egb改善东莨菪碱致记忆障碍小鼠的研究

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1、EGb改善东莨菪碱致记忆障碍小鼠的研宄魏贤飞彭浩第三军医大学实验背景：众所周知记忆力减退是中老年人的常见症状，记忆减退不仅影响正常生活,也可能是痴呆的早期表现之一。单纯记忆减返和以记忆减返为主要表现的轻度认知损害在未来几年内都冇发展为痴呆，即阿兹海默症的危险。因此围绕如何改善阿兹海默症人群记忆障碍，进而进一步提升阿兹海默症人群的生活质量，一直是人们研宂的热点。现如今市场上充斥着各种各样的健脑药品，尤其是近几年最为集中，几乎每年都有数种健脑保健药上市，诸如脑白金、好记星、脑动力、健脑等等。如此多的药品让我们感觉眼花缭乱,让人无从选择！同时我们不难发现，市售的大多数此

2、类药品都是西药合剂，由此我纳闷了，西医的历史这么短暂，都能爆炸式的研制这么多的药，我们历史悠远的祖国医学难道真的没落了么。我们在查阅相关中药材屯籍得知银杏叶提取物(extractfromginkgobiloba:EGb)有延缓细胞老化、抗袞老、防治中老年脑功能不足的保健功效，最近几年被作为新型的治疗老年痴呆的新型中药。进一步查阅了相关文献后得知EGb确实具冇改善记忆的作用，也冇人做了相关的研究！那么宂竞效果如何呢？为了解决心中的疑问，我们组设计了以下的实验。实验目的：1、探讨EGb对改善kl忆障碍小鼠记忆能力的作用效果，为临床治疗记忆障碍疾病提供依据2、探讨传统屮

3、药的药用价值实验原理：记忆障碍的病理及生理基础：造成记忆障碍(memorydisorders)的疾病很多，脑部各种变性病(如Alzheimer病)，脑外伤和拳击手痴呆；皮质下动脉硬化性脑病,腔隙性梗塞，脑梗塞和脑出血等脑血管病后；脑炎后;一氧化碳中毒等脑缺氧后；营养缺乏性脑病(如Wernicke脑病)；酒精中毒和生化代谢障碍性脑病等均可引起。记忆障碍是一个复杂的病理过程，其病理基础主要有以下几点：①学习记忆相关脑区突触形态和功能的改变。包括突触数量、突触素含量的减少；突触体膜流动性的改变；突触可塑性的改变等。②中枢祌经递质的改变。包括胆碱能祌经；去甲肾上腺素(NE

4、)能和5-羟色胺(5-HT)能祌经；氨基酸类祌经递质；肽类祌经递质等。③钙离子浓度的改变。④基因表达的改变。⑤祌经营养的改变。银杏叶提取物的药理机制：银杏叶提取物主要含有黄酮苷类和萜烯A酯类生物活性物质，银杏酮可抑制血管紧张素酶(ACE)。ACE的作用是将血管紧张素I转变为血管紧张素II,而血管紧张素II可使外周小动脉强烈收缩使血压升商。ACE被抑制后，不但减少血管紧张素11生成和醛固酮及儿茶酚胺的分泌，且延缓了舒缓激肽的降解火活，从而扩张脑血管、冠状动脉，降低血管阻力.能改善脑细胞血液循环、活化细胞代谢，它对缺氧的大脑细胞具有保护功能。黄酮类化合物结构上的活性酚

5、羟基可直接与活泼自由基反应，其机制是阻断自由基链的传链过程，从而阻断自由錐链。银杏黄酮能明®抑制A聚集和纤维形成，与其抗氧化作用有关。银杏黄酮易与(V、-0H等发生亲电子反应，生成比较稳定的苯酮自由基，阻止活泼自由基进一步的氧化作用。白果内酯BB（bilobalide）是银杏特冇的倍半萜烯，是银杏内酯的主要成分。一些实验表明BB冇神经保护作用，适当的剂量可以对神经元的再生冇一定的作用，BB可明显抑制氧白由基引起的PC12细胞凋亡，可抑制氧自由基引起的PC12细胞内p53,c-Myc,和Bax表达升高及Cas-pasc-3的激活。结果还提示白果内酯可能作用于PC12

6、凋亡的早期过程，通过淸除氧自由基，继而抑制p53,c-Myc和Bax表达升高及Caspase-3的激活。BB可以有效防止脑神经的损伤，同时BB还有改善脑血管血流量的作用，这样BB对老年性痴呆症就可以达到改善和治疗的作用。实验材料：动物：东茛菪碱致记忆障碍模型昆明小鼠、正常小鼠试剂：新斯的明，干燥银杏叶，蒸馏水，食物，纯乙酰胆碱器材：灌胃针管，乙醇，分光光度计，九宫格学习记忆实验模型，220v交流电源，安全电极，树脂层析装置实验过程：1〉小鼠模型分组实验共分5组，每组10只小鼠A组：阴性对照组，正常小鼠B组：阳性对照组，东茛菪碱小鼠C组、I〕组、E组为给药组，东莨菪

7、碱小鼠2>EGb精提物的制备干燥粉碎的银杏叶V60°C,2h,重复三次浸提液合并浸提液I减压浓缩，干燥银杏叶粗提取物1）101树脂柱/65%乙醇

8、流速为224Bv/h（Bv为树脂柱体积）洗脱物I减压浓缩十燥银杏叶精提物（用分光光度法测定其中黄酮含S）3〉配置实验用药剂25mg精提物+100ml蒸溜水一25mg/100ml50mg精捉物+100ml蒸彻水-*50mg/100ml100mg精提物+100ml蒸溜水一lOOmg/lOOml4〉给药方式蒸馏水灌胃，5ml/次，3次/日普通饲料喂养一周5>进行行为学实验1.第一阶段实验：将小鼠放入九宫格迷宫屮，如果小鼠前进一

9、格就给予食