人口腔癌细胞系的建立

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1、人口腔癌细胞系的建立1国内已建立的口腔癌细胞系及其特点1.1国内建立的细胞系继人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113建立以来，国内建立的细胞系还有人颊黏膜鳞癌BCaCD885、腭腺样囊性癌ACC2、腮腺腺样囊性癌ACC3、舌下腺腺样囊性癌SACC83、腭黏液表皮样癌MEC1、人小涎腺腺样囊性癌NACC细胞系、人牙龈癌颈淋巴结转移细胞系GNM及舌鳞癌细胞系TSCCa［2］,以及与上述细胞系相关的6株高转移细胞系和3株耐化疗药物的细胞系。此外还建立了于嚼槟榔而无吸烟史者右颊黏膜鳞癌细胞系OC3［3］，腭黏膜黑色素瘤细胞系ME［4］，等等。1.

2、2国内建立的常用细胞系的生物学特征1.2.1Tca8113细胞系系列Tca8113细胞系于人舌鳞状细胞癌，由上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科肿瘤生物实验室何荣根等［1］建立，至今已有23年，该细胞系生长稳定，初建系时群体倍增时间为38.8h，分裂指数高峰值为61‰，平板集落形成率为86.0％；染色体多数稳定在66条，为亚三倍体，有M1标记的染色体，连续传代仍保留此有价值标记的染色体；接种于兔抗小鼠胸腺细胞血清ATS处理的C57BL和ICR小鼠皮下，成瘤率为100％。周晓健等［5］在此细胞系的基础上建立了对顺铂（CDDP）耐药的细胞

3、系Tca8113/CDDP，耐顺铂的剂量为9.2mg/L。张建国等［6］建立了耐长春新碱细胞系Tca8113/V100，耐长春新碱剂量为100μmol/L。第四军医大学口腔医学院吴军正等［7］于1999年通过裸鼠尾静脉注射Tca8113细胞，取一有神经症状的裸鼠脑组织原代培养，建成了高转移的细胞系Tb，该细胞染色体多数为66条，裸鼠皮下接种成瘤率100％；与Tca8113细胞相比，Tb细胞中线粒体更发达，分泌颗粒多，S期细胞百分比高，群体倍增时间短，软琼脂克隆形成率高，在裸鼠体内的实验性肺转移能力明显提高。又通过裸鼠舌黏膜下注射Tb细胞，取颈

4、淋巴结转移灶建成细胞系TbTl，又将TbTl细胞经裸鼠尾静脉注射，取发现截瘫的裸鼠脊髓培养，建成了舌鳞癌脊髓转移细胞系Ts，该细胞染色体多数为60条，裸鼠皮下接种成瘤率为100％；与Tb细胞相比，Ts细胞群体倍增时间短，S期细胞百分比高，软琼脂克隆形成率高。1.2.2BCaCD885细胞系人颊黏膜鳞状细胞癌细胞系，由华西医科大学口腔医学院廖小宜等［8］于1990年建立。该细胞系贴壁率高，2h达83％；分裂指数高峰值为79‰；群体倍增时间为40.5h；半固体琼脂培养克隆形成率为29.8％；平板集落形成率为10.3％；染色体多数为亚三倍体，有染色

5、体畸变和15种异常染色体，其有价值的标记染色体为Inc7q；裸鼠皮下接种成瘤率为100％。1.2.3MEC1细胞系系列人黏液表皮样癌细胞系MEC1，于腭部，由第四军医大学口腔医学院司徒镇强等于1990年建立。该细胞系在4h贴壁率为86.9％，群体倍增时间约30h，分裂指数高峰值为27‰；染色体为亚二倍体，44～46条；鼠抗人角蛋白抗体染色阳性，兔抗人分泌片（Sc）抗体和兔抗人溶菌酶抗体染色均阳性；细胞为单层生长，铺满瓶底后出现漂浮细胞，少见有重叠生长现象。该课题组在MEC1细胞系的基础上建立了耐药细胞系MEC1/FU，耐FU剂量为1.

6、980μg/L，与MEC1相比，该细胞系增殖略快，软琼脂克隆形成率明显提高，S期细胞增多，部分解释了其耐药性产生的基础。该课题组又通过裸鼠尾静脉注射MEC1，筛选出高转移细胞克隆Mc3，与其母本细胞MEC1比较，Mc3具有生长较快，S期细胞比例较高，接触抑制力下降（饱和密度高），在软琼脂内克隆形成率高，野生型P53蛋白表达阳性率低，裸鼠实验性肺转移率高等生物学特点，表明Mc3是一个高转移细胞株。该课题组用Mc3细胞经裸鼠涎腺移植，鼠间原位移植后获得转移力提高的M3SP2细胞系。杨宏林等将Mc3经尾静脉注射获得截瘫的裸鼠，取其脊髓培养，建

7、立了细胞系Ms，与Mc3相比，Ms增殖速度和克隆形成率均较高，但裸鼠皮下接种成瘤速度慢。1.2.4SACC83细胞系人涎腺腺样囊性癌细胞系，于左舌下腺，由北京大学口腔医学院李盛琳等［9］于1987年建立。该细胞高峰期分裂指数为44‰；染色体多数为98～100条，为亚四倍体；裸鼠皮下接种成瘤率为100％,以浓度5×108/L接种该细胞，于2个月时成瘤，这与腺样囊性癌转移、复发所需时间较其他肿瘤长的临床观察一致。该细胞电镜下观察主要由两种细胞组成，即闰管细胞和分泌细胞，有丰富的染色质和细胞器。此后，应用该细胞又建立了人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞

8、系SACCLM。1.2.5ACC2、ACC3细胞系腺样囊性癌细胞系，为肺低转移细胞系,由上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科何荣根等［10］于1988