试析表达结核分枝杆菌esat6

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1、试析表达结核分枝杆菌ESAT6：张海1，师长宏1，王丽梅2，薛莹2，柏银兰2，徐志凯【分枝杆菌,结核；疫苗,DNA；ESAT6；CFP10；融合蛋白；免疫原性　　ImmunogenicityofDNAvaccineexpressingESAT6CFP10fusionproteinofMycobacteriumtuberculosis　　【AbstractAIM:ToevaluatethehumoralandcellularimmuneresponseinducedbytheDNAvaccineexpressingESAT6CFP10f

2、usionproteinandtotestitsprotectiveefficacyagainstMycobacteriumtuberculosis(MTB)challenge.METHODS:BALB/cmicemunizedintramuscularlythreetimesidpcDNAe6c10.Tmunization,thespecificantibodytiterandthestimulationindex(SI)ofspleenlymphocytesfromtheimmunizedmiceeasured,andthelev

3、elsofIFNγandIL2andtheactivityofantigenspecificCTLiceingunit)MTBH37Rvthroughtailvein.Fourined.RESULTS:ThetiterofserumspecificantibodyinBALB/cmiceimmunizedmunizedgroups(2.42±0.13)munizedgroup.TheIFNγ［(2449±12)ng/L］inducedbyDNAvaccinethatinbacilluscalmetteguerin(BCG)immuni

4、zedgroup,thatofsalineimmunizedgroupandmunizedgroup.TheantigenspecificCTLefficacymunizedmice(bacterialoadaticreductionofMTBreplicationiceimmunizedmunotherapeuticeffecttopreventtuberculosis.　　【Keytuberculosis;vaccines,DNA;ESAT6;CFP10;fusionprotein;immunogenicity　　【目的：探究表达

5、结核分枝杆菌ESAT6CFP10融合蛋白DNA疫苗在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答以及对结核分枝杆菌（MTB）感染小鼠的保护能力.方法：以100μg重组质粒pcDNAe6c10接种BALB/c小鼠腓前肌，共免疫3次.末次免疫结束2TB毒株H37Rv经尾静脉进行攻击，4TB反抗功能.结果：表达ESAT6CFP10融合蛋白DNA疫苗免疫小鼠血清特异性抗体滴度为1∶800.淋巴细胞刺激增殖指数为2.42±0.13，明显高于生理盐水对照组；免疫小鼠诱导IFNγ含量（2449±12）ng/L和卡介苗（BCG）组无明显差异，IL2含量（198±

6、16）ng/L不及BCG免疫组，但明显高于生理盐水对照组；同时融合蛋白诱导的CTL杀伤率为42％.和生理盐水免疫组（细菌负荷6.51±0.13）相比较，DNA疫苗免疫的BALB/c小鼠对攻击感染后MTB在脾脏中增殖有较明显反抗功能(细菌负荷4.51±0.23，P<0.05)，但和BCG免疫组相比脾脏细菌负荷无明显减少.结论：表达ESAT6CFP10融合蛋白DNA疫苗能在结核病预防中有一定免疫治疗功能.　　【分枝杆菌，结核；疫苗，DNA；ESAT6；CFP10；融合蛋白；免疫原性　　0引言　　　　探究以为卡介苗（bacillusc

7、almettequerin,BCG）可预防并减轻儿童的严重结核病（tuberculosis,TB），但对成人TB的预防功能从0到80％不等［1］.因此急需探究一种比BCG更好的疫苗来控制该病的传播和蔓延.ESAT6抗原是结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis,MTB）早期分泌性低分子质量蛋白，能诱导机体产生强烈T细胞免疫应答和开释高水平IFNγ.很多探究表明ESAT6蛋白具有良好的抗原刺激性并能被大多数TB患者所识别.近年来又发现另一种低分子质量MTB培养滤液蛋白CFP10，CFP10和ESAT6同属于ESA

8、T6家族，且由同一操纵子调控，和ESAT6相同的是，CFP10也是免疫上风抗原，能诱导机体产生强烈免疫应答［2］.为了全面评估表达ESAT6CFP10融合蛋白DNA疫苗免疫学特性，我们探究了此种疫苗在小鼠体内诱导的体液和