10种中草药对金黄色葡萄球菌的体外抗菌试验

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1、动物医学进展,2005,26(6):95-98ProgressinVeterinaryMedicine*10种中草药对金黄色葡萄球菌的体外抗菌试验王德海,程国富(华中农业大学动物医学院,湖北武汉430070)中图分类号:S852.611;S859.7文献标识码:A文章编号:1007-5038(2005)06-0095-04摘要:采用试管法和平板法,分别测定了10危害降到最低限度,应用中草药治疗是切实可行的[3]种中草药对临床分离的一株鸡关节炎源性金方法之一。近年来,随着中草药防治畜禽疾病的黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MI

2、C)和最低发展,我国广大的中兽医工作者对中草药的药理活[4]性的研究也逐渐加深。中草药对病原菌的体外抑杀菌浓度(MBC),从而为临床预防和治疗鸡[5]菌试验陆续有研究报道,一般采用管碟法、固体培金黄色葡萄球菌性关节炎提供理论依据。结[6][7]养基法、纸片抑菌法、平皿稀释法以及海绵栓果发现,10种单味中草药对临床分离的球菌[8]法等进行,这些方法仅对中草药的抑菌活性做定均有一定的抗菌活性,尤其是黄连、大青叶、性的研究。本试验以临床分离的一株鸡关节炎源性艾叶、连翘4种中草药的体外抗菌效果更明金黄色葡萄球菌作为供试菌株,采用

3、试管法和平皿显。法对本研究小组前期从45种药物中所筛选出的10关键词:中草药;金黄色葡萄球菌;最小抑菌[9]种中草药的药理活性进行定量分析,以便为其临浓度;最低杀菌浓度床应用提供依据。鸡金黄色葡萄球菌性关节炎是鸡葡萄球菌病中1材料与方法较常见的一种,其临床症状常表现为关节肿大,跛1.1供试菌株行,精神沉郁,采食量和饮水量降低,机体消瘦而死,由武汉市某种鸡场自然患关节炎病鸡的关节腔给规模化养殖户带来巨大的经济损失。2004年,本内分离,经纯化、鉴定、保存的葡萄球菌菌株,置-20研究小组曾对山东某7万套艾维因父母代种鸡厂进e

4、保种,备用。行了连续4周的观察,发现在10周龄左右时,患腿1.2中草药病的鸡只数突然增多,由于腿病的发生而导致的日金荞麦(RadixFagopyriCymosi)、艾叶死淘的鸡只数由几十只增加到数百只,造成种母鸡(ArtemisiargyiLevl)、黄连(Rhizoma群体的整齐度下降,开产不一致,产蛋率降低,种公Coptidis)、连翘(HypericumPerforatum)、黄芩鸡的精液品质下降,种蛋的受精率显著降低,使该种(RadixScutellariae)、黄柏(Cprtex鸡场经济损失惨重。Phellod

5、endri)、夏枯草(SpicaPrunellae)、大青叶由于金黄色葡萄球菌的致病机制比较复杂,至(FoliumIsatidis)、紫草(RadixLithospermi)、菊今对该病尚未找到理想的疫苗,用抗菌药物对患病花(ChrysanthemiIndici)均购自武汉市天然药品鸡只进行治疗是当前规模化养禽业的主要手段,但研究所。随着抗菌药物的滥用,细菌的耐药性大幅度提高,而1.3培养基[1-2]金黄色葡萄球菌的耐药性可通过质粒转移,从而按常规方法配制营养肉汤和普通琼脂培养基。导致临床控制鸡病更加困难。此外,用化学药

6、物防1.4单味药液的制备治疾病,不但使动物的抵抗力下降,而且药物可在动将以上10种中草药分别称取100g,加水1L~物机体内残留蓄积,对机体产生毒副作用。为了达2L,浸泡30min后煎煮,煮沸后文火煎30min,用到既能防病治病,又可将抗生素使用不当所导致的*收稿日期:2004-12-01作者简介:王德海(1977-),男,湖北武汉人,硕士,讲师,主要从事动物病理学和中兽医学的教学和科研工作。96动物医学进展2005年第26卷第6期(总第140期)四层纱布过滤后取药液,药渣再加水0.5L~1L,按1.7判定标准上述方法进

7、行再次操作后过滤药液。合并两次药首先在观察阳性对照管长菌呈浑浊状,而阴性液,用文火浓缩至100mL,即认为药液中生药的含对照管不长菌、呈透明状的前提下,再观察其他试管量为1g/mL。高压灭菌后备用。的浑浊情况,以判断不同浓度药液的抑菌作用,如试1.5菌悬液的制备管内呈浑浊,证明有细菌生长,用/+0表示;如试管取保存的供试菌株,接种于普通培养基上,内澄清透明,证明无菌生长,用/-0表示。以眼观不37e条件下培养18h后,用灭菌生理盐水将菌苔洗浑浊试管的最低药物浓度作为该药的MIC;若药液下,即为金黄色葡萄球菌的菌悬液,调整

8、其浓度为色素太深,从中取一环接种于普通培养基上,培养后1010cfu/mL,4e冰箱内保存备用。再进行观察。1.6试验设计自上述各管中挑取培养液1环,分别接种于普采用试管法检测中草药的MIC,以自制牛肉膏通琼脂培养基,置37e恒温箱内培养24h后观察汤培养基将中草药原液稀释5倍后(即药液浓度为结果。凡在相应培养皿上无

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