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时间:2018-10-20
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1、试析表达结核分枝杆菌ESAT6:张海1,师长宏1,王丽梅2,薛莹2,柏银兰2,徐志凯【分枝杆菌,结核;疫苗,DNA;ESAT6;CFP10;融合蛋白;免疫原性 ImmunogenicityofDNAvaccineexpressingESAT6CFP10fusionproteinofMycobacteriumtuberculosis 【AbstractAIM:ToevaluatethehumoralandcellularimmuneresponseinducedbytheDNAvaccineexpressingESAT6CFP10f
2、usionproteinandtotestitsprotectiveefficacyagainstMycobacteriumtuberculosis(MTB)challenge.METHODS:BALB/cmicemunizedintramuscularlythreetimesidpcDNAe6c10.Tmunization,thespecificantibodytiterandthestimulationindex(SI)ofspleenlymphocytesfromtheimmunizedmiceeasured,andthelev
3、elsofIFNγandIL2andtheactivityofantigenspecificCTLiceingunit)MTBH37Rvthroughtailvein.Fourined.RESULTS:ThetiterofserumspecificantibodyinBALB/cmiceimmunizedmunizedgroups(2.42±0.13)munizedgroup.TheIFNγ[(2449±12)ng/L]inducedbyDNAvaccinethatinbacilluscalmetteguerin(BCG)immuni
4、zedgroup,thatofsalineimmunizedgroupandmunizedgroup.TheantigenspecificCTLefficacymunizedmice(bacterialoadaticreductionofMTBreplicationiceimmunizedmunotherapeuticeffecttopreventtuberculosis. 【Keytuberculosis;vaccines,DNA;ESAT6;CFP10;fusionprotein;immunogenicity 【目的:探究表达
5、结核分枝杆菌ESAT6CFP10融合蛋白DNA疫苗在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答以及对结核分枝杆菌(MTB)感染小鼠的保护能力.方法:以100μg重组质粒pcDNAe6c10接种BALB/c小鼠腓前肌,共免疫3次.末次免疫结束2TB毒株H37Rv经尾静脉进行攻击,4TB反抗功能.结果:表达ESAT6CFP10融合蛋白DNA疫苗免疫小鼠血清特异性抗体滴度为1∶800.淋巴细胞刺激增殖指数为2.42±0.13,明显高于生理盐水对照组;免疫小鼠诱导IFNγ含量(2449±12)ng/L和卡介苗(BCG)组无明显差异,IL2含量(198±
6、16)ng/L不及BCG免疫组,但明显高于生理盐水对照组;同时融合蛋白诱导的CTL杀伤率为42%.和生理盐水免疫组(细菌负荷6.51±0.13)相比较,DNA疫苗免疫的BALB/c小鼠对攻击感染后MTB在脾脏中增殖有较明显反抗功能(细菌负荷4.51±0.23,P<0.05),但和BCG免疫组相比脾脏细菌负荷无明显减少.结论:表达ESAT6CFP10融合蛋白DNA疫苗能在结核病预防中有一定免疫治疗功能. 【分枝杆菌,结核;疫苗,DNA;ESAT6;CFP10;融合蛋白;免疫原性 0引言 探究以为卡介苗(bacillusc
7、almettequerin,BCG)可预防并减轻儿童的严重结核病(tuberculosis,TB),但对成人TB的预防功能从0到80%不等[1].因此急需探究一种比BCG更好的疫苗来控制该病的传播和蔓延.ESAT6抗原是结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,MTB)早期分泌性低分子质量蛋白,能诱导机体产生强烈T细胞免疫应答和开释高水平IFNγ.很多探究表明ESAT6蛋白具有良好的抗原刺激性并能被大多数TB患者所识别.近年来又发现另一种低分子质量MTB培养滤液蛋白CFP10,CFP10和ESAT6同属于ESA
8、T6家族,且由同一操纵子调控,和ESAT6相同的是,CFP10也是免疫上风抗原,能诱导机体产生强烈免疫应答[2].为了全面评估表达ESAT6CFP10融合蛋白DNA疫苗免疫学特性,我们探究了此种疫苗在小鼠体内诱导的体液和
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