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时间:2018-10-28
《非小细胞肺癌血行微转移以及基因多态性之相关研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、非小细胞肺癌血行微转移以及基因多态性之相关研究第一部分CD44V6和CK19基因表达与非小细胞肺痛血行微转移的相关研究肿瘤的侵袭转移是一个非常复杂的多步骤过程,包括肿瘤细胞的去粘附,肿瘤细胞自癌巢中脱落,对细胞外基质的點附、降解,迁移进入血管形成微转移癌细胞,到达勒器官和组织中描定生长、增殖,最终形成转移灶。血行播散是恶性肿瘤转移的重要途径,部分恶性肿瘤患者原发肿瘤小,但是已有肿瘤细胞通过血行转移至远处组织和器官,血行微转移在其中起重要作用。Ashorcells,CTC)概念,肿瘤细胞进入外周血中形成循环肿瘤细胞是肿瘤远处转移的前提,大量研究证明CTC与
2、恶性患者的临床分期以及预后密切相关研究显示,CK19是上皮的恶性肿瘤较为敏感的肿瘤特异性分子标志物,而黏附分子介导的细胞粘附在癌细胞从原发癌巢上的脱离、癌细胞进入血循环、癌栓的形成、附壁等肿瘤侵袭和转移过程中起重要作用,与恶性肿瘤细胞的迁移、转移密切相关。因此,我们以CD44V6和CK19基因作为标志物,应用免疫组化技术检测非小细胞肺癌(non-smal1eel1lungcancer,NSCLC)组织CD44V6、CK19在中的表达,同时采用RT-PCR技术检测非小细胞肺癌外周血中CK19mRNA、CD44V6mRNA表达情况,探讨以CD44V6、CK1
3、9作为标志物检测非小细胞肺癌外周血中循环肿瘤细胞的可行性,分析CD44V6和CK19基因表达与NSCLC外周血微转移的关系及其临床意义。研究对象和方法1.临床资料所有病例选自山东省肿瘤医院胸外科行手术治疗的56例NSCLC初治患者,征求患者家属同意,术前完善检查排除其他恶性肿瘤,术后病理证实为NSCLC。采集20例肺部良性病变患者正常肺组织和外周血作对照。56例非小细胞肺癌病例临床资料如下:男性33例,女性23例;年龄32?75岁,中位年龄53.7±1.3岁;>60岁30例,<60岁26例;麟癌20例,腺癌29例(普通腺癌20例
4、,细支气管-肺泡癌9例),其他类型7例;不吸烟和吸烟指数<400年支者21例,吸烟指数〉400年支者35例;TNM分期:I期14例,11期27例,III期15例(依据2009年国际抗癌联盟(LHCC)制定的NSCLC标准分期);淋巴结转移明性21例,淋巴结转移阳性,其中122例,N213例。所有病例均排除术前有放化疗或其他抗肿瘤治疗史。第二部分手术操作对非小细胞肺癌术中血行微转移的影响肿瘤外科手术操作原则要求进行无瘤手术操作,然而手术过程中不可避免的会对肿瘤进行接触甚至挤压,从而导致肿瘤细胞自瘤床脱落、迁移进入血循环中,形成CTC。恶性肿瘤侵袭转移
5、过程中,癌细胞自原发灶脱落、迁移进入血循环中应该称得上是早期较大概率事件。而在外科手术过程中,令外科医生担心的是手术操作可能促进术中癌细胞入血,从而增加术后病人远处转移发生的危险性。因此,如何最大限度减少手术操作对血行微转移的影响,预防医源性播散和改善患者预后极其重要。肺癌手术过程中,先结扎肺静脉后结扎肺动脉的手术方式是否可预防或减少CTC的形成和医源性播散以及改善患者预后,尚存争议目前,肺癌CTC检测技术主要是采用流式细胞技术和RT-PCR技术进行定性或半定量分析,相关基因标志物特异性和灵敏度不高,假阳性率高。恶性肿瘤患者血液中的微转移癌细胞仅部分形成
6、转移灶,血行转移灶形成与CTC的侵袭、點附能力、机体免疫状况、祀器官局部的微环境有关。因而寻找可定量检测且灵敏度和特异度更高的,并反映CTC侵袭粘附性的标志物,对于准确评估手术操作对血行微转移的影响具有重要意义。我们针对这些问题,首先在论文第一部分应用免疫组织化学技术和RT-PCR技术检测肺癌组织和血液中CK19、CD44V6基因表达状况进行定性分析,确定了可选择CK19、CD44V6基因作为检测祀点。继而进一步釆用突光定量RT-PCR技术检测肺癌肺静脉血中CK19、⑶44V6基因表达,探寻CTC定量检测方法;比较手术前后期CTC表达差异,分析肺动静脉结
7、扎顺序对于血行微转移和预后的影响。研究对象和方法1.临床资料全部病例取自2009年06月至2011年06月山东省肿瘤医院胸外科行手术治疗的30例NSCLC患者,对照组15例均为无肿瘤病史的健康志愿者。30例非小细胞肺癌病例临床资料如下:男性14例,女性16例;年龄32-75岁;>60岁18例,<60岁12例;麟癌14例;腺癌16例;不吸烟和吸烟指数<400年支者10例,吸烟指数〉400年支者20例;I级9例,II级14例,III级7例。所有病例均按2009年UICC制定的NSCLC标准分期:I期9例,II期13例,III期8例;淋巴结转
8、移阴性17例;淋巴结转移阳性13例。第二部分手术操作对非小细胞肺癌术......
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