声动力治疗巨噬细胞通过促进atp释放趋化单核细胞科研训练论文1

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1、哈尔滨医科大学七年制学生基础阶段科研论文病理生理学教研室单位代码：10226学号：2009172057分类号：20091720332009172075哈尔滨医科大学七年制学生基础阶段科研训练论文题目：声动力治疗巨噬细胞通过促进ATP释放趋化单核细胞学科、专业：病理生理学教研室学生姓名：曹博然张翰赵雪竹指导教师：田野教授指导研究生：孙鑫郭淑媛陈海波二○一二年七月23哈尔滨医科大学七年制学生基础阶段科研论文病理生理学教研室目录目录1中文摘要2Abstract3文献综述5前言12材料与方法13技术路线15结果16讨论19结论21致谢21参考文献2223哈尔滨医科大学七年制学

2、生基础阶段科研论文病理生理学教研室中文摘要目的：证明声动力治疗(sonodynamictherapy,SDT)巨噬细胞能够趋化单核细胞的聚集并探讨其机制。方法：将实验对象分为对照组、SDT组、ATPase组及SDT-ATPase组。其中对照组为单纯THP-1源性巨噬细胞，而SDT组是在对照组基础上加入终浓度为15μg/ml的5-氨基酮戊酸（5-Aminolevulinicacid,ALA），孵育2小时后接受声动力治疗。ATPase组及SDT-ATPase组则是分别在对照组和SDT组基础上加入ATPase。将实验对象离心后取其细胞上清液并分别用transwell方法研究

3、其对单核细胞的趋化作用；将实验对象分为对照组、SDT组、zVAD-fmk组及SDT-zVAD组。其中对照组为单纯THP-1源性巨噬细胞，SDT组是在对照组基础上加入ALA，孵育2小时后接受声动力治疗。zVAD-fmk组及SDT-zVAD组则是分别在对照组和SDT组基础上加入N-苯甲基氧化碳酰-缬氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氯化丙酮(zVAD-fmk)。将实验对象离心后，分别用荧光素酶方法检测细胞上清及细胞内ATP量的变化。结果：用transwell方法研究声动力治疗后的细胞上清对单核细胞的趋化作用时，从募集的单核细胞数量来看，声动力治疗组明显高于对照组（p<0.05），加

4、入ATPase并进行声动力治疗组与声动力治疗组相比显著降低，对照组与ATPase组无统计学差异（p>0.05）；用荧光素酶方法，检测声动力治疗巨噬细胞后及加入凋亡抑制剂后细胞上清及细胞内ATP量的变化得出：声动力治疗组明显高于对照组，约为其3倍（p<0.05）；加入zVAD-fmk并进行声动力治疗组较声动力组显著降低；对照组与zVAD-fmk无统计学差异（p>0.05）。结论：声动力治疗巨噬细胞通过促进凋亡相关的ATP释放趋化单核细胞关键词：ATP动脉粥样硬化声动力疗法巨噬细胞23哈尔滨医科大学七年制学生基础阶段科研论文病理生理学教研室AbstractPurpose:

5、Thispaperisdesignedtoinvestigatetheeffectsofmonocytesrecruitmentaftersonodynamictherapyanddelveintoitsmechanism.Methods:Thesubjectsweredividedintofourgroups:Thecontrolgroup,theSDTgroup,theATPasegroupandtheSDT-ATPasegroup.ThecontrolgroupmerelycontainsTHP-1derivedmacrophages.TheSDTone,con

6、tainingmacrophagesandsonosensitizerALA,wasincubatedwithfreshmediumfor6hbeforebeingexposedtopulseultrasoundirradiation.TheATPasegroupwasamixtureofthecontrolgroupandATPase.Similarly,theSDT-ATPasegroup,wascomprisedoftheSDTgroupandATPase.Cell-freesupernatantsfromeachgroupwereassessedforthei

7、rabilitytoattractTHP-1monocytesinatranswellmigrationassay.ForafurtherstudyofATPconcentrationschanges,weuseanotherfourgroupsofsubjects:Thecontrolgroup(macrophagesalone),theSDTgroup,thezVAD-fmkgroup(addedcaspase-inhibitorzAVD-fmk)andtheSDT-zAVDgroup（liketheSDTgrouppretreatedwithz