兔自体移植静脉狭窄与细胞外基质的关系

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1、兔自体移植静脉狭窄与细胞外基质的关系　　摘要:目的观察胶原和弹性纤维的积累及其与自体移植静脉（autologousveingrafts，AVG）狭窄的关系.方法建立兔自体颈外静脉移植模型，用计算机图像分析，测量胶原和弹性纤维在新生内膜的面积以及Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白表达灰度值.结果移植后2～12atrix;smoothmuslcecell;stenosis　　Abstract:AIMToobservetheaccumulationofcollagenandelastinfibresanditscorrelatio

2、nod-elofAVG，theareaofcollagenandelastinfibresandtheex-pressionofcollagenⅠandcollagenⅢa.RESULTSAreaofcollagenandelastinfibresincreasedgradually;thepercentagesoftalareaplantation.Theex-pressionofcollagenⅠandcollagenⅢalsoincreased.CON┐CLUSIONCollagenandelasti

3、nfibresaccumulategraduallyandplayacriticalroleinthecavitylossoftheAVG.Colla-genismoreimportantthanelastinfibres，andcollagenⅠplaysthemainpart.　　0引言　　细胞外基质（extracellularmatrix，ECM）在动脉内膜增生和狭窄中的作用近年倍受重视，既参与平滑肌细胞（smoothmusclecell，SMC）增殖和迁移，还参与血管壁重塑.但在自体移植静脉（aut

4、ologousveingrafts，AVG）内膜增生和狭窄中的作用了解甚少，而且结果不尽相同［1，2］.我们通过对胶原，弹性纤维面积和Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白（ColⅠ，ColⅢ）表达的定量分析，了解ECM的分泌情况，及其与AVG内膜增生和管腔减小的关系.　　1材料和方法　　1.1材料新西兰兔，体质量2.2～2.5kg，戊巴比妥钠麻醉（30mgkg-1），颈正中切口，取左颈外静脉约3.0cm，生理盐水（含肝素5000UL-1，罂粟碱0.6gL-1）冲洗管腔并保存.用内径2.1mm“Cuff”将倒转的静脉桥与左颈总动

5、脉端端吻合［3］，送动物实验中心喂养.动物随机分为6组，每组5只，分别于移植前，移植后3d，1，2，4，8和12LL-1正常羊血清稀释，均为150，鼠抗人ColⅠ单克隆抗体购自北京中山生物技术公司，鼠抗人ColⅢ单克隆抗体为本校病理学教研室提供），4℃过夜，加生物素化二抗（1100羊抗鼠抗体），加SABC复合物（购自博士德生物工程公司），DAB显色，脱水，透明，封片.每只动物各选取1张切片，显微镜下（20×5倍）随机选取4个不同部位.在HE染色切片上测移植前静脉中膜面积，移植后不同时间外弹力膜以内面积和管腔

6、面积.在维多利亚蓝-丽春红和Masson染色切片上分别测量新生内膜中弹性和胶原纤维面积.ColⅠ，ColⅢ免疫组化表达灰度值以同样方式测量.　　用外弹力膜以内面积减去移植前静脉中膜面积作为AVG管腔减小前的相对最大面积计算管腔相对丧失率，管腔相对丧失率=（1-管腔面积/管腔最大面积）×100%.　　将4～12C为黄色.Masson染色中胶原纤维为蓝色，SMC为红色.新生内膜形成后，弹性纤维占内膜面积的百分比逐渐升高，12C增殖和迁移引起的，近年研究发现SMC分泌的ECM可能起着同样重要的作用.Sch体积可达

7、新生内膜的90%左右.Majors等［5］进一步证明，在损伤动脉的增生内膜中，ECM主要由胶原纤维组成，其中90%为Ⅰ型和Ⅲ型胶原.ECM在AVG新生内膜中的积累及其与AVG狭窄关系的研究还比较少.3.1弹性和胶原蛋白变化在AVG重塑中的作用Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白免疫组化染色结果显示，Ⅰ型胶原蛋白的表达早于Ⅲ型胶原蛋白，表达量在各时间点也高于Ⅲ型胶原蛋白.Ⅰ型胶原是较成熟的胶原，以纤维形式存在，有很强的张力，Ⅰ型胶原含量决定组织的僵硬度.Ⅲ型胶原是以细纤维形式存在，比Ⅰ型胶原更富有伸展性，因此，Ⅰ，Ⅲ型胶原之间保

8、持适当数量和比例对维持组织正常结构和功能具有重要意义.在高血压大鼠心肌纤维化的研究中发现，在纤维化早期（4entalvenousbypassgrafting［J］.JAmCollCardiol，1996;27（Suppl2）:205A-206A.［2］DenningSM，ChannonKM，PetersKG，AnnexBH.Differen-tialexpressionofcollagensubtypesⅢand