葛根素干预对糖尿病肾病大鼠降钙素基因相关肽的影响研究

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1、葛根素干预对糖尿病肾病大鼠降钙素基因相关肽的影响研究　　[]目的研究葛根素对糖尿病肾病（DN）大鼠降钙素基因相关肽（CGRP）的影响。方法链脉佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠模型，随机分为糖尿病组（D组）、葛根素治疗组（S组），同时另设正常对照组（组），给药干预14周后，测定空腹血糖（FBG）、尿微量白蛋白（U-mAIb）、血浆内皮素（ET）和CGRP含量。结果糖尿病大鼠UAER增加，ET升高，CGRP下降，给予葛根素治疗14周后，S组DN大鼠U-mAIb较D组显著降低，ET显著下降，CGRP明显升高。结论葛根素对糖尿病大鼠肾脏病变有一定的保护作用，其部分机制可能是通过

2、上调CGRP含量而实现的。[关键词]葛根素；糖尿病肾病；降钙素基因相关肽；大鼠[]R96[]A[]1674-4721（2013）03（a）-0007-03降钙素基因相关肽（calcitoningene-relatedpeptide，CGRP）是1983年由国外学者RosenfeldMG等[1]发现的一种具有复杂生物功能的活性多肽，是迄今为止所知的体内最强的内源性舒血管多肽，CGRP与糖尿病肾病的发生发展关系密切。许多研究证实，糖尿病患者血浆CGRP水平降低，且在合并糖尿病肾病时降低更明显[2-4]。本文拟结合葛根素（puerarin）防治糖尿病的作用机理，通过对糖尿病

3、肾病大鼠腹腔注射葛根素注射液，来观察葛根素对血浆中CGRP的影响，为DN的防治提供实验依据。1材料与方法1.1药物及试剂葛根素注射液（黑龙江哈尔滨医大药业有限公司提供，国药准字H20044142，批号：2010-03-12）；链尿佐菌素（STZ，美国Sigma公司），临用前用柠檬酸缓冲液配成l%的STZ溶液；大鼠降钙素基因相关肽（CGRP）试剂盒，内皮素（ET）试剂盒，尿微量白蛋白（U-mAIb）试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。1.2仪器GC-911γ放射免疫计数器（中国科技大学创新股份有限公司）、DNM-9602型酶标仪（北京普朗新技术有限公司）、

4、HH-8数字显示恒温水浴箱（常州国华仪器公司）、便携式血糖仪（日本京都公司）、DT-1001电子天平（江苏常州衡器厂）、低速大容量离心机（上海安亭科学仪器厂）。1.3动物6周龄Sprague-Dan;15.6）g，单笼喂养，室温20℃，相对湿度50%，1d中光照∶黑暗时间为12h∶12h，自由摄食饮水。1.4实验方法1.4.1动物建模40只大鼠预养一周后，随机选取一组10只为正常对照组，剩余30只空腹12h，腹腔注射1%STZ-柠檬酸钠缓冲液35mg/kg体质量。对照组注射等量柠檬酸钠缓冲液，依据72h后尿糖+++～++++，尾静脉采血测血糖，血糖≥16.7mm

5、ol/L者，确定模型建立。除去造模失败及实验过程中死亡大鼠，将糖尿病鼠22只纳入本实验。1.4.2分组（1）正常对照组（组10只）：糖尿病鼠随机分为；（2）糖尿病组（D组11只）：（3）葛根素治疗组（S组11只），S组每只给予160mg/kg/d葛根素注射液进行腹腔注射，组腹腔注射等容量0.9%氯化钠溶液，均连续干预14周。1.4.3标本采集第14周实验终止时，各组大鼠在禁食的基础上，用代谢笼收集24h尿液，测定尿白蛋白含量，动物经乙醚麻醉后心脏取血。测试生化指标：（1）空腹血糖（fastingbloodglucose，FBG）采用便携式血糖仪测定；（2）尿微量白蛋白

6、（urinarymicroalbumin，U-mAIb）采用ELISA法测定；（3）内皮素（endothelin，ET）采用放免法测定；（4）降钙素基因相关肽（CGRP）用放免法测定。1.5统计学方法所有数据用SPSS12.0软件进行统计分析，实验所得数据均以均数±标准差（x±s）表示，各组均数之间均用单因素方差检验（one-mol/L；葡萄糖耐量试验：两组大鼠禁食12h后，按2g/kgB大鼠U-mAIb显著减少，ET下降明显，CGRP较模型组明显增加，从而延缓DN发生发展的病理进程。崔秀玲等[12]研究发现：DM模型组大鼠尿清蛋白排泄率显

7、著升高，且随病程延长而增加，表明DM可以损伤肾小球，且随病程的延长损伤加重。分别采用低、中、高剂量葛根素治疗后，尿清蛋白排泄率较正常对照组有一定程度升高，但明显低于中剂量组，提示葛根素对DM模型大鼠肾脏有较好的保护作用。本研究亦表明葛根素对DN有明显的改善作用，其部分原因可能是通过提升CGRP的作用，拮抗或抑制ET的释放，使肾脏血管舒张，改善微循环，减少U-mAIb的排放。但其具体的机制还待进一步研究。[