肺炎克雷伯菌超广谱β论文

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1、肺炎克雷伯菌超广谱β论文程训民，张琪，徐元宏，李敏，朱素珍，沈继录【关键词】,肺炎克雷伯菌DetectionofextendedspectrumbetalactamasesandanalysisofantibioticresistanceinclinicalisolatesofKlebsiellapneumoniae【Abstract】AIM:Tostudythephenotypeandgenotypedistributionofextendedspectrumbetalactamases(ESBLs)produci

2、ngKlebsiellapneumoniae（K.pneumoniae）anditsdrugresistance.METHODS:SeventysevenstrainsofK.pneumoniaeinedby1999NCCLsmethodsandthegenotypeofESBLsplifiedbypolymerasechainreaction(PCR).Theantibioticsusceptibilityofbacteriainedbymicrodilution.RESULTS:Inthe77positiveK.

3、pneumoniaeisolatesoftheinitialscreentest,45strains(58.1%)edbycefotaximeandcefotaximeclavulanicacidbutonly27strainsedbyceftazidimeandceftazidimeclavulanicacid.PCRshooniaeisoneofthemostmonESBLsproducingstrains.TheratesofESBLsproducingK.pneumoniaesignificantlyincr

4、easeinrecentyearsandCTXMismostmongenotype.Somestrainscarrytoregenotypes.Imipenemisthemostsusceptibleantibiotic.【Keyoniae;betalactamases;phenotype;genotype;drugresistance；antibiotic【摘要】目的：了解产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的表型和基因分布及对常用抗生素的耐药情况.方法：用1999年NCCLS推荐的初筛试验从77株肺炎克雷

5、伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌，并用确证试验加以确认；用PCR的方法扩增其基因型；用微量液体稀释法做药敏实验.结果：将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法确证，用头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定.freelbetalactamases,ESBLs）是由质粒介导的能使细菌对三代头孢菌素类、青霉素类及单酰胺类抗生素耐药的一类酶，ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，以肺炎克雷伯菌为代表菌属.近年来，肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株逐年增多，ESBLs在菌株间的转移和传播［1］，使其耐药性成为突出问题.我地区产ESBLs肺炎克雷伯菌的

6、检测结果及耐药性分析如下.1材料和方法1.1材料肺炎克雷伯菌77株来自200302/200411淮北市人民医院、淮北矿工总院、濉溪县医院疑为感染患者血液、骨髓、浆膜腔穿刺液、脑脊液、尿液和前列腺液等.质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922,肺炎克雷伯菌ATCC700603，标准产酶Eco菌株TEM1，TEM3，SHV5，CTXM3，CTXM24，TOHO1，OXA1，OXA2和OXA10均由安徽医科大学徐元宏副教授惠赠.药敏试验采用微量液体稀释法,ESBLs检测采用头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟、头孢曲松纸片进行初筛,确

7、证试验采用头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟/克拉维酸纸片、药敏培养基（MuellerHinton琼脂）均购自Oxiod公司.根据GenBank公布的blaTEM，blaSHV，blaCTXM和blaOXA的DNA序列设计合成8对特异性引物，均由上海生物工程公司合成.PCR扩增试剂盒购自大连宝生生物公司.1.2方法选用头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟、头孢曲松药敏纸片，用MH琼脂35℃18h观察结果，按NCCLS标准进行判断［2］.凡头孢他啶的抑菌圈直径≤22mm,.freelm,氨曲南或头孢噻肟≤27mm为可疑ESBLs菌株.

8、每批试验均用大肠埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603做质控.按标准纸片扩散法用CAZ和CAZ/clav，CTX和CTX/clav两组纸片做确证试验，含克拉维酸与其相应不含克拉维酸的纸片抑菌圈直径差值≥5mm，确定为产ESBLs菌株.采用德国Biometra公司DNA扩增仪及大连宝生生物工程公司PCR反应试剂盒进行DNA扩增