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1、玫瑰精油抗菌活性研宄祝凯(成都市工业职业技术学校成都610218)摘要采用超声波萃取法从玫瑰中提取精油,采用气质连用色谱法分析玫瑰精油的化学成分，检测出香茅醇成分相对含量达23.4%。经抑菌实验得出玫瑰精油除对白色念珠菌没冇明显抗菌性外，对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和人肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.063%(v/v),对黑曲霉、绿脓杆菌枯草芽孢杆菌、变形杆菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.125%(v/v),而对绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)的抗菌活性相对较弱,M
2、IC为0.5%(v/v)。抑菌直径结果也表明了玫瑰精油除对黑曲-霉、绿脓杆菌的抗菌活性较弱外，对其它6种菌株的抑菌直径都人于8.5mm。考察了玫瑰精油对3种敏感菌株包括金萸色葡萄球菌(革兰氏阳性菌)、大肠杆菌(革兰氏阴性菌)和0色念珠菌(真菌)的杀菌动态过程，为玫瑰精油的应用提供了理论依据。关键词玫瑰精油;成分;抗菌活性天然玫瑰的精油组成十分复杂，主耍成分是单萜类化合物，如香叶醇、香茅醇、芳樟醇等，玫瑰醚、倍半萜烯、倍半萜含氧化合物也占和当比例，其它的化合物有庚醛、乙醇、烷烃系列(Cl7-C27)(玫瑰油
3、石蜡烃的主要成分)等［1］。而这些化学成分含量的多少及化学成分上的差异，造成这些玫瑰油香气的微妙差异12］。总的说来，香茅醇、香叶醇、B-2苯乙醇和橙花醇与它们的酯类是构成玫瑰花香的棊本成分，是玫瑰的主体香气成分［3］。但玫瑰精油抗菌活性目前国内未见文献报道，本研宄通过玫瑰精油对8种菌株的抑菌直径、MIC/MBC的测定以及杀菌动态研究，揭示了玫瑰精油具有很好的抗菌活性，为玫瑰精油作为细菌感染性疾病的选择性用药，同吋也为玫瑰精油的综合开发利用提供了科学依据。1仪器和材料1.1主要仪器DL2CJ22N超净工作
4、台，LDZX240BN立式自动电热压力蒸汽火菌器,DPX-9082B-Z恒温培养箱，英国VGplatformII,气质联用仪。1.2实验材料与试剂牛肉ff、蛋白胨、琼脂等皆为生化试剂。其它试剂均为分析纯试剂。1.3玫瑰的来源玫瑰购自三圣乡花卉市场。1.4菌种及培养条件表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis,缩写为S.e以下同〕、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.a)和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtiliis,B.s),大肠杆菌〔Escheric
5、hiacoli,E.c〕绿脓杆菌(Pseeudomonaseruginosa,P.a)、变形杆菌(Proteusvulgaris,P.v〕、白色念珠菌(Candidaalbicans,C.a〕和黑曲霉（Aspergillusnigar,A.n）均接种于中科研微生物研究所。前3种为革兰氏阳性菌,大肠杆菌、绿脓杆菌和变形杆菌为革兰氏阴性菌，后2种为真菌。除黑曲霉需用察氏培养基于28°C培养5d外，其余菌种均于营养琼脂培养基在37"C培养24ho2试验方法2.1菌悬液的制备将上述供试菌种用适宜的培养基斜面活化后
6、，用液体培养基制成含菌量约为105cfu.mL-1菌悬液。2.2精油提取与含量测定采用水蒸气同步蒸馏法提取精油。玫瑰花碾碎后加水沸蒸冋流3h。所得精油用无水硫酸钠脱水，过滤后量取体积。取适量精油用正己烷溶解稀释为体积分数0.1%用于气质联用分析。样品测定前置于-25°C下密封贮存。2.3GC-MS分析方法气相色谱条件:色谱柱DB-5（30mX0.25mmX0.25um），进样口温度260°C,柱温60°C〜220°C。升温程序:起始温度60°C,以15°C/min升温至160°C,再以5°C/min升温至
7、25（TC，维持2min。汽化室温度250°C,气质接门温度280°C。进样量1Pm,分流比30:1;载气为氦气，纯度99.99%,流速1.2mL/min。质谱条件:离子源为EI源，电子能量70eV，离子源温度230°C,四极杆150°C,扫描范围30〜500amu。经谱库检索并与保留吋间相结合鉴定精油各组分峰，并对色谱峰用面积归一化法进行定量，计算各组分的相对含量。2.4抗菌活性实验2.4.1琼脂扩散法抑菌直径的测定釆用琼脂扩散法。用无菌棉签蘸取108cfu/mL的试验菌悬液，在营养琼脂平板表面均匀涂抹
8、3次，然后绕平板边缘涂抹一周，盖好表面皿，4e冰箱保存5min,滤纸片（；用打孔器将滤纸制成直径为6.0mm的小閫纸片;）160°C干热灭菌2h，平放于无菌平皿内，每片滴加5Pm的玫瑰精油，室温自然晾干,用无菌镊子取样片轻轻贴放于平板表面，每个平板贴2片试验样片,1片无菌生理盐水对照片。放于培养箱内培养，黑曲霉在28°C温度下培养5d,其它菌株均在37°C培养24h。测量抑菌圈直径大小，实验重复3次。2.4.2微量肉汤稀释法M
