hoxa9和shh在神经干细胞定向分化过程中的作用研究

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1、Hoxa9和Shh在神经干细胞定向分化过程中的作用研究摘　要：目的：了解神经干细胞诱导分化所得胆碱能神经元和运动神经元中Hoxa9基因与音猬因子（Shh）的差异表达情况，探讨它们在神经干细胞定向分化过程中的作用。方法：采用实时定量PCR技术，观察Hoxa9基因与音猬因子在胆碱能神经元和运动神经元中的表达情况。结果：Hoxa9在胆碱能神经元中的表达是在运动神经元中的0.169倍（P<0.05）。Shh只在运动神经元中有表达。结论：Hoxa9与Shh在运动神经元和胆碱能神经元之间的表达差异是由于分化时段的不同所导致的。二者在神经干细胞向运动神经元的分化过程中都起着重要的作用。　　关键词：

2、运动神经元；胆碱能神经元；神经干细胞；Hoxa9基因；音猬因子（Shh）；脊髓损伤；运动损伤　　：G804.2　文献标志码：A　：1007-3612（2012）11-0058-03　　The　Effects　of　Hoxa9　and　Shh　on　Oriented　Differentiation　of　the　Neural　Stem　Cells　　HU　Qikai1，　edicine　University，　Taiyuan　030024，　Shanxi　China；2.　Experimental　Animal　center，　Shanxi　Medical　University，　Taiyu

3、an　　030001，　Shanxi　China）　　Abstract：Objective：　To　study　the　differential　expression　and　effect　of　Hox　gene　and　Shh　betotor　neurons　　neural　stem　cells.　Methods：　Use　the　ABI’s　TaqMan　MicroRNA　Assays　realtime　PCR　to　observe　the　expression　of　Hox　gene　and　Shh　in　cholinergic　neurons　and　motor　neurons.　

4、Results：　The　level　of　Hoxa9　in　cholinergic　neurons　otor　neurons　（P<0.05），　and　Shh　expressed　in　motor　neurons，　but　e　in　motor　neurons　and　cholinergic　neurons.　Both　Hoxa9　and　Shh　play　an　important　role　in　differentiation　from　neural　stem　cells　to　motor　neurons.　　Key　otor　neurons；　cholinergic　neur

5、ons；　neural　stem　cells；　homeoboxgenes　（Hoxa9）；　sonic　hedgehog（Shh）；　spinal　cord　injury；　sports　injury　　脊髓损伤是由于多种原因引起脊髓结构及功能的损害，是一种严重的致残性损伤。据统计，我国脊髓损伤的病因依次为高空坠落、车祸和重物砸伤等，而运动创伤所致的脊髓损伤也屡见不鲜。在一些体育比赛中，例如跳水，摔跤等，当外来的巨大暴力作用于运动员脊柱时将导致脊柱骨折或者脱位，使脊柱失去了对脊髓的保护作用，甚至脊柱骨折脱位后造成脊髓压迫，导致脊髓功能损伤。脊髓损伤发生后，损伤部位的神经轴突被撕裂，运动神

6、经元（Motor　neurons，　MNs）和神经胶质细胞死亡，幸存的轴突发生脱髓鞘改变，最终导致脊髓丧失传导下行的运动冲动和上行的感觉冲动的能力而发生截瘫。长期以来对于脊髓损伤，包括运动性脊髓损伤的治疗一直是一个难题。神经干细胞（Neural　stem　cells，　NSCs）的发现，为脊髓损伤开拓了新天地，为其治疗和修复受损的脊髓运动神经元，提供了新的治疗途径［1-2］。但目前对于神经干细胞向运动神经元诱导分化的研究仅局限于比较诱导分化后所得细胞与神经干细胞在某些标志基因上的差别，但这无法确定诱导所得细胞就是我们的目的细胞。Hoxa9基因（homeobox　genes）与音猬因子（so

7、nic　hedgehog　，　Shh）是MNs在体内发育的关键因子，且它们之间又存在着相互调控的关系，就此，我们在前期研究的基础上，采用实时定量PCR技术，观察Hoxa9基因与音猬因子在NSCs诱导分化所得胆碱能神经元（可以分泌乙酰胆碱的神经元，标志基因为胆碱乙酰转移酶（ChAT），运动神经元为胆碱能神经元中的一种）和MNs中的表达情况，探讨它们在NSCs定向分化过程中的作用。　　1　材料和方法　　1.1　材料　清洁级W