茯苓、蜜环菌、黑木耳协同作用对小鼠免疫功能影响

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1、茯苓、蜜环菌、黑木耳协同作用对小鼠免疫功能的影响 哈尔滨师范大学张丽娟【摘要】观察茯苓、蜜环菌、黑木耳及其配伍对小鼠免疫力的影响。结果表明，三种食用菌联合使用，可显著提高小鼠的淋巴细胞增殖能力和巨噬细胞吞噬能力（P＜0.05），说明三种食用菌配伍可在特异性免疫和非特异性免疫两面提高小鼠的免疫力，具有联合增效的作用。【关键词】茯苓，蜜环菌，黑木耳，免疫力，吞噬百分率TheeffectofcompatibilityPoriacocos，ArmillaramelleawithAuriculariaauricularonimmunologicalfunctionin

2、miceAbstract：ToobservetheimmunityeffectofPoriacocos，Armillaramellea，Auriculariaauricularandtheircompatibility.Theresultsshowthatthreekindsofediblefungususedincombination,cansignificantlyimprovethemice'scapacityoflymphocytesproliferationsandmacrophages'phagocytosis(P<0.05).Thesemean

3、thatcompatibilityofPoriacocos,ArmillaramelleawithAuriculariaauricularhasasynergisticeffecttoenhancethebody'simmunesysteminbothspecificimmunityandnonspecificimmunity.KeyWords：Poriacocos，Armillaramellea，Auriculariaauricular，Immunity，Devouringpercentage人类发现、认识、利用食用菌的历史悠久，在我国，几千年前食药用菌就

4、被作为传统中药的重要组成部分，李时珍的药学著作《本草纲目》和陈藏器的《本草拾遗》均有记载[1]。近些年来，食用菌的保健作用越来越引起人们的重视。茯苓、蜜环菌、黑木耳是我国资源丰富的三种食用菌，具有地源优势和开发潜力。茯苓作为一种传统的中药材，医疗和保健作用已经得到了一致认可[2,3]。蜜环菌可与天麻共生[4]，具有与天麻类似的药理作用[5]。黑木耳营养丰富，食味鲜美，不但是营养价值很高的食用菌，而且是药用价值较高的药用菌[6]5，是世界公认的保健品。健康是人类的一项基本要求，也是社会进步的重要标志和潜在动力。据调查显示，90%的疾病与免疫力减弱有关。本实验选

5、择淋巴细胞转化能力和巨噬细胞吞噬能力作为观察指标，研究茯苓、蜜环菌、黑木耳及其配伍对小鼠免疫系统的影响，为其在医药领域的开发利用提供理论依据。1材料1.1动物清洁级昆明小鼠，雄性，6~8周龄，体重18~22g。1.2试剂及配制茯苓、蜜环菌、黑木耳提取物：杭州众生菌蕈生物技术有限公司提供；ConA：Sigma公司；MTT、Hank’s液：Sigma公司；PBS缓冲液（pH7.2~7.4）等。MTT液：将5mgMTT溶于1mLpH7.2的PBS中，现用现配。无菌Hank’s液：使用前用3.5%的无菌NaHCO3调节pH7.2~7.4。鸡红细胞悬液制备：取鸡血置于

6、三角瓶中，加入玻璃珠，摇动脱去纤维。用0.9%NaCl溶液洗涤3次，2000r/min离心10min，弃去上清，用0.9%NaCl溶液配成20%的鸡红细胞悬液。1.3仪器PL203型电子天平：上海精天电子仪器有限公司；CO2孵化箱：日本三洋；F200型多功能酶标仪：瑞士TECAN集团公司。2方法2.1ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验80只小鼠随机分为8组，灌胃量均为0.5mL，每日一次。分组情况及药物浓度见表1。连续灌胃30d后，颈椎脱臼处死小鼠，无菌取脾脏，用镊子轻轻将脾磨碎，制成单个细胞悬液。经200目筛网过滤，用Hank's液洗涤，1000r/mi

7、n离心10min，共洗涤两次。然后调整细胞浓度为3×106个/mL。将每份脾细胞悬液加入24孔培养板中，1mL/孔，2孔/样品，一孔加75μLConA液（相当于7.5ug/mL），另一孔作为对照，置5%CO2，37℃CO2孵箱中培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7mL，加入0.7mL不含小牛血清的RPMI16405培养液，同时加入MTT（5mg/mL）50μL/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1mL酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。然后分装到96孔培养板中，每孔作3个平行样，用酶标仪，以570nm波长测定光密度值[7]。表1试验

8、动物分组序号组别剂量（×100mg/kg）①空白对照