蓝桉叶精油微波无溶剂法提取及抗氧化、抗菌活性研究

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1、p-学校代码:10225学号;SK625P‘学侄备文I蓝按叶精油微波无溶剂法提取及抗氧化、抗菌活性研究刘伟指导教师姓名;祖元刚教授东北林业大学杨磊教授东北林业大学;申请学位级别硕±学科专业:生药学论文提交日期:2015年4月论文答辩日期:2015年6月15授予学位单位;东北化业大学授予学位日期;20年6月-<;.-Sr-答辩委员会主席:■-论文评阁人:,辛皆k试三与:京此^义學4.''、-:一公約;;.'某巧巧广;f!議life;.—.、*..::’.:.'辛--.

2、:兴;中枯*^>..^>今:.:.知>;;-1^擁^:f的。.蜡蘇體.。斟如為款:;^?'..’.;竹<V兮气参—山:''1^户V,护---.;^-■rV>:xfUniversityCode;10225RegisterCode:SI5625DissertationfortheDereeofMastergProcesso-timizationofsolventfreemicrowavepextractionofessential0。fromtheleavesof风(:。如献及如6"/^

3、/在andresearchonitsantifungalandantioxidantactivity'Candidate:LIUWeiSupervisor:Prof.ZUYuangangAssociateSupervisor:Prof.YANGLeiAcad*emicDeieeAliedfar:MastergppSpeciality:PharmaconosgyDatfOrai:eolExamnation;June,2015University:NortheastForest

4、ryUniversity摘要本文w蓝按叶片为原料,采用无溶剂微波辅助提取技术对藍按叶片中精油成分进行GC-MS提取,通过响应面法对提取工艺进行优化;并运用检测了不同提取方法获得的藍按叶精油的化学成分和相对含量;通过DPPH自由基清除法、铁还原能为实验(FRAP)和-胡萝h素-亚油酸漂白法等抗氧化试验P,确定了蓝按精油的抗氧化活性;考察了藍按叶精油对3种嫌刀菌的抑制活性;依据MTT法原理,检测蓝按叶精油对小鼠巨隆细64胞Raw2.7增殖的抑制作用时为实现提取剩余物的高效利用,对其中的没食子酸;同和轉花酸成分的提取工艺进行了

5、优化。其主要内容如下:1、选用无溶剂微波辅助提取蓝按叶精油,通过动力学实验与其他传统提取方法进行比较。此外对无溶剂微波辅助提取的条件进行了单因素实验的筛选,结合响应面分析,确定了无溶剂微波辅助提取蓝按叶精油的最佳提取条件:含水率约59.7%,微波福射时间22min和微波功率575W。在此的条件下精袖得率为6.6mL/kg。-2、建立了GCMS检测蓝按叶精油化学成分的分析方法,气相色谱条件:石英毛细’管色谱曲30mx〇.25mmcx〇.25m,手动进,气化室温度为270C,载气为高纯He:n)样叫’°’’(99.999%),流速l

6、.OmL/min,WlOC/min的速度从40C升高到165C,再W5C/min°°’从165C升高到200C,再t^Uor/min的速度从20(TC升高到250C,不分流进样。质°’:谱条件电离源EI,电子能量70eV,传输线温度280C,离子源温度230C,四极杆温°50C-度1,扫描范圃为15500amu,通过NIST02质量光谱库直接比较确定精油的组成--成分8-a。藍按叶精油的主要成分为1,按叶素、a松油醇和松油醇醋酸醋等。-3AP-、采用DPPH自由基清除法、铁还原能力(FR)和P巧萝h素亚油酸漂白法对精油的抗氧化性

7、能进行测试一,并与天然抗氧化剂Vc和Ve进行比较,蓝按叶精油具有定的抗氧化活性,并且无溶剂微波辅助提取精油的抗氧化性优于水中蒸馈提取的精油。4、采用、、体外抗菌法,研究了精油对拟枝抱鎌刀菌黄色银刀菌茄病鎌抱蓝色变一种的抗菌效果。蓝按叶精油对大部分类型的嫌刀菌都具有定的抑制作用,其中较敏感菌株是拟枝抱镶刀菌和黄色镶刀菌,最低抑菌浓度(MIC)分别1.25叫AnL和0.7卽1/mL。杀菌曲线反映了蓝按叶精油的杀菌作用呈浓度依赖的关系。5、采用MTT检测法,研巧蓝按叶精油对Raw264.7细胞抑制作用,结果发现藍按叶精油作用Raw264.7

8、细胞后,各处理组细胞增殖

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