitinthehumanbrainglioma.MethodsTheexpressionoflamininα1、α2、α3、α5subunitin77brainglioma,8normalbraintissueand10metastatictumorspeci
2、mensmunohistochemistryandimageanalysistechnique.Results1.Thereininα2、α3subunitandpositiveexpressionoflamininα1、α5subunitinthehumanbraingliomas,ourcellmembrane,plasma.Thepositivestainingintensitya(P<0.001).2.Thereininα5subunitinbloodvesselendothelialcell
3、sandbasalmembrane,a(P>0.05),butetastatictumor(P<0.05).Conclusion1.Theexpressionintensityoflamininα1、α5subunitintumorcellsa.2.Theexpressiondifferenceoflamininα5subunitinbraingliomaandmetastatictumoretabasisbehavioroftumorcells.KEY)糖蛋白,它们参与基底膜构建,对维持基底膜
4、的完整结构起重要作用,还在细胞黏附、生长、迁移中扮演着至关重要的角色[1]。研究表明,某些LN分子在胶质瘤细胞中表达增高,且与肿瘤病理级别相关,参与胶质瘤侵袭性生长而罕见颅外转移行为的调控[23],但是以往的研究多是针对LN蛋白分子或某些LN亚型分子的研究,如LN5,LN8,LN9,LN10/11等。本实验采用免疫组织化学SP法检测LNα1,α2,α3,α5亚基在不同病理级别的脑胶质瘤中的表达情况,探讨其与人脑胶质瘤生物学行为的关系。 1材料和方法 1.1材料 手术切除并经病理检查证实的人脑胶质瘤标
5、本77例,其中星形细胞瘤41例、少突胶质细胞瘤7例、混合型胶质细胞瘤10例、室管膜瘤9例、髓母细胞瘤3例、胶质母细胞瘤7例。77例中,男性49例、女性28例,年龄(35±5.9)岁(3~70岁)。参照2000年aixinBio公司。 1.2.2免疫组织化学 使用柠檬酸盐(PH6.0)高温高压修复法进行抗原修复,免疫组织化学使用超敏SP法,具体参照说明书进行。抗体工作浓度(1∶100)。 1.2.3结果判断 定位于脑胶质瘤细胞质及细胞膜上根据染色程度及染色细胞百分率进行分析评分[3]:着色缺如者为0分
6、、淡者为1分、适中者为2分、深者为3分;着色细胞占细胞记数百分率<5%为0分、5%~25%为1分、26%~50%为2分、>50%为3分;每张切片着色与着色百分率得分相乘为其最后得分:规定0~1分者为阴性(-)、2~3分者为弱阳性(+)、4~6分者为阳性(++)、>6分者为强阳性(+++)。在脑胶质瘤血管内皮细胞膜及血管基膜染色阳性的指标,利用ImageProPlus6.0软件测定阳性染色的血管内皮及基膜的平均光密度值(averageopticaldensity,AOD)和阳性染色的微血管管壁厚度(mi
7、crovascularWT)。 1.3统计学处理 应用SPSS11.5软件对检测数据进行统计处理,采用单因素方差分析、Kendall’s等级相关分析检验方法。P<0.05为差别有统计学意义。LNα5不仅在所有胶质瘤的瘤体及瘤周肿瘤细胞膜与细胞质上有染色,且病理级别越高染色越强;同时,血管内皮细胞及基膜也出现阳性染色,表现为靠管腔的一层内皮细胞和基膜呈连续、完整的阳性染色,但染色强度在胶质瘤各级别之间无明显差异。然而,LNα5在正常脑组织的血管内皮细胞及基膜无阳性染色,在脑内转移瘤的血管内皮细胞及基
8、膜也仅见弱阳性染色,但染色基膜呈不连续,染色强度低于胶质瘤组;不过,胶质瘤和转移瘤标本血管腔中红细胞膜上均可见LNα5强阳性染色(图1,2)。 2.2LNα2、α3的表达情况LNα2、α3亚基在胶质瘤细胞及血管内皮细胞和基膜中均无阳性表达。 3讨论研究发现,LN能增强胶质瘤细胞活动性,促进胶质瘤细胞粘附和迁移,促进肿瘤的侵袭[1,3]。陈菊祥等利用含13939种人类基因的BioStarH40S型芯片筛选人脑胶
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