dna和蛋白质技术学案

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1、专题5　DNA和蛋白质技术第16课时　DNA的粗提取与鉴定目标导航　1.了解DNA的物理性质。2.理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。一、提取DNA的方法1．提取生物大分子的基本思路(1)选用一定的________或________方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。(2)DNA的粗提取就是利用DNA与________、________和________等在物理或化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。2．提取DNA分子的基本原理(1)利用DNA的溶解性①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一点，选择适当

2、浓度的NaCl溶液就能使DNA溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。溶解规律2mol/LNaCl0.14mol/LNaClDNA在NaCl溶液中，浓度为________溶解析出mol/L时溶解度________蛋白质NaCl浓度从2mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大部分发生盐析溶解由上表可以看出，在NaCl为2mol/L时DNA________，而部分蛋白质发生盐析而生成________，通过过滤可除去部分________；NaCl为0.14mol/L时DNA________，过滤可除去溶

3、解的部分________。②DNA不____酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则____酒精。利用这一原理，可将DNA与蛋白质进一步分离。(2)利用DNA和蛋白质对酶、________和________的耐受性不同①蛋白酶能水解蛋白质，但对________没有影响。②大多数蛋白质不能忍受________的高温，而DNA在80℃以上才会变性。③洗涤剂能够溶解________，但对________没有影响。(3)DNA的鉴定：DNA在沸水浴的条件下，遇________会染成________。二、提取DNA及鉴定DNA的实验流程1．实验材料的选取实验材料的选择

4、原则是选用________含量高的生物组织。有些材料不宜选用，如有些哺乳动物的成熟红细胞无细胞核，无法提取DNA。实验中一般选用________或________作为实验材料。2．破碎细胞，获取含DNA的滤液(1)动物细胞一般采用____________破碎的方法。(2)植物细胞需要先用__________溶解细胞膜，再加入一定量________，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集________。归纳总结　动、植物细胞在获取DNA滤液方面的比较原理方法动物细胞[高考资源网](鸡血细胞)在低渗溶液中会吸水涨破在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒

5、搅拌，过滤后收集滤液植物细胞(洋葱)洗涤剂能够溶解细胞膜在切碎的洋葱中加入一定量的洗涤剂和食盐，充分搅拌和研磨，过滤后收集研磨液3.去除滤液中的杂质释放出的核物质是DNA、RNA和蛋白质等的混合物，根据不同的方案，可采用以下三种去除滤液中杂质的方案。原理方法方案一DNA在不同浓度的________溶液中溶解度不同①在滤液中加入NaCl，使其溶液浓度为2mol/L，过滤除去不溶的杂质②调节滤液中的NaCl溶液浓度为0.14mol/L，析出DNA，过滤去除溶液中溶解的杂质DNA对酶的耐受性方案二直接在滤液中加入________，____________中的

6、________________能够分解蛋白质，反应10～15min方案三DNA对高温的耐受性将滤液放在________的恒温水浴箱中保温10～15min，注意严格控制温度范围，使______沉淀，而________分子还未变性，可以将DNA与蛋白质分开4.DNA的析出(1)原理：DNA不溶于________，但细胞中的某些蛋白质则能溶于酒精。(2)方法①将过滤得到的含DNA的黏稠物溶于________的NaCl溶液，再过滤得到含DNA的滤液。②向滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的、体积分数为______的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现___

7、_____丝状物，它就是粗提取的DNA。③用玻璃棒沿同一方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。(3)目的①析出DNA；②去除溶于酒精的杂质。5．DNA的鉴定(1)鉴定原理：DNA＋________________(2)步骤项目两支20mL的试管[来源:学&科&网Z&X&X&K][来源:学科网ZXXK][来源:学科网ZXXK][来源:学科网][来源:学+科+网Z+X+X+K][来源:学科网][来源:学科网ZXXK][来源:学科网]1号2号实验步骤加入2mol/L的NaCl溶液5mL5mL加入丝状物(DNA)√用玻璃棒搅拌________溶解加入二

8、苯胺试剂4mL4mL沸水浴加热5min5min观察现象________变蓝提醒　(1)甲基绿可