大鼠骨髓间质干细胞和新鲜骨髓细胞静脉移植治疗脑梗死的疗效.doc

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1、大鼠骨髓间质干细胞和新鲜骨髓细胞静脉移植治疗脑梗死的疗效【摘要】目的比较大鼠骨髓间质干细胞(rMSC)和新鲜骨髓细胞(fBMC)静脉移植后在脑梗死时脑内存活、迁移及分化情况，及对神经功能恢复的影响。方法制备大鼠脑梗死模型，经尾静脉将标记的rMSC和fBMC植入体内，于不同时程对神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组织化学方法检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观察rMSC体外分化情况。结果与对照组比较，两移植组神经功能改善明显(P)。两移植组在荧光激发下均可见移植细胞在梗死区及其周边区聚集并存活，且有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，在体外rMSC未见类似

2、分化表达。两组植入细胞存活与分化标志表迗率差别无统计学意义。结论rMSC和fBMC经静脉移植后在宿主脑内均能够存活、迁移并分化表迗神经细胞表型，均有促进脑梗死后神经功能恢复的作用关键词】间质干细胞移植；骨髓细胞；脑梗死；疾病模型，动物ABSTRACT:Objectivtratmesenchymalsteshbonemarrowcells(enouslyformigrateteToinvestigatethamcells(rMSC)andfrefBMC)infusedintravoinfarctfocus,survive，differentiateimproveneurologica

3、lralischemiainadultwereculturedinvitrweresubjectedtotralecerebralarteryocCorfBMCorPBSwerein24hourafterMCA0resnalmeasurementsusilogicalseverityscormedat24hour,lweekrespectively.ImmuiningandlaserscannsedtoidentifyrMSCabonemarrowinthebracificmarkingprotEIcellweredectectedbryinvitro.Resultsapidlyi

4、nvitro.TheurologicalfunctionreatedwithrMSCandftofcontrolgroup,asntonervecells,andifunctionaftercerebrats.MethodsrMSCo.AdultmaleSDratsnsient(2hours)middelusion(MCAO).rMSfusedviatailvEinatpectively.Functiongthemodifiedneurores(mNSS)wereperfoand2weeksafterMCA0nohistochemicalstaingmicroscopywereun

5、dcellsderivedfrominsections.ThespenofneuronsandglialyimmunocytochemistrMSCproliferatedrrewassignificantneimprovementinratstBMCcomparedwiththaevidencedbymNSSscores(PKEYWORDS:mesenchymalstemcelltransplantation；bonemarrowcells；braininfarction；diseasemodels,animal近年国内外较多研究已经发现骨髓间质干细胞（MSC）在体内外条件的诱导

6、下可以分化为神经细胞，对神经损伤后功能恢复有一定治疗作用［1-3］。笔者前期工作证实MSC移植对大鼠脑梗死后神经功能恢复有作用［4］。有研究表明，新鲜骨髓细胞（fBMC）移植入鼠体内可分化出神经细胞标志物，神经功能也得到一定恢复［5-7］。若静脉移植MSC和fBMC具有同样的治疗作用，则无疑直接移植fBMC更方便，更有实用价值。因此，笔者将相同数量的大鼠骨髓间质干细胞（rMSC）与fBMC经静脉移植到大脑中动脉栓塞（MCA0）的大鼠体内，观察两类细胞在大脑缺血灶微环境中存活迁移及分化情况，并比较两者在改善大鼠中风后神经功能损害方面的作用效果。1材料与方法材料动物清洁级雄性SD大鼠由

7、福建医科大学实验动物中心提供［实验动物质量许可证号：SGXK（闽）XX-0002;使用许可证号：SYXK（闽）XX-0007］，2〜3月龄，体质量280〜320g。试剂0-］培养液（美国0化（30公司）；胎牛血清肿3,美国Hyclone公司）；Ficoll-Paque淋巴细胞分离液（美国Pharmacia公司）;%胰蛋白酶（Trypsinl*250,美国Amersco公司）;荧光染料（cel1trackerorange,CTO,美国Invitrogen公司）；小鼠