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《凉血活血法对肺纤维化小鼠羟脯氨酸和转化生长因子》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、凉血活血法对肺纤维化小鼠羟脯氨酸和转化生长因子.freelethodonpreventionandtreatmentofpulmonaryfibrosis,.freelechanism.MethodsMaleICRmicelydividedinto4groups：negativecontrolgroup,pulmonaryfibrosismodelgroup,coolingbloodandinvigoratingcirculationgroupandprednisonepositivecontrolgroup.Thepulmonaryfibrosismodelofmiceiceent,th
2、eindexeselinkedimmunosorbentassay,andhydroxyproline(HYP)inedbyalkalinehydrolysis.ResultsThedegreeofairsacculitisandfibrosisinmodelgroupareobviouslyhigherthanthenegativecontrolgroupbypathologicalobservation.paredodelgroup,HYPcontentodelgroup,TGF-β1contentethodofcoolingbloodandinvigoratingcirculatio
3、ncanreducethedegreeofairsacculitisandfibrosis,anddecreasethecontentofHYPandTGF-β1inlungtissueandBALF.ItspossiblemechanismmayberelatetoinhibitingTGF-β1expressionanddecreasingcollagenproteinproduction,onaryfibrosis；TGF-β1；hydroxyproline；coolingbloodandinvigoratingcirculationmethod；mice2003年,传染性非典型肺炎
4、肆虐,在其病理演变过程中可出现不同程度的纤维化病理改变1。西医以皮质激素和细胞毒药物治疗,但仅有10%～30%肺纤维化患者经糖皮质激素治疗有一定的疗效2,且激素不良反应大,常出现大面积股骨头坏死的情况,致残率非常高。本实验研究凉血活血法对肺纤维化的干预作用,不仅为肺纤维化提供中医辨证论治新治法和有效方剂,而且从转化生长因子-β1(TGF-β1)含量变化探讨其作用机制。1实验材料1.1动物雄性清洁级ICR小鼠28只,体重25～28g,中国医学科学院上海药物研究所实验动物中心提供,动物许可证号：SCXK(沪)2004-0005号,饲养于清洁级动物房。1.2药物强的松片,上海医药(集团)有限公司
5、信谊制药总厂生产(批号071201)；犀角地黄汤由水牛角、生地黄、赤芍、牡丹皮组成,饮片购于上海中医药大学附属曙光医院,按常规方法煎制成每毫升药液含1g原药材。1.3试剂天狼星红(SiriusRedF3B),购自德国默克公司。小鼠TGF-β1定量ELISA试剂盒,上海森雄科技实业有限公司生产；羟脯氨酸(HYP)试剂盒,南京建成生物工程有限公司生产；博莱霉素粉剂,每支15mg,日本化药株式会社生产(批号270560)。1.4主要仪器JJ300型精密电子天平,常熟双杰测试仪器厂制造；K-70全自动高速冷冻离心机,湘仪-TOMY联合制造；UV754N紫外-可见分光光度计,上海光学仪器厂制造；Sp
6、ecotrat酶标比色仪,SLT公司制造。2实验方法2.1造模和分组将雄性ICR小鼠随机分为阴性对照组、肺纤维化模型组、凉血活血法组、阳性对照组,每组7只。适应性饲养1周后造模。阴性对照组经鼻滴入生理盐水20μL,其余各组经鼻滴入博莱霉素7μg/g(20μL)建立肺纤维化模型。各组小鼠于28d处死。2.2给药凉血活血法组用犀角地黄汤,阳性对照药用强的松片。造模8h开始常规灌胃给药,每日1次。各组给药剂量按人与小鼠体表面积比进行换算。凉血活血法组小鼠的等效剂量为每日15.86g/kg；阳性对照组给药剂量根据临床使用情况及文献用量定为1.3mg/kg,药液浓度为0.1mg/mL,用生理盐水作为
7、溶剂；模型组和阴性对照组给予等体积的生理盐水灌胃。2.3肺间质纤维化小鼠肺组织病理学观察新鲜分离的小鼠右下叶肺组织,常规经10%福尔马林固定和石蜡包埋。每个蜡块连续切片2张,1张做常规HE染色,光镜下观察组织病理学变化；1张用0.1%苦味酸天狼星红溶液做天狼星红染色,光镜下观察肺间质纤维化的有无及程度。2.4肺间质纤维化小鼠肺组织羟脯氨酸含量测定取于-70℃冰柜冻存的肺组织,按南京建成生物工程研究所HYP测试盒说明书操作
