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时间:2018-10-26
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1、梅州地区3309例女性人乳头瘤病毒检测结果及其基因类型分析【摘要】目的了解24种人乳头瘤病毒(Humanpapillomaviruses,HPV)型别在梅州地区女性人群中的最新感染情况及分布特点。方法采用赛乐其基因芯片检测方法对2011年12月到2014年12月在妇科体检和就诊的3309例不同年龄的女性患者进行了HPV基因检测,分析最新HPV亚型感染情况。结果3309例受检者HPV总感染率为17.47%,其中单一基因型别感染率14.17%,双重感染率2.60%,三重及以上感染率0.7%。HPV基因型
2、分布阳性率居前5位的是HPV52C2.87%)、HPV43(2.51%)、HPV58(2.45%)、HPV16(2.39%)和HPV11(1.45%)。感染率居前3位的年龄段是彡60岁(33.33%),20〜29岁(19.14%),30〜39岁(17.32%);20〜24岁及彡60岁年龄段与各组间(除55〜59岁)总感染率比较,差异均有统计学意义(P1.3检测方法DNA提取:震荡混匀临床标本,取lml转移至1.5ml离心管中,12000rpm,离心10min,弃上清后,采用赛乐其基因组抽提试剂盒提取
3、DNA,具体操作步骤见试剂盒说明书,冷冻保存。将PCR反应液及DNA模板依次添加混匀成25UL/反应的扩增反应体系,其中DNA模板5UL;另外,阴阳性对照各一管。扩增程序:50°C,2min,94°C15min,94°C30s,45°C1min,72°C30s,进行40个循环;72°C延伸lOmin后,4°C密封保存备用;基因芯片检测:将10UL上述PCR产物加入直用型杂交液中,混匀后加入基因芯片孔中,经45°C水浴35min后,让其冷却至室温。经洗涤液洗涤后,加入直用型BW反应液(100PL)室温
4、下反应15min,洗涤后加入显色液100uL避光常温下反应5min,充分洗涤后,应用芯片自动分析系统进行判断。结果判断:使用自动分析报告系统检测,信号位置灰度值与背景灰度值大于4为阳性,或肉眼观察检测结果,出现蓝色信号,信号斑点颜色有深浅,均代表阳性;多个圆点阳性即为多重感染。每张芯片上有PCR反应质控点和杂交显色质控点各一个。1.4统计学方法所有数据均采用Excel软件进行整理,应用SPSS19.0软件进行统计学分析,计数资料的组间比较采用x2检验,检验水准:a=0.05。2结果2.1HPV检测结
5、果3309例检测标本中,共检出23种HPV亚型,HPV感染578例,总感染率为1747%。其中,高危型总感染率为13.72%(454/3309),以HPV52为主,检出率2.87%;低危型总感染率为3.75%(124/3309),以HPV43为主,检出率2.51%。HPV型别检测结果见表1、表2。2.2HPV感染基因型分布及多重感染情况分布单一基型别者469例,检出率14.17%;双重感染者86例,检出率2.60%;三重及以上感染者23例,检出率0.7%。HPV基因型分布阳性率居前5位的是HPV52
6、(2.87%)、HPV43(2.51%)、HPV58(245%)、HPV16(2.39%)和HPV11(1.45%)。2.3HPV感染各年龄段分布如图1所示,总HPV阳性率居前3位的是彡60岁(33.33%),20〜29岁(19.14%),30〜39岁(17.32%),各年龄段总HPV感染率比较(P=0.007HPV感染的影响因素中,包括地区、年龄、性生活开始时间、生活习惯等相关因素,其中年龄是其重要的一项因素。deSanjoseS等[19]对相关报道的统计分析发现,HPV感染高峰主要在34岁之前,
7、在35〜44岁年龄段HPV感染率逐渐降低,在45〜54岁除亚洲地区外其他地区的HPV感染率又有所升高。张劲松等[20]的研究结果则显示,女性HPV感染高峰在29岁以下和50岁左右,感染率年龄分布呈“S”形分布。本研究结果发现20〜29岁和>60岁年龄段感染率较高,其中又以20〜24岁及彡60岁年龄段感染更严重,与各组间(除55〜59岁)总感染率比较均有显著性差异,随着年龄的增加HPV的感染率开始逐渐下降,在55〜59岁年龄段又开始升高,并在>60年龄段中迗到一较高的感染率。感染率年龄分布与Franc
8、eschiS等[21]的研究结果基本一致,感染高峰呈明显的U型分布,说明女性越年轻,开始性生活时间越早越活跃,感染HPV的概率越高,而中老年女性由于正处于围绝经期,激素的波动可能导致机体生理及免疫力开始下降,使得对病毒的抑制及清除能力明显减弱。所以有必要针对本地区20〜24岁及彡55岁年龄段女性人群开展HPV宣传教育,并建议其每年体检,从而降低HPV的感染率。综上所述,通过分析2011〜2014年3309例的HPV检测结果,发现梅州地区女性最新HPV感染率接近国内平均
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