米索前列醇对去势后大鼠早期骨丢失的保护

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1、米索前列醇对去势后大鼠早期骨丢失的保护【摘要】目的通过对去势后大鼠给予米索前列醇，了解米索前列醇对去势后大鼠早期骨丢失的保护。方法选取鼠龄90d的D）inovariecˉtomized（OVX）rats.Methods30femaleDeasuredbydual-eneryX-rayabsorption，andreˉversetranscription-polymerasechainreaction（RT-PCR）examinationindicatedtheexpressionofOPGonmRNAlevelintibialmet

2、aphyses.Thefirstlumbarvertebraeorphometricanalysis.ResultsTheBMDofratsshogroupisoprostolgroupgroup，OVXgroupandOVX+misoprostolgroup.TheOPGof3groupsofratsshoisoprostolgroupgroup.Parametersofbonehistomorphometricanalysisshogroupisoprostolgroupizedratsbyup-regulationOPGmRN

3、Alevelandinhibitosteoclasticboneresorption.　　Keyisoprostolbonemineraldensityosteoprotegerinrevevsetranscriptiou-polymerasechainreˉaction　　骨质疏松症（Osteoporosis）是以骨量减少，致使骨的脆性增加而易发生骨折的一种全身性骨骼疾病，它以骨的微观结构退化为特征［1］。随着社会的老龄化，骨质疏松症患者也越来越多，尤其是绝经后妇女最为突出。寻找安全有效的治疗方法成为当前研究的热点，现在临床上治疗

4、骨质疏松症的药物和方法都很多。米索前列醇（misoprostol）是前列腺素E1的类似物，在临床上广泛应用于内科、妇产科和器官移植。有报道米索前列醇能够刺激体外培养的成骨细胞分泌骨保护素，提示米索前列醇有可能影响骨量的改变。本实验通过给予骨质疏松症的模型动物米索前列醇，比较骨密度（bonemineraldensity，BMD）和骨小梁面积，来研究米索前列醇能否预防去势后大鼠早期骨的丢失，并通过对骨保护素的逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测，以此来初步探讨米索前列醇影响骨量改变的原理，为防治绝经后骨质疏松寻找一种新的治疗药物。　　

5、1材料与方法　　1.1研究对象及模型的制作研究对象:3个月龄雌性dNTP1μl、10×缓冲液5μl;在另一50μl反应体系中加入β-肌丝蛋白引物各1μl其余成分同前。反应程序为:94℃预变性5min;然后进行30个循环的扩增（94℃变性1min，55℃退火1min，70℃延伸1min）;最后70℃延伸7min。　　称取琼脂糖，与TBE缓冲液配制1.0%凝胶，微波炉内煮沸，稍冷却后加入10%EB2μl。取扩增产物8μl与2μl0.25%溴酚蓝上样，与250bpMarker4μl作电泳45min后紫外灯观察，并照相保存。　　1.4统计学

6、方法将所得的数据用SPSS11.0软件进行统计学分析，进行t检验，设定P<0.05差异有显著性。　　骨密度检测显示骨密度对照组稍高于去势给药组，而去势组骨密度最低。　　2.2H-E切片结果见表2及图2。　　表2平均骨小梁面积比较（略）　　注:ˇ与对照组比较P<0.05，#与去势组比较P<0.05　　图2H-E切片结果比较（略）　　平均骨小梁面积结果显示对照组>去势给药组>去势组（均P<0.05），并可从图2可见对照组骨小梁粗大髓腔正常大小;去势组骨小梁细小且有断裂现象，髓腔宽大;去势给药组介于两者

7、之间。　　2.3RT-PCR结果比较见图3、图4。RT-PCR琼脂糖凝胶电泳照片如图3所示，右图显示OPG电泳带，左图显示β-actin电泳带。以β-actin作为参照对象，对所得照片进行图象分析。用OPG与β-actin光密度之比作为分析数据，所得数据如图4所示。　　3讨论　　绝经后骨质疏松的治疗药物和方法有很多，如性激素、降钙素、维生素D、双磷酸盐类等等，现临床上比较常用的就是雌激素替代疗法，效果比较肯定，但长期服用有较多副作用，可引起子宫内膜增生、阴道出血，并可使子宫内膜癌发病率上升。现已有重组骨保护素用于去势大鼠的实验研究［

8、5］，并取得好的疗效，但生产较困难及价格高，并且安全性未得到长期监测，不能广泛应用于临床。寻找一种较为安全、易得、价廉的药物成为目前研究的重点。　　用去势后大鼠构建骨质疏松症的模型，是一种成熟的技术，本次实验检测到去势后大鼠的骨密度较