茶 游离氨基酸测定

《茶 游离氨基酸测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、茶游离氨基酸总量测定文件类别：作业指导书文件编号：撰写单位：版本:第1版发行日期：机密等级:□机密□一般合计页数:共2页核准审核初审制订会审名称茶游离氨基酸总量测定文件编号:1原理氨基酸在pH8.0的条件下与茚三酮共热，形成紫色络合物，用分光光度法在特定的波长下测定其含量。2仪器和用具分析天平：感量0.0001g。分光光度仪。3试剂和溶液3.1pH8.0磷酸盐缓冲液：按《茶茶多酚测定》中3.2的规定，配制1/15M磷酸氢二钠（3.2.1）和1/15M磷酸二氢钾（3.2.2）溶液。然后取1/15M的磷酸氢二钠溶液95ml和1/15M磷酸二氢钾溶液5ml，混匀。3

2、.22%茚三酮溶液：称取水合茚三酮（纯度不低于95%）2g，加50ml水和80mg氯化亚锡（GB638-78，分析纯），搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100ml。3.3茶氨酸或谷氨酸标准液：称取100mg茶氨酸或谷氨酸（纯度不低于99%）溶于100ml水中，作为母液。准确吸取5ml母液，加水定容至50ml作为工作液（1ml含茶氨酸或谷氨酸0.1mg）。4操作方法4.1取样方法按“茶叶原料验收规范”（文件编号…………）要求进行取样。4.2试液制备按《茶茶多酚测定》中4.2.1试液制备之规定，制备试液。4.3测定准确吸取试液（4

3、.2）0.5ml，注入25ml容量瓶中，加0.5ml水，0.5mlpH8.0缓冲液（3.1）和0.5ml2%茚三酮溶液（3.2），在沸水浴中加热15min。待冷却后加水定容至25ml。放置10min后，用10mm比色杯，在570nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度（A）。生效日期页次1/2页序A表号:R-0110-002-1A文件标准用纸名称茶游离氨基酸总量测定文件编号:4.4氨基酸定量标准曲线的制作分别吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml氨基酸工作液（3.3）于一组25ml容量瓶中，各加水至4ml、茚三酮溶液（3.2）0.5ml和缓冲液

4、（3.1）2ml，在沸水浴中加热15min，冷却后加水定容至25ml，按4.3的操作测定吸光度（A）。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制标准曲线。参考标准曲线：C=0.1686*A+0.03815结果计算5.1计算方法和公式茶叶中游离氨基酸含量，以干态质量百分率表示，按下式计算：式中：B——试样液总质量，g；L——测定用试样量，ml；M——试样量，g；C——根据4.3测定的吸光度从标准曲线上查得的茶氨酸的mg数；1.002——试样液比重（经验值）；m——试样干物质含量百分率，%。5.2重复性同一样品进行两次测定，取两次测定的算术平均值作为结果。测定值

5、之差，不得超过平均值的5%。备注：本方法参考GB8314《茶游离氨基酸总量的测定》。生效日期页次2/2页序A表号:R-0110-002-1A文件标准用纸