粉防己碱对大鼠肝星状细胞增殖及细胞周期素d1，增殖细胞核抗原表达的调控

《粉防己碱对大鼠肝星状细胞增殖及细胞周期素d1，增殖细胞核抗原表达的调控》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、粉防己碱对大鼠肝星状细胞增殖及细胞周期素D1，增殖细胞核抗原表达的调控：赵宏贤，陈霞*，郭勇，李昌平，陈庄，余鸿【摘要】　　目的探讨粉防己碱（Tet）对肝星状细胞（HSC）增殖的调控机制。方法培养大鼠HSC，MTT法测Tet对HSC增殖的影响，免疫细胞化学法测Tet对HSC增殖细胞核抗原（PA）和细胞周期素D1（CyclinD1）表达的影响。结果Tet在0.5～1mg/L的范围内显著抑制大鼠肝星状细胞的增殖(P<0.05)。0.5，1mg/LTet浓度组PA阳性表达细胞数与对照组有显著性差异(P<

2、0.01)，两浓度组之间也存在显著性差异(P<0.01)。Tet0.5，1mg／L浓度组CyclinD1阳性表达细胞数与对照组有显著性差异(P<0.01)，两浓度组之间差异有显著性(P<0.01)。结论Tet通过抑制细胞周期素CyclinD1，PA表达，使细胞周期停滞于G0/G1期，从而发挥抑制大鼠肝星状细胞增殖的作用。【关键词】粉防己碱肝星状细胞增殖细胞核抗原细胞周期素D1免疫细胞化学　　Abstract：ObjectiveToobservetheeffectoftetrandrineon

3、theproliferationandexpressionofPA,CyclinD1ofhepaticstellatecell.MethodsHepaticstellatecellsedium.Theeffectoftetrandrineethod.Theeffectsoftetrandrinemunocytochemistry.Results①From0.5mg/Lto1mg/L,tetrandrineinhibitedtheproliferationofhepaticstellatecellinaconc

4、entrationdependencemanner(P<0.05).Thereg/Ltetrandrineand2mg/Ltetrandrine.②ThenumberofthePApositivecellsin0.5mg/L,1mg/Ltetrandrinegroupsalcontrolgroup(P<0.01),andthenumberofthePApositivecellshadsignificantdifferencebetg/Land1mg/Ltetrandrinegroups(P<

5、0.01).③ThenumberoftheCyclinD1positivecellsin0.5mg/L,1mg/Ltetrandrinegroupsalcontrolgroup(P<0.01),andthenumberoftheCyclinD1positivecellshadsignificantdifferencebetg/Land1mg/Ltetrandrinegroups(P<0.01).ConclusionTetrandrinecandecreasetheexpressionofPAand

6、CyclinD1ofhepaticstellatecells,andmakecellcyclearrestinG0/G1stage,aybethemechanismthattetrandrineinhibitstheproliferationofhepaticstellatecell.　　Keymunocytochemistry　　粉防己碱（Tetrandrine，Tet）是粉防己的主要活性成分，有着广泛的药理作用，应用前景广阔，抗纤维化是其重要的药理作用，Tet是抗肝纤维化的有效药物［1］。各种致病因素引起

7、肝脏损伤，细胞因子刺激肝星状细胞激活增殖及转化,细胞外基质(ＥＣＭ)合成增多及降解减少，继而沉积在细胞间隙,从而发生纤维化。Tet不仅能直接抑制肝贮脂细胞的增殖及转化,而且可阻断血小板衍生因子的促肝贮脂细胞增殖及胶原合成作用。Tet可通过转化生长因子-β信号抑制体外培养大鼠肝星状细胞活性［2］。但是Tet抑制肝星状细胞增殖的具体机制不是很清楚，本研究观察Tet对肝星状细胞增殖过程中增殖细胞核抗原（PA）和细胞周期素D1(CyclinD1)的表达的影响，从细胞周期调控角度探讨Tet影响肝星状细胞增殖的机制。　　

8、1器材与方法　　1.1材料大鼠肝星状细胞株，泸州医学院附属医院传染免疫实验中心保存。　　1.2仪器与试剂CO2恒温培养箱（美国Shel-Lab公司）；YJ-1450型医用净化工作台（苏州长春电子仪器厂）；1X71型倒置相差显微镜（日本Olympus光学仪器有限公司）。　　粉防己碱（成都四川省药检所）；RPMI1640培养基（美国Gibco公司）；小牛血清（成都哈里生物公司）；PA单克隆抗体（NeoM