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《体外诱导脐血单核细胞分化为破骨样细胞的研究.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、体外诱导脐血单核细胞分化为破骨样细胞的研究【摘要】目的建立人破骨样细胞体外培养的方法，探讨la，25(0H)2D3、巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)、前列腺素E2(PGE2)等骨吸收刺激因子对破骨细胞分化、增殖和功能的影响，为进一步研究正畸牙齿移动的生物力学机制奠定基础。方法将脐血单核细胞接种于预置盖玻片和骨片的24孔培养板中，实验组分别加入诱导因子1a，25(OH)2D3、MCSF、PGE2，对照组不加，每3d换液一次，培养7d。采用倒置相差显微镜、TRAP染色等方法观察破骨样细胞的形成情况。结果第3天实验组单核细胞出现融合趋势，
2、第7天TRAP染色可见阳性的多核破骨样细胞，但尚未形成骨吸收陷窝，以1a，25(OH)2D3组破骨样细胞形成数量最多。结论脐血单核细胞经la,25(OH)2D3、MCSF、PGE2体外诱导培养后可分化为TRAP(+)多核的破骨样细胞，且10-8mol/L的la,25(OH)2D3具有最强的生物学效应。【关键词】脐血单核细胞；破骨样细胞；细胞培养；1a,25(OH)2D3；MCSF；PGE2Differentialionofosteoclastlikecellsinducedfromumbilicalcordbloodcellsinv
3、itroABSTRACT：ObjectiveToestablishastableandusefulmethodforculturinghumanosteoclastlikecellsinvitro,andinvestigatetheeffectof1a,25(OH)2D3,MCSFandPGE2onosteoclastsdifferentialion,proliferationandactivationsoastolaythefoundationforfurtherstudyofthebiologicalmechanismforto
4、othmovement.MethodsTheHCMNCwereiso1atedandculturedin24wellplatewithcoverslipsandhumandentineslices.Theexperimentgroupwasculturedwithla,25(OH)2D3,MCSFandPGE2,respectively,whilethecontrolgroupwasnot.Theliquidwaschangedevery3daysandthewholecultureprocesslastedfor7days.The
5、phasecontrastmicroscopyandTRAPstainingwereadoptedtoidentifyosteoclastlikecells.Results0nthe3rddaythemonocytesbegantofuseandonthe7thdaypositivemultinucleatedcellscouldbeseenwithTRAPstaining,butabsorptionpitwasnotformedonthedentinslices.Thegroupwithla,25(OH)2D3hadthelarg
6、estnumberofosteoclastlikecells.ConclusionAfterthemonocytesinUCBareculturedbyla,25(OH)2D3,MCSF,PGE2induction,theycanturnintoTRAP(+)multinucleateosteoclastlikecells,thela,25(OH)2D310-8mol/LbEingthemosteffective.KEYWORDS:mononucleatedcellofumbilicalcordblood；osteoclast；ce
7、llculture；1a,25(OH)2D3；MCSF；PGE2破骨细胞(osteoclastcells：OC)是具有独特骨吸收功能的多核巨细胞，来源于造血细胞系，0C由单核细胞(mononucleatedcells,MNC)融合而成，不能增殖和传代。破骨样细胞(osteoclastlikecells，0LC)是指实验中原代培养或诱导生成的，具有0C性质，用于细胞学或分子生物学研究的细胞。OLC与0C的不同是前者用于实验研究，而后者位于骨改建部位。体外培养0C，在酮C融合的过程中，受到多种细胞因子以及产生这些细胞因子的细胞及其相关刺
8、激的影响，研究表明：la，25(OH)2D3、巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)、前列腺素E2(PGE2)等是0C分化发育的关键因子，可支持血缘性MNC向0C分化。Fujikawa等［1］证明在人外周血中存在破骨细胞前体细胞，而人脐血中
