肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶的检测及耐药性分析

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1、肺炎克雷伯菌超广谱13内酰胺酶的检测及耐药性分析张立红徐庆顾国平(无锡市中医医院检验科江苏无锡214001)【中图分类号】R563.lL文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)28-0011-02【摘要】目的了解医院内肺炎克雷伯菌耐药性及超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分布情况，以指导临床用药。方法釆用梅里埃ATB自动分析仪进行细菌鉴定和药敏，按CLSI标准进行产超广谱β内酰胺酶的确证试验。结果194株肺炎克雷伯蘭检出产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌51株，检出率为26.29%,其中产酶菌株其

2、对碳青酶烯类均敏感，对阿米卡星耐药性较低为20.75%，对其它抗生素都只有较高的耐药性。结论超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌在临床上检出率较高，多重耐药现象明显，细菌室应注重ESBLs的监测和报告，指导临床合理应用抗菌药物，控制ESBLs菌株在医院内播散和流行。【关键词】肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌是临床常见的条件致病蘭，是引起院内感染的的重要致病菌。随着三代头孢类抗菌药物在临床的广泛应用，导致越来越多的临床分离株产ESBLs。为了解我院肺炎克雷伯菌产ESBLs的特点及耐药状况，木实验对我院分离出的肺炎克雷伯

3、菌进行了ESBLs的确认和药敏试验，以指导临床合理用药。1.材料和方法1.1标木来源:2010年1月至2011年12月我院住院病人送检的各类标木(痰液、尿液、血液、脓液、伤口拭子、胸腹水等)，去除同一患者相同部位标木分离株。1.2微生物鉴定及药敏：严格按照《全国临床检验操作规程》第3版进行微生物的分离，用梅里埃ATB自动鉴定、药敏分析仪进行测试。鉴定及药敏板条均购自生物梅里坎公司。1.3ESBLs的确认：木实验采用纸片扩散法，NCCLS规定头孢他啶或头孢噻肟两种药的任何一种，加克拉维酸后的抑菌环比不加前直径扩大>=5mm,即判定为

4、产ESBLs株，实验采用的是头孢他啶（30μg/片）、头孢他啶/克拉维酸（30/10μg/片）纸片。质控菌株为肺炎克雷伯菌ATCC700603和大肠埃希菌ATCC25922。1.4统计分析：用WH0NET5软件进行统计分析1.结果2.1产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌检出率共检出肺炎克雷扪菌194株，其中产ESBLs菌株为51株，检出率为26.29%,结果见表1。表1194株肺炎克雷伯菌ESBLs检出率统计（％）2.2肺炎克雷扪菌对抗菌药物的耐药率产ESBLs肺炎克雷伯菌株对阿莫西林/克拉维酸、替卡西林/克拉维酸及头

5、孢类药物的耐药率均明显高于ESBLs阴性菌株，对头孢类药物的耐药性均大于60%，结果见表2。表2肺炎克雷伯菌对常用抗生素耐药表2.讨论肺炎克雷扪菌作为产超广谱β内酰胺酶的代表性细菌，是临床上引起医院感染的重要条件致病菌。随着第三代抗生素的广泛使用，产超广谱β内酰胺酶菌日益增多［1］。超广谱β内酰胺酶能水解青霉素、广谱头孢菌素等抗菌药物，使其失去抗菌活性，表现为对青霉素类、头孢类抗菌药物的高耐药。本研宄中产ESBLs肺炎克雷怕菌的发生率为26.29%,与肖永红等［2】报道的检出率24.6%基本一致。结果显示，

6、对除亚胺培南和美洛培南外的苏他18种抗菌药物，产ESBLs细菌的耐药性显著高于非产ESBLs细菌，产ESBLs菌对亚胺培南、美洛培南尚全部敏感，这是由于青霉素类的噻唑环上的硫原子为碳所替代，且C2与C3之间存在不饱和双键；另外，其•6位羟乙基侧链为反式结构，可以阻挡与β内酰胺酶的结合，因此广泛用于治疗ESBLs细菌的感染。含有β内酰胺酶抑制剂的β内酰胺类复合制剂能在不同程度上抑制ESBLs,但本研究发现：阿莫西林/克拉维酸、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率奋明显增高的趋势，这主要是由于临床上多

7、年联合应用三代β内酰胺类抗菌药和酶抑制剂，使细菌在选择压力下，β内酰胺类基因发生突变，此外其他耐药机制，如外膜孔蛋白的缺失或减少、外排泵的过表达等也发挥了重要作用，这在其他地区也屡见报道［3-5］。阿米卡星、奈替米星、头孢噻肟、阿莫西林/克拉维酸、头孢毗肟、头孢他啶、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星等对非产ESBLs的细菌尚较为敏感，因此可针对非产酶株引起的感染进行治疗。肺炎克雷扪菌的主要耐药机制就是产ESBLs酶，此酶能够水解青霉素、广谱头孢菌素等抗菌药物，但不能水解含酶抑制剂的复合制剂、头霉素以及

8、碳青霉烯类药物。ESBLs流行的基因型在不同国家和地区存在差异，呈明显的区域特征。我国各地流行的有SHV、CTX-M及TEM型等ESBL基因亚型。ESBLs的基因型与耐药表型密切相关，SHV型对头孢他啶的水