食品安全生物技术检测

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1、食品安全的生物技术检测本文由攒点屁不容易贡献ppt文档可能在WAP端浏览体验不佳。建议您优先选择TXT，或下载源文件到本机查看。资料整理:KLC净化设备/KLC空气过滤器http://www.klcfilter.com食品安全的生物技术检测生吉萍一、转基因生物的特性1、由启动子、结构基因和终止子组成的、由启动子、基因盒（基因盒（genecassette）。）。2、抗性筛选标记基因和报告基因、重组质粒基因包括：重组质粒基因包括：标记片段启动子目的基因终止子载体基因片段3、检测目标在检测转基因食品时，主要针对在检测转基因食品时，外源

2、启动子、终止子、外源启动子、终止子、筛选标记基因、基因、报告基因和结构基因的DNA序列和产物进行检测。序列和产物进行检测。序列和产物进行检测4、检测的方式、基于核酸的PCR检测检测基于核酸的技术基于蛋白质的酶学和免疫学检测技术向自动化技术发展的生物传感器生物芯片技术。生物芯片技术。二、PCR检测技术1、策略：、策略：针对外源的序列进行检测，如：CaMV35S启动子，启动子，启动子终止子，和NOS终止子，抗性终止子筛选标记基因和报告基因。基因。2、优点、可以从加工过的食品中检测出外源基因，中检测出外源基因，并且具有操作相对简单的特

3、点，单的特点，因此成为目前应用最为广泛的检测方法。检测方法。表PCR检测植物源转基因食品目的DNA所用引物靶基因引物序列产物长度（bp）NPTⅡTGCGGCCGCTTGGGTGGAGAG470CTGGCGCGAGCCCCTGATGCTCATTCTTGCCCGCCTGATGAATGCTC471GCCCCGCCCTGCCACTCHPTAGCTGCGCCGATGGTTTCTACAA509ATCGCCTCGCTCCAGTCAATGGUSCTGCGACGCTCACACCGATACC441TCACCGAAGTTCATGCCAGTCCAGNO

4、S终止子AGAAGGAGTGCGTCGAAGCA178AATCATAAAAACCCATCTCAOCS终止子ATCAAATCTTCCAGCTTTAA185CAATCAGTAAATTGAACGGACaMV终止子CGCAAATCACCAGTCTCTCT201ACTGGATTTTGGTTTTAGGABARGCCGACATCCGCCGTGCCAC479GTCCAGCTGCCAGAAACCCABARNASECTGGGTGGCATCAAAAGGGAACC160TCCGGTCTGAATTTCTGAAGCCTGBARSTARTCAGAAGTATC

5、AGCGACCTCCACC235AAGTATGATGGTGATGTCGCAGCC3、PCR技术普通PCR技术技术普通巢式PCR技术巢式技术多重PCR技术多重技术PCR-ELISA技术技术定量PCR技术定量技术real-time实时定量实时定量PCR技术等。技术等。技术等1）普通PCR反应*是目前应用最为广泛的技术，是其他是目前应用最为广泛的技术，是其他PCR技是目前应用最为广泛的技术技术的基础。术的基础。**通过对要扩增的目标通过对要扩增的目标DNA序列设计特异引物通过对要扩增的目标序列设计特异引物或简并引物）优化反应条件，（或

6、简并引物），优化反应条件，达到对目标序列扩增的目的。序列扩增的目的。***普通普通PCR广泛应用于分子生物学研究的各个普通广泛应用于分子生物学研究的各个领域。如病原菌的检测、转基因生物的检测、领域。如病原菌的检测、转基因生物的检测、疾病的检测、基因的克隆、疾病的检测、基因的克隆、基因工程载体的构建等。建等。2）巢式、半巢式PCR技术）巢式、半巢式技术是消除假阴性、是消除假阴性、假阳性提高灵敏度的方法。度的方法。巢式PCR技术技术巢式设计两对引物，设计两对引物，其中一对引物结合的位点在另一对引物扩增的产物之中。点在另一对引物扩增的

7、产物之中。具体过程：具体过程：首先运行扩增大片段的引物，首先运行扩增大片段的引物，然后以第一次扩增的产物作为模板，进行第二次扩增，次扩增的产物作为模板，进行第二次扩增，这样通过产物的琼脂糖凝胶电泳比较就可以知道检测结果。以知道检测结果。如果第一次扩增是非特异的，如果第一次扩增是非特异的，而且扩增的片断大小与设计的相似，在电泳中无法区别，小与设计的相似，在电泳中无法区别，这时通过第二次扩增，由于第二对引物与扩增产物中过第二次扩增，没有配对的序列，因此不能扩增出产物。没有配对的序列，因此不能扩增出产物。这样就消除了假阳性的干扰。就消

8、除了假阳性的干扰。同时，同时，由于第一次扩增起到模板数量放大的作用，使检测的灵敏度增加了3-6个数量级，使使检测的灵敏度增加了个数量级，个数量级检测的低限达到pg乃至乃至fg级检测的低限达到乃至级。3）多重PCR技术）多重技术即设计一组引物，在一个反应过程中，即