肺炎克雷伯菌超广谱β

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1、肺炎克雷伯菌超广谱β程训民，张琪，徐元宏，李敏，朱素珍，沈继录【关键词】,肺炎克雷伯菌DetectionofextendedspectrumbetalactamasesandanalysisofantibioticresistanceinclinicalisolatesofKlebsiellapneumoniae　　【Abstract】AIM:Tostudythephenotypeandgenotypedistributionofextendedspectrumbetalactamases(ESBLs)producingKlebsiel

2、lapneumoniae（K.pneumoniae）anditsdrugresistance.METHODS:SeventysevenstrainsofK.pneumoniaeinedby1999NCCLsmethodsandthegenotypeofESBLsplifiedbypolymerasechainreaction(PCR).Theantibioticsusceptibilityofbacteriainedbymicrodilution.RESULTS:Inthe77positiveK.pneumoniaeisolatesof

3、theinitialscreentest,45strains(58.1%)edbycefotaximeandcefotaximeclavulanicacidbutonly27strainsedbyceftazidimeandceftazidimeclavulanicacid.PCRshooniaeisoneofthemostmonESBLsproducingstrains.TheratesofESBLsproducingK.pneumoniaesignificantlyincreaseinrecentyearsandCTXMismost

4、mongenotype.Somestrainscarrytoregenotypes.Imipenemisthemostsusceptibleantibiotic.　　【Keyoniae;betalactamases;phenotype;genotype;drugresistance；antibiotic　　【摘要】目的：了解产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的表型和基因分布及对常用抗生素的耐药情况.方法：用1999年NCCLS推荐的初筛试验从77株肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌，并用确证试验加以确认；用PCR的方法扩

5、增其基因型；用微量液体稀释法做药敏实验.结果：将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法确证，用头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定，77株肺炎克雷伯菌中共检出45株产ESBLs（58.1%）；而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为27株.PCR扩增基因型阳性结果为TEM型19株、SHV型8株、CTXM型36株、OXA型11株.结论：近年来肺炎克雷伯菌产ESBLs率显著升高；基因型以CTXM型为主，有些菌株同时携带多种耐药基因；亚胺培南仍为首选药物,头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦为候选药物.　　【关键词】肺炎克雷伯菌;β内酰胺酶

6、类;表型;基因型;耐药性;抗菌药物　　0引言　　超广谱β内酰胺酶(extendedspectrumbetalactamases,ESBLs）是由质粒介导的能使细菌对三代头孢菌素类、青霉素类及单酰胺类抗生素耐药的一类酶，ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，以肺炎克雷伯菌为代表菌属.近年来，肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株逐年增多，ESBLs在菌株间的转移和传播〔1〕，使其耐药性成为突出问题.我地区产ESBLs肺炎克雷伯菌的检测结果及耐药性分析如下.　　1材料和方法　　1.1材料　　肺炎克雷伯菌77株来自200302/200411淮北市人民医院、

7、淮北矿工总院、濉溪县医院疑为感染患者血液、骨髓、浆膜腔穿刺液、脑脊液、尿液和前列腺液等.质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922,肺炎克雷伯菌ATCC700603，标准产酶Eco菌株TEM1，TEM3，SHV5，CTXM3，CTXM24，TOHO1，OXA1，OXA2和OXA10均由安徽医科大学徐元宏副教授惠赠.药敏试验采用微量液体稀释法,ESBLs检测采用头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟、头孢曲松纸片进行初筛,确证试验采用头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟/克拉维酸纸片、药敏培养基（MuellerHinton琼脂）均购自Oxiod公司.根据GenB

8、ank公布的blaTEM，blaSHV，blaCTXM和blaOXA的DNA序列设计合成8对特异性引物，均由上海生物工程公司合成.PCR扩增试剂盒购自大连宝生生物公司.　　1.2方法　　选用头孢他啶、氨曲南