瘦肉精在猪尿中的浓度与组织残留消除的相关性研究

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1、瘦肉精在猪尿中的浓度与组织残留消除的相关性研究李伟源廖敬军陈俏文黎碧琳麦倩莹李郎平指导教师：陈杖榴黄敁会(兽医学院,华南农业大学,广东广州，510642)摘要：15只健康猪(42.8±4.4kg),随机分为3组，在饲料中添加5ng/kg盐酸克伦特罗，连续饲喂7天后，利用ELISA法监测猪只饲养过程中尿液和各种组织中盐酸克伦特罗，研究其残留的消除规律。试验结果表明：克伦特罗(瘦肉精)在猪体内各种组织有广泛的分布，在零休药期，按每g组织含克伦特罗的残留浓度，最高为肺和肝，分别达1497.7ng/g和1428.2ng/g，其他组

2、织依次为肾脏>脾脏>心脏>肌肉，肌肉最低为98.1ng/g，肺和肝的浓度约为肌肉的15倍；尿液和各种组织中盐酸克伦特罗的消除呈正相关关系，通过监测猪尿中瘦肉精的含量就可以真实的反映生猪各种组织中的瘦肉精残留情况；同时表明，开展生猪的瘦肉精残留监测时，尿中检测阳性判定限定在1~2ng/nt是安全可行的。关键词：瘦肉精；猪；残留；消除规律；安全瘦肉精，学名克伦特罗(Clenbutcrol，CL),商品名称为平喘素、克喘素，是一种人工合成的P肾上腺素能受体激动剂，化学名称为1_［4氨基3,5二氣苯基］_2-叔丁氨基乙醇盐酸盐［1

3、］。80年代初发现P受体激动剂可促进动物机体生长并改变机体胴体组成。资料显示，在许多动物的研究中均发现这类物质对机体的营养起着重分配作川，从而调节机体的牛长发育，能使肌肉增重和体脂下降1990年前在欧美畜牧业中矜应用作饲料添加剂，后因发现消赀者食用含有此药残留物较多的肉品，异致多次集体屮毒事件［3促使欧美国家明令禁止使用此药作为饲料添加剂饲喂家畜。在90年代中期，我国畜牧业生产特别足在生猪饲养中开始人量使川［41,£11998年4月发生的乔港“克伦特罗中诲事件”后，在我国发生多起集体屮毒事件［5’6’7’81。我国ft1

4、998年开始在全国范围内对非法生产、销饩和使用盐酸克伦特罗等药品行为进行杏处。农业部£11999年开始在全网部分地区进行生猪瘦肉精残贸情况的监督抽资，収得了很人成效，但时至今U,部分地区的生猪瘦肉精残贸M题仍然十分严重，威胁和危害着人民的身体健康。为了保障人民的健康，FI前主耍采川监测尿中冇无兑伦特罗來判定生猪是否有瘦肉精残留。但组织中瘦肉精残留与尿中浓度的关系尚未见报道，为什么通过检测尿中兑伦特罗的含虽就能确定猪的各种组织中的含量？它们的关系是怎样的？这种检测方法能否确保猪肉产品的安全？带卷这儿个问题，我们设计了木试验，

5、在猪饲料中添加盐酸兑伦特罗，通过检测停止给药前P不同时间中尿液和各种对食性组织中克伦特罗的含fi，建立在模拟生猪饲养环境下尿液中盐酸兑伦特罗的消除规律和各食用组织中的药物残留的矢系，从ifU证实监测猪尿中瘦肉精的含量就讨以反映岀猪体内各食用组织的残留悄况，并推算出尿液屮的最合适的判定限。"本作品获第八届“挑战杯”全国人学虫课外学术科技作品兗務三等芡1材料与方法1.1动物15头健康的杜洛克、讼白、约克岌杂交公猪(已去势)，体重42.8±4.4kg。按常规饲养，白由饮水，一天饲喂两顿，每顿给料量0.7〜0.8kg/失，饲料为全

6、价日粮，不含抗菌药物。临床观察两周表现健旗。1.2药品和试剂盐酸克伦特罗原料药,含量99.9%。RIDASCREEN*ClenbuterolFAST克伦特罗Elisa检测试剂盒(ArtNO.:R1701)及RIDAC18固相萃取小柱(ArtNO.:R2002),德国R-BiopharmaAG公司生产。1.3给药和样品采集将盐酸克伦特罗按每kg饲料5mg的浓度添加，连续饲喂7d活停止给药。自给药P0、1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35d采集尿样,分别于停止给药后0

7、、19、27d将猪只屠宰，每次随机取5只，分别采集肌肉、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏组织。所有样品采集Plh内置-18°C下保存，待测。1.3ELISA测定程序使用前将试剂盒室温(20〜25°C)放置1〜2h。按每个标准溶液和样品做2个重笈测定计算所需酶联板条的数量，插入框架。微孔中加入100pL用缓冲液稀释的抗体，用封口膜封好，室溫孵育15min。倒出孔内液体，将酶联板倒置在吸水纸上拍打，使孔内没有残余液体，加水于酶联板的微孔內，倒出孔P、j液体，再将酶联板倒置在吸水纸上拍打，秉复操作两次。精密吸取20(iL标准溶液或样

8、品至微孔中，并4:每孔内加入100

9、iL用缓冲液稀释的酶结合物，在微型震荡器上混匀，用封口膜封好，室温孵竹30min。倒出孔内液体，将酶联板倒置在吸水纸上拍打，使孔内没科残余液体，加水到酶联板的微孔倒出孔A液体，再将酶联板倒置在吸水纸上拍打，熏复操作两次。每孔加50pL底物缓冲液和50发色剂，在微型振荡