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《声动力治疗巨噬细胞通过促进ATP释放趋化单核细胞.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、n录1屮文摘要2Abstract文献综述12材料与方法13技术路线1516192121参考文献22中文摘要目的:证明声动力治疗(sonodynamictherapy,SDT)
2、el噬细胞能够趋化单核细胞的聚集并探讨其机制。方法:将实验对象分为对照组、SDT组、ATPase组及SDT-ATPase组。其中对照组为单纯THP-1源性巨噬细胞,而SDT组是在对照组基础上加入终浓度为15ug/ml的5-氨基酮戊酸(5-Aminolevulinicacid,ALA),孵育2小吋后接受声动力治疗。ATPase组及SDT-ATPase组则是分别在对照组和SDT组基础上加入
3、ATPaseo将实验对象离心后取其细胞上清液并分别用transwell方法研究其对单核细胞的趋化作用;将实验对象分为对照组、SDT组、zVAD-fmk组及SDT-zVAD组。其屮对照组为单纯THP-1源性巨噬细胞,SDT组是在对照组基础上加入ALA,孵育2小吋后接受声动力治疗。zVAD-fmk组及SDT-zVAD组则是分别在对照组和SDT组基础上加入N-苯甲基氧化碳酰-缠氨酸-内氨酸-天冬氨酸-氯化内酮(zVAD-fmk)o将实验对象离心后,分别用荧光素酶方法检测细胞上清及细胞内ATP量的变化。结果:用transwell方法研究声动力治疗后的细胞上清对单核细
4、胞的趋化作用时,从募集的单核细胞数量来看,声动力治疗组明显高于对照组(p<0.05),加入ATPase并进行声动力治疗组与声动力治疗组相比显著降低,对照组与ATPase组无统计学差异(p>0.05);用荧光素酶方法,检测声动力治疗巨噬细胞后及加入凋亡抑制剂后细胞上清及细胞内ATP量的变化得出:声动力治疗组明显高于对照组,约为其3倍(p<0.05);加入zVAD-fmk并进行声动力治疗组较声动力组显著降低;对照组与zVAD-fmk无统计学差异(p>0・05)。结论:声动力治疗巨噬细胞通过促进凋亡相关的ATP释放趋化单核细胞关键词:ATP动脉粥样破化声动力疗法巨
5、噬细胞AbstractPurpose:Thispaperisdesignedtoinvestigatetheeffectsofmonocytesrecruitmentaftersonodynamictherapvanddelveintoitsmechanism.Methods:Thesubjectsweredividedintofourgroups:Thecontrolgroup,theSDTgroup,theATPasegroupandtheSDT-ATPasegroup.ThecontrolgroupmerelycontainsTHP-1derivedm
6、acrophages.TheSDTone,containingmacrophagesandsonosensitizerALA,wasincubatedwithfreshmediumfor6hbeforebeingexposedtopulseultrasoundirradiation.TheATPasegroupwasamixtureofthecontrolgroupandATPase.Similarly,theSDT-ATPasegroup,wascomprisedoftheSDTgroupandATPase.Cell-freesupernatantsfro
7、meachgroupwereassessedfortheirabilitytoattractTHP-1monocytesinatranswellmigrationassay.ForafurtherstudyofATPconcentrationschanges,weuseanotherfourgroupsofsubjects:Thecontrolgroup(macrophagesalone),theSDTgroup,thezVAD-fmkgroup(addedcaspase-inhibitorzAVD-fmk)andtheSDT-zAVDgroup(liket
8、heSDTgrouppretreatedwithzAVD-fmk).Supernatantsandcelldebrisafterhighspeedcentrifugationfromthesefourgroupswereinvestigatedrespectively.Results:Cell-freesupernatantswithSDTwereassessedfortheirabilitytoattractTHPTmonocytesinatranswellmigrationassay.TheSDTgroupinducedanapproximatelysi
9、xfoldgreaterrecruitmentofm