dna与蛋白质技术

dna与蛋白质技术

ID:20508365

大小:124.00 KB

页数:8页

时间:2018-10-13

dna与蛋白质技术_第1页
dna与蛋白质技术_第2页
dna与蛋白质技术_第3页
dna与蛋白质技术_第4页
dna与蛋白质技术_第5页
资源描述:

《dna与蛋白质技术》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库

1、选修一DNA和蛋白质技术(一)基础知识扫描一、DNA的粗提取与鉴定1、DNA的溶解性:根据DNA与____________等其他成分在不同浓度的__________溶液中的__________不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA与蛋白质分离。DNA的溶解度最低时的NaCl浓度是_________mol/L。尝试画出DNA的溶解度随NaCl浓度的变化的曲线图。______________________2、DNA_________于酒精,但是细胞中的某些蛋白质________酒精。3、蛋白酶对DNA________(有或无)影响;大多数蛋白质不能忍受_____

2、______的高温,而DNA在_______以上才会变性。洗涤剂能够瓦解_____________,但对DNA没有影响。4、DNA遇____________试剂在______________条件下,会染成_________色。5、两次使用蒸馏水的作用:第一次的作用________________________________;第二次使用的作用__________________________。二、血红蛋白的提取和分离1、本课题中蛋白质分离的方法是__________,是根据__________的大小分离蛋白质的方法。2、缓冲溶液:在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的

3、____________对溶液_________的影响,维持pH基本不变。缓冲溶液通常由___________种___________溶解于水中配制而成。3、电泳:在pH和电场作用下,带电分子会向着_______________________的电极移动。三、实验操作:其中血红蛋白因含有___________而呈现红色。(一)样品处理1、红细胞的洗涤:目的是___________________,以利于后续步骤的分离纯化。将采集的血样分离红细胞的方法是___________________离心,用吸管吸出上层黄色__________,向下层暗红色的红细胞中加入五倍体积的

4、_______________,搅拌、离心,如此反复洗涤三次,直至上清液中_______________,说明红细胞已洗涤干净。这里洗涤次数过少,无法___________________;离心速度过高和时间过长会使___________等一同沉淀,达不到分离的效果。2、血红蛋白的释放:向红细胞中加入_____________,再加40%体积的___________,搅拌。3、分离______________溶液:将搅拌好的混合液以____速_______时间离心,看到溶液分成4层,第1层为无色透明的____________,第2层为______________固体,是

5、____________物质的沉淀层,第3层是______________的水溶液,第4层是____________的暗红色沉淀物。4、透析:将血红蛋白溶液装入透析袋,放入物质的量浓度为________________的__________缓冲液中,透析12h。(二)凝胶色谱操作1、凝胶色谱柱的制作:2、凝胶色谱柱的装填:本实验用的是交联葡聚糖凝胶G—75,G表示__________________________________________,75表示_________________,即__________________________。配成凝胶悬浮液后,缓慢倒

6、入色谱柱内,如果发现有气泡,则__________________。装填完后,立即连接缓冲液洗脱瓶洗脱。3、样品的加入和洗脱:在蛋白质分离过程中,如观察发现红色区带________地移动,说明成功。(三)操作提示:1、色谱柱填料的处理:商品凝胶使用前需直接放在_____________或_____________中膨胀。为了加速膨胀,可以将湿凝胶用沸水浴加热,这种方法不但节约时间,而且可以除去凝胶中可能带有的______________,排除胶粒内的___________。2、凝胶色谱柱的装填:装填时要尽量紧密,以降低凝胶颗粒之间的__________;也不能有气泡,气

7、泡会________________________________,降低分离效果;也不能发生_________________,露出凝胶颗粒的现象。小结:蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理是指_________________________________________________________,粗分离是指__________,纯化是指____________________,纯度鉴定是指_________________________。(二)典型例题1、下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是A.洗涤剂能瓦解细胞膜,

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。