巨噬细胞调理液对视网膜色素上皮细胞合成单核细胞趋化蛋白

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1、巨噬细胞调理液对视网膜色素上皮细胞合成单核细胞趋化蛋白　　摘要:目的评价巨噬细胞调理液（MCM）对视网膜色素上皮（RPE）细胞合成单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的作用.方法在培养的人RPE细胞的培养液中加入200mL・L-1培养人巨噬细胞调理液（MCM），培养2，4，8，16，24和48h后，对培养的细胞进行免疫组化和原位杂交，用CP-1的含量.同时在培养液中加入地塞米松（10-8，10-7和10-6mol・L-1）和道诺霉素（2，20和200mg・L-1）重复上述实验，观察在此条件下MCM对MCP-1合成的作

2、用.结果200mL・L-1MCM培养条件下RPE细胞2h时已检测出分泌的MCP-1并在16h达到较高水平.同时原位杂交和免疫组化在细胞中检测到MCP-1的表达.加入地塞米松（P<0.01）和道诺霉素（P<0.05）后，MCP-1的分泌水平明显降低，其中地塞米松对MCP-1合成的抑制作用大于道诺霉素.结论MCM刺激RPE细胞产生MCP-1，而MCP-1对巨噬细胞和淋巴细胞有较强的趋化作用，这种循环相互作用的过程对增生性玻璃体视网膜病变的发生可能有重要的作用.在视网膜脱离后尽早使用地塞米松可能对抑制增殖性玻璃体视网膜病变有作用.　　K

3、eyonocytechemotacticprotein-1;macrophages;retinalpigmentepithelialcell;dexamethasone;daunorubicinAbstract:AIMToexaminetheeffectsofculturedmacrophageconditionedmedia（MCM）onproductionandgeneexpressionofmonocytechemotacticprotein-1（MCP-1）ofhumanretinalpigmentepithelial（HRPE）cell.METH

4、ODSHRPEL・L-1macrophagecondi-tionedmedia（MCM）for2，4，8，24or48h，andethasone（10-8，10-7，10-6mol・L-1）ordaunorubicin（2，20，200mg・L-1）.SecretedMCP-1inthesupernatantofculturedRPEeasuredusingCP-1munohistochemistry.RESULTSSecret-edMCP-1L・L-1MCMfor2hoursafterincubat

5、ion，andreachedthemostintensityat16hours.MCP-1incytoplasmetime.ThelevelsofMCP-1inculturesethasone（P<0.01）orDaunorubicin（P<0.05）ultaneously.DexamethasoneshoulateRPEtoproduceMCP-1acrophageintotheinflammatoryarea.ThismayimplyanloopinteractionintheprocedureofPVR.Earlytreatmenteth

6、asonemaybehelpfulinpreventingtheoccurrenceofproliferativevitreoretinopathy.　　0引言　　视网膜脱离后发生的一个重要变化就是血-视网膜屏障的破坏，血浆成分和炎症细胞可以借此进入视网膜下腔参与视网膜脱离后的炎症过程［1］.对新鲜视网膜脱离后视网膜下液中的细胞成分进行分析，发现其中的主要成分是巨噬细胞和淋巴细胞［2］.巨噬细胞在增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）中有重要作用［3］，但巨噬细胞参与PVR形成中的作用机制还没有详细地得到揭示.单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）是参与炎症过程的一

7、种重要炎症细胞趋化因子，其靶细胞是巨噬细胞和淋巴细胞，在临床和实验研究中，发现PVR的前膜组织中存在这种因子［4］.本实验的目的是研究巨噬细胞的培养调理液对视网膜色素上皮（retinalpigmentepithelium，RPE）细胞合成MCP-1的作用，以及地塞米松和道诺霉素对这一过程的影响.　　1材料和方法　　1.1材料细胞系为原代培养人RPE细胞.由本院王雨生副教授惠赠4个不同人的第四代RPE细胞作为实验细胞.　　1.2方法　　1.2.1巨噬细胞调理液（MCM）的制备取肝硬化患者的腹水200mL，1000r・min-1离心5min，制成

8、细胞悬液，孵育，24h后用Hank’s液冲洗未附壁细胞，48h用胰