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1、大蒜素对金黄色葡萄球菌抗菌作用刁玉兰1黄勇2(1广东省阳东县人民医院检验科529500;2广东省阳江监狱医院529535)【摘要】探讨大蒜素对金黄色葡萄球菌的抗菌作用。以大蒜素和罗红霉素、万古霉素，头孢他啶、头孢拉定对112株金黄色葡萄球菌体外药敏实验。结果：大蒜素对金黄色葡萄球菌的抗菌作用很明显,金黄色葡萄球菌对大蒜素提取物的耐药率较低。大蒜素提取物对金黄色葡萄球菌生长有强力抑制作用。【关键词】大蒜素金黄色葡萄球菌抗菌作用【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2014)11-0259-02大蒜素(allicin
2、),化学名为二烯丙基三硫化物，其结构式为CH2=CH-CH2-S-S-S-CH2-CH=CH2,是大蒜的主要有效成分。大蒜素具有广泛的药理活性，抗菌谱广,对革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌，真菌都兵有较好的抑制作用。近年来，耐药金黄色葡萄球菌的发病率随着广谱抗生素和免疫抑制剂的应用呈逐年上升态势,常用的抗菌药物普遍存在有较大的毒副作用，长期使用可产生耐药性。木实验中检测了大蒜素对金黄色葡萄球菌体外抑菌作用，旨在寻找治疗日益增多的金黄色葡萄球菌感染性疾病的新途径。1材料与方法1.1材料1.1.1受试菌株112株金黄色葡萄球菌为2009年1月至2013
3、年12月间分离自我院临床各科送检标木，按《全岡临床检验操作规程》鉴定。金黄色葡萄球菌JCIA为广东省临床检验中心发放菌株。在血液培养基中,37°C培养24h菌落；取酵母型培养物,以无菌生理盐水洗下菌苔,PBS洗涤2次后，以RPMI1640制成一定浓度的菌悬液备用。1.1.2药物大蒜素由山东鲁抗晨欣药业奋限公司提供，罗红霉素、头孢他啶、头孢拉定，万古霉素由珠海迪尔公司提供。1.2方法按NCCLS[1]方案进行，稍加修改即各受试金黄色葡萄球菌株在血液培养基上转种2次，以确保其生长纯度和活力。经24h培养后选择生长较好的菌落,以无菌生理盐水制成菌悬
4、液。接种吋以RPMI1640培养液将其稀释成(0.5〜2.5)×103cfu/mL。用RPMI1640培养液倍比稀释各种药槪于96孔培养板上每行1〜10列孔内加入系列稀释药液lOO&mu上冋时做3行复孔。药物的最终作用浓度分别为大蒜素2〜1024μg/mL、罗红霉素2〜1024μg/mL、万古霉素2〜1024μg/mL、头孢他陡1〜512μg/mL和头孢拉定2〜1024μg/mL。第11孔为阴性对照;12孔为阳性对照。加入己制备好的金黄色葡萄球菌悬液100μL于各孔中，阴性对照孔不加。再于各孔中
5、加入10μL指示剂(alamarblue),各孔变为蓝色。经35°C48h培养后观察结果，冇念珠菌生长的孔由蓝色变为紫红色或亮红色;阴性对照孔全部保持蓝色不变，阳性对照孔全部变为亮红色结果才有意义。以刚变色的前一孔的浓度为MIC值。2结果大蒜素和4种常用抗菌药物对金黄色葡萄球菌标准株」CIA和112株临床分离株的体外抗菌效果见表1、2。标准菌株KIA的MIC结果表明大蒜素对金黄色葡萄球菌的抗菌作用相当于头孢他啶，略低于万古霉素;临床分离株对罗红霉素和头孢他啶的耐药率很高，对大蒜素提取物的耐药率较低。表1112株临床分离金黄色葡萄球菌对5
6、种药物的耐药情况3讨论金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。大蒜素化学名为二烯丙三硫化物,是从大蒜挥发汕中分离出的化合物。国内外学者对大蒜的化学、药理、临床方面进行了多方面的研究及实践,证明人蒜素具冇卓越的解毒、抗菌、抗病毒、降血脂、降血糖、抗肿瘤、提高机体免疫功能等功效，且副作用轻微［2,3］。金黄色葡萄球菌感染的治疗成为临床各科关注的热点,0前常用的抗菌药物有头孢类、大环内酯类等，普遍存在有较大的耐药作用。目前万古霉素保持其较
7、高的抗菌活性，故仍然是许多严重金黄色葡萄球菌感染的首选药物，但是其严重的副作用又限制了它的使用。头孢他啶的抗菌谱较窄，它多用于耐药球菌的治疗，难治性金黄色葡萄球菌感染。实验中112株临床分离念珠菌亦显示了对万古霉素的敏感性，但对头孢拉定和罗红霉素较低。因此天然药物的筛选成为寻找新型抗菌药物的新思路。大蒜素抗细菌的原理在于大蒜素分子中的氧原子与细菌生长繁殖所必需的半胱氨酸分子中的巯基相结合，或使巯基酶失活而抑制其生长和繁殖、脱氢酶、硫氧还原蛋白还原酶、RNA聚合酶等影响半胱氨酸蛋白酶活性，大蒜素与这些酶上面的巯基结合而抑制细菌活性;大蒜素即使在
8、亚抑制浓度下也能氧化硫氢基团，干扰细胞内电子通过二硫氢基降解酶的传递反应而导致细胞休眠或死亡［4,5］。本实验结果亦显示人蒜素对临床常见的病原菌一金黄色葡萄球菌具有
