正交试验对荷叶总多酚提取工艺的优化

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1、正交试验对荷叶总多酚提取工艺的优化李长春，姚国新，李国元，戴余军（湖北工程学院/特色果蔬质量安全控制湖北省重点实验室，湖北孝感432000）摘要：研究利用乙醇提取荷叶中的总多酚，探索乙醇体积分数、提取温度、提取时间、提取pH、提取次数以及料液比对荷叶总多酚提取率的影响，并在单因素试验的基础上进行正交优化，最终确定其优化提取条件为乙醇体积分数75％，提取温度75℃，提取时间100min，提取pH为5，提取2次，料液比为1∶40（g∶mL）。在此条件下，荷叶总多酚的提取率可达2．842％。.jyqkizingTechnologiesofExtractingPolyph

2、enolsfromLotusLeaveslotusleavesbyethodizedent．Variablesincludinglevelsofalcohol，temperature，extractionduration，pH，timesandmaterial－solventratioents．Theoptimalconditionsin，pH5，extractingtaterial－solventratio1∶40（lotusleafreached2．842％．Keyail__"href="/cdn-cgi/l/email-protection"data-cfe

3、mail="7692d5df1a1515454e4036474045">[email protected]．；通信，戴余军（1972－），女，湖北天门人，副教授，硕士，主要从事生物化学及天然产物提取的教学与研究，（电子信?aclass="__cf_email__"href="/cdn-cgi/l/email-protection"data-cfemail="1df9beb479647728242f285d6e74737c">[email protected]．。多酚是指广泛存在于植物体内的多羟基酚类化合物的总称，在植物体的叶片、果实、皮和根中含

4、量较高［1，2］。多酚类物质除具有生物抗氧化性、抗衰老功能外，还可以降血脂、清暑利湿、促进肠胃消化、增强人体免疫力、抑制细菌与癌细胞生长等作用，可广泛用于医药、保健、食品、化工等领域［3－6］。随着天然产物开发的逐渐兴起，植物多酚成为当前研究的热点，目前关于茶叶［7］、葡萄皮［8］等植物多酚的提取与功能研究有较多的报道。莲（Nelumbonucifera）属睡莲科莲属，是一种重要的经济作物，在中国大量种植，其叶片多酚含量较高，但莲藕采收后荷叶多被废弃［9］。本研究通过单因素试验和正交试验对荷叶总多酚提取工艺进行了优化，以期获得较好的工艺条件，为更好地促进莲资源的开

5、发利用提供依据。1材料与方法1．1材料与仪器荷叶（武植2号）采自湖北省孝感市；福林酚（上海荔达生物科技有限公司）、没食子酸（天津市红岩化学试剂厂）、Na2CO3等试剂均为分析纯。101A－3型干燥箱（上海市实验仪器总厂）；Fg/L的标准没食子酸溶液0．2mL加入1mL的福林酚试剂，摇匀，静置5min，加入10％碳酸钠溶液，然后用去离子水定容至10mL，在室温下避光放置2h，在分光光度计下进行500～900nm的全波长扫描，确定最大吸收波长。1．2．2标准曲线的绘制精确吸取30、60、90、120、150μg/mL的没食子酸1mL于10mL试管中，分别加入3mL福林

6、酚试剂，摇匀，静置5min，加入10％碳酸钠溶液，摇匀，室温避光放置2h，用60％的乙醇定容至10mL，以空白为对照在最大波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，没食子酸浓度为横坐标，得到标准曲线，其回归方程为Y＝0．0455X＋0．066（R2＝0．9956）。1．2．3工艺流程新鲜荷叶洗净沥干→60℃烘干→过60目筛→准确称取荷叶干粉1g，加入一定体积和体积分数的乙醇溶液，调pH→恒温水浴，重复提取→离心（5000r/min离心20min）→收集上清液→浓缩。1．2．4单因素试验分别考察乙醇体积分数（30％、45％、60％、75％、90％）、提取温度（30、45、

7、60、75、90℃）、pH（3．5、4．0、4．5、5．0、5．5）、提取时间（20、40、60、80、100min）、料液比（g∶mL，下同）（1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50）、提取次数（1、2、3、4）等因素对提取效果的影响。1．2．5正交试验根据单因素试验结果，以乙醇体积分数、提取温度、提取时间、提取次数为因素，进行4因素3水平正交试验，优化提取工艺。1．2．6总多酚含量的测定准确称取荷叶干粉1g放入250mL的三角瓶中，按方案提取后定容至100mL。然后按“1．2．2”的方法测定吸光度，重复测定3次，取平均值计算总多酚的含量，并计算总多酚

8、提取率。总