高效液相色谱法测定连贞滴丸中盐酸小檗碱的含量

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1、高效液相色谱法测定连贞滴丸中盐酸小檗碱的含量李春花，刘素霞，宋建芳【摘要】　　目的建立以高效液相色谱（HPLC）法测定连贞滴丸中盐酸小檗碱含量的方法。方法HPLC色谱条件：C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm)；柱温20℃；流速1.0ml/min；检测波长345nm；流动相为乙腈∶0.2%磷酸水（25∶75）。结果盐酸小檗碱的标准曲线为：Y=42148043.09245X-243222.939726，r=0.9991（n=6），峰面积与浓度在0.00988～0.0988mg/ml范围内呈良好的线性关系，平均回收率为100.68%，RSD为1.18%。结论测定方法准确、可靠、可用于控制连

2、贞滴丸的质量。【关键词】连贞滴丸盐酸小檗碱高效液相色谱法质量标准　　Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCmethodfordeterminationofthecontentofberberinehydrochlorideinLianzhenpill．MethodsTheHPLCconditionsn(200mm×4.6mm,5μm),columntemperature20℃,acetonitrice:0.2%sphoricacidobilephase,theflol/min,andthedetection．ResultsThecalibrationcurveo

3、fberberinehydrochlorideg/ml.Theaveragerecoveryethodisaccurate,reliable,andcanbeusedforqualitycontrolofLianzhenpill.　　KeyonsilODSC18柱(4.6mm×200mm,5μm)；流动相为乙腈∶0.2%磷酸水(25∶75)；检测波长345nm；柱温20℃；流速1.0ml/min；进样量20μl。　　2.2对照品溶液的制备精密称取105℃烘干5h的盐酸小檗碱对照品9.88mg，置100ml容量瓶中，加盐酸∶甲醇（1∶100）超声处理5min溶解并定容至刻度，即得（0.0988m

4、g/ml）。　　2.3供试品溶液制备　　取连贞滴丸40粒，研细，取适量，精密称定1.47981g，置100ml容量瓶中，加盐酸：甲醇（1∶100）适量，超声处理20min(25℃)，加盐酸：甲醇（1∶100）至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。　　2.4阴性对照溶液的制备　　取缺黄连的连贞滴丸，根据供试品溶液的制备方法，制备阴性对照品溶液。　　2.5系统适应性实验精密吸取已制备好的对照品、供试品和阴性样品溶液，照“2.1”项下色谱条件，各进样20μl，理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算不低于4838(见图1～4)。结果表明，供试品与对照品溶液均在相同保留时间内出现盐酸小

5、檗碱吸收峰，阴性对照品液在该处无吸收峰，说明本实验条件下盐酸小檗碱峰与其它组分峰分离完全。　　2.6线性关系考察分别精密吸取上述对照品溶液1，2，4，6，8，10ml至10ml容量瓶中，用盐酸∶甲醇（1∶100）定容。按上述色谱条件进样检测，测定其峰面积值，并以盐酸小檗碱的峰面积Y为纵坐标,对照品中盐酸小檗碱浓度X(mg/ml)为横坐标进行回归，得标准曲线方程：Y=42148043.09245X－243222.939726，r=0.9991（n=6）。结果表明，在0.00988～0.0988mg/ml范围内，盐酸小檗碱的峰面积与浓度呈良好的线性关系。　　2.7精密度实验取滴丸样品，按上述方法制

6、备供试品溶液，连续进样5次，按色谱条件进行检测，以峰面积计算RSD为1.90%(n=5)。结果表明，该方法精密度良好。　　2.8稳定性实验取滴丸样品制备供试品溶液，分别于0，4，8，12，16，20，24h进行测定。其峰面积RSD为2.07%(n=7)。结果表明，供试品溶液24h内稳定性良好。　　2.9加样回收率实验取同一批样品滴丸15粒（约750mg），按供试品制备方法进行制备，超声处理5min，定容至100ml容量瓶中，测定其盐酸小檗碱浓度为0.04981mg/ml。精密移取该溶液10ml置25ml容量瓶中，平行操作6次，分别加入盐酸小檗碱对照品溶液（0.0988mg/ml）4，4，5，5

7、，6，6ml，超声处理5min使之混匀，用盐酸∶甲醇（1∶100）定容，依法测定。结果见表1。表1连贞滴丸加样回收率实验结果（略）　　2.10样品含量的测定取3批连贞滴丸(批号20070401，20070402，20070403），依法制成供试品溶液,每批2份，测定滴丸中盐酸小檗碱的含量。结果见表2。表2连贞滴丸中盐酸小檗碱的含量（略）　　由实验结果可知，连贞滴丸中盐酸小檗碱平均含量为6.806m