胶乳凝集试验测定类风湿因子的临床应用

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1、胶乳凝集试验测定类风湿因子的临床应用[]RF是一种主要发生于类风湿性关节炎患者体内的抗人变性IgG抗体，可与IgG的Fc段结合。将变性IgG包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上，此致敏胶乳在与待测血清中的RF相遇时，即可发生肉眼可见的凝集。　　[关键词]类风湿因子；胶乳凝集试验；临床应用　　[]R446.6[]B[]1005-0515（2011）-12-345-01　　类风湿因子(rheumatoidfactor,RF)是在类风湿性关节炎病人血清中发现。是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体，无种属特异性。主要存在于类风湿

2、性关节炎患者的血清和关节液中，它是一种抗变性IgG的抗体，属IgM型。可与IgGFc段结合。RF有IgG、IgA、IgM等多种Ig类型，以IgM类型多见。检测RF对类风湿性关节炎(RA)的诊断、分型和疗效观察有着重要的意义。　　RF是一种主要发生于类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)病人体内的抗人变性IgG自身抗体，可与IgG的Fc段结合。胶乳凝集试验是将变性IgG包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上，这种致敏胶乳在与待测血清中的RF相遇时，于一定时间内发生肉眼可见的凝集。　　1对象与材料　　1

3、.1研究对象1)体检健康组：在本院体检中心体检健康者410例，其中：男性：180例，女性：230例，年龄25-75岁。2)类风湿性关节炎组：经临床诊断为类风湿性关节炎的患者42例，其中：男性：9例，女性：33例，年龄29-76岁。　　1.2标本采集与保存空腹采集静脉血3ml，30min后离心分离血清，当日完成检测，或置2-8℃保存，第2天完成检测。　　1.3方法与试剂手工操作法。类风湿因子(RF)测定试剂盒(胶乳凝集法)。　　1.4试剂主要成份胶乳液成份：类风湿因子胶乳、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液；阳性对照成

4、份：羊抗人IgG抗血清、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液；阴性对照成份：牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液。　　1.5测定原理胶乳凝集试剂是由纯化的人IgG和羧化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。RF胶乳超过20U/ml即出现肉眼可见的凝集颗粒。　　2实验与结果　　2.1定性实验试剂自冰箱取出后恢复至室温(18-25℃)；轻轻混匀胶乳试剂；核对阳性和阴性对照，在反应板孔中加一滴未稀释血清(20ul)；然后加一滴胶乳试剂在血清中；搅匀、轻轻摇动使其充分混合，二分钟后于直射光下观察结果。每次试验均设阳性与阴性对照。　　2.2

5、半定量实验血清以生理盐水(0.9g氯化钠溶解于蒸馏水中，稀释至100ml)倍比稀释。见表1。　　2.3结果判定定性实验：2min出现肉眼可见凝集者为阳性(RF＞20U/ml)；无凝集出现者为阴性(RF＜20U/ml)。半定量试验：1:2稀释血清出现凝集者为40U/ml；1:4稀释血清出现凝集者为80U/ml；1:8稀释血清出现凝集者为160U/ml；1:16稀释血清出现凝集者为320U/ml。　　2.4参考范围正常人血清RF＜20U/ml。　　2.5初步临床应用在健康体检者的410例测定中，RF出现凝集(＞2

6、0U/ml)的19例占4.6%。已确定的42例类风湿性关节炎患者中，RF出现凝集(＞20U/ml)的38例占90.4%。　　3讨论胶乳凝集法主要是测定IgM类RF(IgG、IgA类RF极少)，据全国临床检验操作规程报道：70%-90%的类风湿性关节炎(RA)患者的RF呈阳性。因此，RF测定是美国风湿病学会1987年类风湿性关节炎诊断标准之一。但是RF阴性也不能排除类风湿性关节炎(RA)诊断。除RA外，还有其他很多疾病RF亦可阳性，如干燥综合征，混合性结缔组织病，2型混合性冷球蛋白血症，慢性活动性肝炎、亚急性细

7、菌性心内膜炎，全身性红斑狼疮，多种细菌真菌、螺旋菌等，健康人群中约有5%的人RF阳性。　　本研究结果说明，胶乳凝集法90.4%的类风湿性关节炎(RA)患者的RF呈阳性，健康人群中约有4.6%的人RF阳性。此结果与全国临床检验操作规程报道的结论相符。此方法可定量或半定量，灵敏度高，血清用量少、操作简单、便于在基层医院推广使用。