喹赛多在猪、鸡和鱼体内的残留消除研究

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1、华中农业大学硕士学位论文喹赛多在猪、鸡和鱼体内的残留消除研究姓名：邱玉敏申请学位级别：硕士专业：基础兽医学指导教师：王玉莲201206喹赛多在猪、鸡和鱼体内的残留消除研究研究生：邱玉敏导师：王玉莲副教授(国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)／农业部食品安全评价重点实验室，中国武汉430070)摘要喹赛多是喹嗯啉类新品种，对畜禽及鱼类均具有广谱抗菌、促生长和提高饲料利用率的作用，且与同类药物相比毒性小、安全性高，具有广阔的开发应用前景。作为食品动物用药，食品安全性是重要的研究内容之一。残留消除研究是食品动物用药安全性评价的核心内容之一，也是确

2、定残留标志物、残留靶组织及制定休药期等食品安全性标准的直接科学依据。本研究在放射性示踪研究的基础上，按推荐剂量和生产条件长期饲喂喹赛多，开展喹赛多及其主要代谢物在猪、鸡和鱼体内的残留消除研究，进一步确证喹赛多在食品动物体内的残留标志物与靶组织，提出休药期标准，为喹赛多的食品残留监控提供明确的监控对象与技术标准。同时考察喹赛多及其代谢物在环境中降解规律，为合理评价喹赛多的环境安全性提供科学依据。1．喹赛多及其主要代谢物在猪、鸡和鱼可食性组织中残留检测方法的建立多残留检测方法的建立：通过对样品前处理及液相色谱条件的优化，确定最佳条件，建立了喹赛多

3、及其5种主要代谢物(Cyl、Cy2、Cy4、Cy6、Cyl2)在猪、鸡和鱼可食性组织中的高效液相色谱残留检测方法。样品先用1％偏磷酸10％乙腈50％甲醇提取，经HLB固相萃取小柱净化浓缩，再用三氯甲烷反萃HLB柱的洗脱液，达到进一步除杂的效果，用HPLC在320nm紫外波长下测定。结果显示，猪、鸡和鱼可食性组织中，Cyx、Cyl、Cy2、Cy6和Cyl2在肝脏、肾脏、肌肉和脂肪(或皮脂)中的LOQ均为2099,'kg；Cy4在四种组织中的LOQ均为401．tg／kg。在添加不同定量限浓度水平上，平均回收率介于68．0％79．5％之间，变异系数

4、茎9．6％。脱二氧喹赛多单残检测方法的建立：通过对样品前处理及液相色谱条件的优化，建立了脱二氧喹赛多在猪、鸡和鱼可食性组织中的高效液相色谱残留检测方法。29组织用乙酸乙酯提取两次，合并提取液氮气吹干，用HPLC在280nm紫外波长下测定。结果显示，在猪、鸡和鱼可食性组织中，Cyl的最低定量限为华中农业大学2012届硕士毕业论文20p,g／kg，在添加不同定量限浓度水平上，平均回收率为71．4％-78．4％之间，变异系数510％。2．喹赛多在猪、鸡和鱼体的残留消除研究健康三元杂交猪25头、1日龄科宝肉鸡30只和健康鲤鱼50尾分别连续饲喂含喹赛多

5、150mg／kg(鱼饵料中喹赛多含量为100mg／kg)的加药饲料60天、40天和30天，于停药后不同时间点宰杀动物，取肝脏、肾脏、肌肉、脂肪(皮脂或皮肤)和鱼肠道，分别按上述良好总方法测定喹赛多及其代谢物的残留量。结果如下：猪：停药6h，肝脏和肾脏中均检出喹赛多、脱二氧喹赛多和喹嗯啉．2．羧酸，残留量为21．899／kg一55．099／kg。其中脱二氧喹赛多在肾脏中持续3天可检出，喹赛多和喹嗯啉．2．羧酸在肝肾中持续时间均为停药后6h或1d。肌肉中停药6h，能检测到喹赛多和喹嗯啉．2-羧酸，残留量分别为27．599／kg和37．699／kg

6、；停药1d后仅能检测到喹嗯啉．2．羧酸，之后未检出喹赛多相关残留物。脂肪中停药6h，仅检出少量的喹赛多和N’．(喹嗯啉-2-甲基)．氰乙酰肼，残留量分别为22．2p．g／kg．34．699／kg，之后未检出相关残留物。结果证明，喹赛多在猪体内的残留量低、残留消除迅速，残留标志物为脱二氧喹赛多，残留靶组织为肾脏。结合毒理学研究和代谢研究结果，推算出喹赛多在猪肾脏的最高残留限量为32．4mg／kg，以此为依据，喹赛多在猪的休药期为零天。鸡：停药6h，肝脏中检测到了四种化合物(Cyx，Cyl，Cy6，Cyl2)，残留量为24．7．49．799／kg

7、。Cyl和Cy6在停药24h后不可检出，喹赛多和Cyl2仅停药6h可检出，之后不可检出。肾脏中检出五种化合物(Cyx，Cyl，Cy4，Cy6，Cyl2)，残留量为20．5．53．699／kg。Cyl和Cy6分别于停药3d和1d后消除至检出限以下，其余残留物均仅在停药6h可检出，之后消除完全。肌肉和脂肪中在停药6h仅检测到了Cyl2，残留量在24．7·53．6p．g／kg范围内。停药12h，脂肪中检出少量Cy4，而肌肉中检测不到任何化合物。结合毒理学研究和代谢研究结果，推算出喹赛多在鸡肾脏的最高残留限量为32．4mg／kg，以此为依据，喹赛多在

8、鸡的休药期为零天。鱼：停药6h，五种组织中均检测到了Cyx、Cyl、Cy4和Cy6四种化合物，残留量在22．5-42．899／kg范围内。肝脏和肾脏中，Cy4停药6