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1、几种典型植物精油的化学成分与其抗菌活性近年来,环保法规日益严格,人类更加注重健康,崇尚自然。在这种形势下,研发一些新型的天然、低毒的抗菌剂成了国内外抗菌领域的研究热点。植物精油,因其萃取自天然植物,同时又具有广谱的抗菌活性,日益受到国内外专家学者的关注,植物精油抗菌活性及其机制的研究也成了一个比较活跃的研究领域。植物精油又称挥发油或香精油,是萃取植物特有的芳香味儿油状液体,取自于草本植物的花、苞、叶、枝、根、树皮、果实、种子和树脂等,以蒸馏和压榨等方式提炼出来。研究报道称,植物精油具有广谱的抗微生物活性,能够
2、抑杀细菌、真菌和病毒[4-…。而且,植物精油能够影响微生物各个阶段的生长:生长延滞期延长,指数生长期的生长速率下降,总的细胞生长数量降低。除此之外,一些研究表明,植物精油能够抑制真菌毒素的产生,如Sindhu等[11]报道了姜黄(CS分析了它们的化学成分,研究了它们对革兰氏阴性的大肠杆菌(Escherichiacoli)和革兰氏阳性的金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的抗细菌活性,以及对黑曲霉(Aspergillusniger)和绳状青霉(Penicilliumfuniculosum)
3、这两种典型的常见污染霉菌的抗真菌活性,并探讨了植物精油化学成分与抗菌活性之间的联系。本研究选取了几种典型的植物精油,对其化学组分、抗细菌和抗真菌活性,以及化学组分与抗菌活性之间的联系开展了较为系统的研究工作,该研究将为获得具有高效抗菌活性的植物精油,开发新型的植物精油抗菌剂提供重要的研究基础。1材料与方法1.1菌株、培养基和精油香茅精油、山苍子精油、肉桂精油、丁香精油、迷迭香精油和大蒜精油均购自广州百花香料股份有限公司,为纯天然植物精油。大肠杆菌ATCC8739,金黄色葡萄球菌ATCC6538均购自美国菌种保
4、藏中心,由本实验室保存;黑曲霉GIM3.412,绳状青霉GIM3.103均购自广东省微生物菌种保藏中心,由本实验室保存。MH(Muellerhinton)培养基、PDA(Potatodextroseagar)培养基均购自广东环凯微生物科技有限公司。实验所用MH琼脂修饰培养基是在MH培养基中加入0.5%的TL(血球计数板计数)备用。将大肠杆菌和金黄色葡萄度为60°C,保持2min,之后以10°C/min的速度升温至220°C,保持15min,载气He,流速1.0mL/min。程序升温进样模式(PTV)分流进样,
5、分流比为1:50。进样口温度从初始70°C升温至250°C。电离方式为EI,离子源温度为200°C,四级杆扫描范围30-450m/z,传输线温度250°C。将样品的质谱图与NIST质谱库中的标样进行比对,对化合物进行试验性的分析鉴定。1.2.3植物精油的抗真菌活性研究(污染食物技术,Poisonedfoodtechnique)[15,17]:将PDA修饰培养基熔化后,将香茅、山苍子、肉桂、丁香、迷迭香和大蒜精油等6种植物精油分别加入到PDA修饰培养基中,使每种植物精油均配制成如下浓度梯度(F/F):0,0.0
6、16%,0.031%,0.063%,0.125%,0.250%,0.5%,1%。取黑曲霉和绳状青霉的孢子悬液(5x106CFU/mL)各100,分别加到平皿上(即每个平皿约5x105CFU),涂布均匀,每种精油每个浓度每种霉菌各做3个平行,帕拉胶膜将平皿边缘封口,置于恒温培养箱中28°C静置培养28d,观察统计实验结果。1.2.4植物精油的抗细菌活性研究(污染食物技术)[15,17]:将MH琼脂修饰培养基熔化后,将香茅、山苍子、肉桂、丁香、迷迭香和大蒜精油等6种植物精油分别加入到MH琼脂修饰培养基中,使每种植
7、物精油均配制成如下浓度梯度(F/F):0、0.016%、0.031%、0.063%、0.125%、0.25%、0.5%、1%。将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的菌悬液(5x106CFU/mL)充分混匀后,各取100,分别加到平皿上(即每个平皿约5x105CFU),涂布均匀,每种精油每个浓度每种菌各做3个平行,置于恒温培养箱中35°C培养7d,观察统计实验结果。2结果与分析2.16种植物精油的气质联用化学组分分析根据气质联用分析结果,6种植物精油的可能化学组分见表1。由表1可以看出,肉桂精油的醛类总含量约为87%,醇
8、类总含量约8%;山苍子精油醛类总含量约71%,醇类总含量约4%;香茅精油的醇类总含量约40%,醛类总含量约38%;迷迭香精油醇类总含量约54%,醛类总含量不足1%;丁香精油的主要化学组分是丁香油酣,约占了总化学组分的85%。大蒜精油的化学组分比较特殊,基本上都是含硫的醚类,其中二烯丙基三硫醚(大蒜素)含量最高,约占总的化学组分的30%。2.26种植物精油的抗真菌活性6种植物精油对黑曲霉和绳状青霉的最