环丙沙星在鱼体内残留的研究

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1、环丙沙星在鱼体内残留的研究葛虹深圳市水产品质量监督检验中心518031张杨齐采霞葛雷陈霞湖北省水产科学研究所430071环丙沙星是合成的第三代含氟的喹诺酮类抗菌素药物,具有广谱抗菌活性作用强、体内分布广、杀菌效果好、对所有细菌的抗菌性均较诺氟沙星强2-4倍。因此近年来环丙沙星已广泛的被应用于动物产品养殖,尤其是水产品养殖中对于致病性细菌病的治疗。使用环丙沙星后，其药物的残留问题十分严重。环丙沙星对生物体的危害是通过药物在鱼体的残留，又经过食物链进入人体。摄入环丙沙星残留较高的鱼类会造成人体内脏损伤,消化系统的出血,肝肾功能异常炎症及

2、衰竭,血液系统白血球减少症,神经系统的疾病和过敏症也有发生。环丙沙星在鱼体中残留研究较少，使用后残留水平变化的报道不多。本文就环丙沙星在鱼体给药及停药不同时间的残留水平做了初步研究，结果表明，环丙沙星在鱼体内的代谢速度较慢，富集后残留在鱼体有一个较长的过程。本实验安排了采用不同给药期及不同休药期环丙沙星药饵连续投喂斑点叉尾鮰,检测其鱼体环丙沙星残留量，并分析其代谢速度。同时做了一组空白和一组自行研制的“肠炎灵”中药饵投喂对照，进行养殖后鱼肉样本的检测，鱼体中环丙沙星残留为未检出。1.材料与方法1.1试验材料采用养殖场成批购进斑点叉尾

3、鮰(规格60-100g/尾左右),在室内驯养10天，投饵驯养，剔除伤残后分组,每组12尾。1.2养殖药饵试验药饵试验组以投喂药饵7天、14天、21天、25天、32天以及停药7天、14天、21天、25天等分阶段采集鱼肉样。中药制剂组及空白对照组,随试验同时进行投喂,按时采集鱼肉。71.2.1药饵采用江西汇仁药业公司生产的盐酸环丙沙星片剂（0．25g/片）,添加到鱼饲料中.添加量为1%,混匀,制成颗粒饵料.每天投喂2次。药饵量为鱼体重的3%。中药组为投喂自行研制的“肠炎灵”中药,为3%的药饵投喂。(中药饵为湖北省水产科学研究所承担的省科

4、技厅重大项目的研究成果)空白组仅喂普通饵料。1.2.2养殖时间5月13日至5月20日，驯养期。设对照饵（饵料配方相同）。5月20日开始投喂，实验到6月19日结束。实验期间定时换水，定时充氧。实验期间各组实验鱼基本无死亡。1.2.3鱼肉采集时间5月20日，第一次采样，空白样。同时开始投喂实验饵。5月27日，第一次采肉，投药饵7天；6月2日，第二次采肉，投药7天，停药7天；投药14天；6月9日，第三次采肉，投药14天，停药7天；投药7天，停药14天；投药21天。6月13日，第四次采肉，投药7天，停药18天；6月20日，第五次采肉，中药组

5、的鱼肉样对照；投药7天，停药25天；投药32天。在各药饵试验组采肉样的同时采集空白对照组。1.3检测方法与仪器1.3.1检测方法环丙沙星检测方法按农业部2003年公布的236号文《12种动物性食品兽药残留检测方法》执行。7本方法检出限为1.0µg/kg。1.3.2检测仪器采用Agilent1100液相色谱仪，检测器为荧光检测仪（FLD），EX=280nm，Em=280nm。1.2.3试剂乙腈，甲醇均为色谱纯；正已烷，无水硫酸钠，柠檬酸、乙酸铵均为分析纯。1.2.4色谱条件色谱柱：ODSC18柱（4.6×150mm）；流动相：甲醇：柠

6、檬酸-醋酸铵混合缓冲液=25：75；流速:1.2ml/min；柱温：40℃。1.3.5分析检测步骤取5.0g样品，加入10g无水硫酸钠，加15ml酸化乙腈，用高速组织捣碎机匀浆，振摇15min，转入离心管中以4500r/min离心10min，取上清液。再用15ml酸化乙腈重复上述操作一次，合并上清液。上清液置于分液漏斗，加入25ml正已烷，烈剧振动5min，静置分层，取下层乙腈层移入烧瓶，55℃旋转蒸发至干。用1ml流动相充分溶解残渣。经0.45µm微孔滤膜过滤，供高效液相色谱仪测定。1.3.6实验质量控制在样品测试时采用了加标回收

7、的方法。实验回收率为91％。2．结果2.1投药饵不同时间环丙沙星残留结果见表1。表1投药饵不同时间环丙沙星残留（µg/kg）7投药时间（天）体内残留量（µg/kg）71．641461．882147．003271．202.2投药饵天后不同停药期环丙沙星残留量结果见表2。表2投药饵7天后不同停药期环丙沙星残留（µg/kg）投喂药饵时间（天）停药时间（天）体内残留量（µg/kg）778．6471412．087188．187259．321479．0214188．182.3对照组及中药组鱼体中环丙沙星残留结果见表3。表3对照组及中药组鱼体中环

8、丙沙星残留投喂时间（天）体内残留量（µg/kg）0未检出7天未检出14天未检出21天未检出32天未检出肠炎灵组未检出73．分析与讨论环丙沙星长期以来作为鱼用药物使用，尤其是特种水产品因其经济价值较高，驱使养殖者使用这种高效、广谱的杀菌