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时间:2018-10-03
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1、维生素C含量测定方法综述摘要目前研究维生素C测定方法的报道较多,如滴定法、光度分析法、高效液相色谱法等,各种方法各有特点。特别是高效液相色谱法是近年来发展较快的一种方法。本文对近年来有关维生素C的测定方法进行了综述。关键词维生素C滴定法光度分析法高效液相色普法等概述维生素C是可溶于水的无色结晶,是一种分子结构最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能,所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态,起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中,新鲜的水果、蔬菜,特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富
2、。准确测定维生素C的含量,对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。近年来报道的测定方法主要有滴定法、光度法、高效液相色谱法等。维生素C的结构式维生素C:六碳的多羟基内酯1滴定法测定维生素C1.12,6一二氯靛酚法1.2微量滴定法2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量其能还原2,6-二氯酚靛酚染料。维生素C具有还原性的烯二醇基,我们通过氧化还原滴定来测定维生素C——2,6-二氯靛酚法原理2,6-二氯靛酚是一种染料,其氧化型在酸性介质中为红色,碱性介质中为蓝色,与Vc反应后,生成无色的还原型酚亚胺,因此,在酸性条件下,用2,6-二氯靛酚滴定至溶液
3、显玫瑰红色,即为终点;无需另加指示剂。——2,6-二氯靛酚法方法取本品适量(约相当于Vc50mg),用适量水溶解,置100ml量瓶中,加偏磷酸-醋酸试液20ml,再用水稀释置刻度,摇匀;精密量取稀释液适量(约相当于Vc2mg)置50ml的锥形瓶中,加偏磷酸-醋酸试液5ml,用2,6-二氯靛酚滴定液滴定,至溶液显玫瑰红色,并持续5s不褪;空白试验:取偏磷酸-醋酸试液5.5ml,加水15ml,用2,6-二氯靛酚滴定液滴定。计算:(V-V0)×F×T×WW×标示量标示量%=反应摩尔比1﹕1×100%维生素C2,6-二氯酚靛酚维生素C2,6-二氯酚靛酚(
4、还原型)(氧化型,粉红色)(氧化型)(还原型)++====2,6-二氯酚靛酚染料的钠盐在水溶液中显蓝色,在酸性溶液中呈红色,被还原后红色消失。碘量法原理:由于维生素C分子中的烯二醇基有极强的还原性,能被碘氧化,用碘滴定VCEC6H6O6/C6H8O6=0.18,EI2/I-=0.535终点:淀粉为指示剂,溶液出现稳定的蓝色即为终点反应式:碘量法碘的浓度由已知浓度的Na2S2O3标准溶液标定反应式:计算式:Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%碘量法注意!测定时:加HAC使溶液呈弱酸性原因:(1)Vc还原性很强,在空气中很容易
5、被氧化,在碱性介质中更甚(2)I2在碱性介质中会发生歧化反应加HAC可减少VC的副反应,避免实验误差电位滴定法原理:根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点.Pt为指示电极,甘汞作参比电极E池=E+-E-+E液接电位=EI2/I-+k(常数)电位滴定法原理(具体来说:)随着滴定剂的加入,由于发生化学反应,待测离子浓度将不断变化;从而指示电极电位发生相应变化;导致电池电动势发生相应变化;计量点附近离子浓度发生突变;引起电位的突变,因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。电位滴定法右图:电位滴定法基本仪器装置计算式:(与碘量法相同)Wvc=C
6、(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%优点:解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题2分光光度测定维生素C2.12,4一二硝基苯肼分光光度法2.2钼蓝比色法2.3其他方法2,4一二硝基苯肼分光光度法原理:维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸反应式:2,4一二硝基苯肼分光光度法pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂,形成二酮古洛糖酸二酮古洛糖酸2,4一二硝基苯肼分光光度法脱氢抗坏血酸,二酮古洛糖酸均能和2,4-二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎脎在500nm波长有最大吸收脎的结构:分光光度法样品溶液与VC标准溶液按上
7、述方法同样处理500nm处测吸光度下图:721型分光光度计钼蓝比色法马占玲等用钼蓝比色法测定青椒中还原型维生素C含量的基本原理和方法。测定波长839nm,维生素C含量在0.004~0.024mg/mL范围内呈线性关系,回收率为97.2%。该方法简单、快速、准确。钼蓝比色法逯家辉等提出了一种测定维生素C的新方法,它是基于FolinB试剂与抗坏血酸在pH=3的三氯乙酸酸性介质中反应生成脱氢抗坏血酸,反应产物在910nm波长处有最大吸光度进行定量分析。该方法的线性范围为0~50.0μg/mL,相关系数r=0.99986,回收率为98.12%~102.1
8、5%。——差示旋光法原理方法结果维生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有显著差异,而片剂辅料旋光度保持不变差示旋光法消除辅料的影响,直接测
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