基于新型分子信标和胸腺嘧啶—汞(ⅱ)配位作用的dna和hg~(2+)检测技术研究

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时间:2018-09-27

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1、基于新型分子信标和胸腺嘧啶—汞(Ⅱ)配位作用的DNA和Hg~(2+)检测技术研究【摘要】:随着人类基因组计划的完成,科学工作者的研究重心开始由单纯的获取和收集基因组信息向通过基因信息分析对生命过程做出预报和新发现转移。因此,在后基因组和蛋白质组时代,迫切需要发展高灵敏、高选择性的定量研究基因组信息的工具。分子信标就是最理想的工具之一。因其独特的性质和多功能性,分子信标已被广泛应用于核酸的实时定量检测、活体分析、化学与生物传感器、疾病诊断等领域。为满足不同的需要,在经典分子信标的基础上,人们设计了许多新型的分子信标。分子信标的迅速发展,为基因组和蛋白质组研究、

2、疾病的分子诊断以及新药开发提供了一个平台。鉴于汞离子对环境和人类健康的危害,发展简单、快速、低成本的汞离子检测技术对生命、环境、医学以及工农业生产等都具有重要的意义。核酸的结构和功能对重金属离子非常敏感,因此,构建基于核酸的汞离子生物传感器引起人们的关注。近年来,有人报道核酸中thymine能与汞离子特异性结合,形成T-Hg2+-T配合物。之后,T-Hg2+-T配合化学成为构建汞离子生物传感器研究的热点。本文主要致力于DNA检测的新型分子信标的设计和基于基于新型分子信标和胸腺嘧啶—汞(Ⅱ)配位作用的DNA和Hg~(2+)检测技术研究【摘要】:随着人类基因组计

3、划的完成,科学工作者的研究重心开始由单纯的获取和收集基因组信息向通过基因信息分析对生命过程做出预报和新发现转移。因此,在后基因组和蛋白质组时代,迫切需要发展高灵敏、高选择性的定量研究基因组信息的工具。分子信标就是最理想的工具之一。因其独特的性质和多功能性,分子信标已被广泛应用于核酸的实时定量检测、活体分析、化学与生物传感器、疾病诊断等领域。为满足不同的需要,在经典分子信标的基础上,人们设计了许多新型的分子信标。分子信标的迅速发展,为基因组和蛋白质组研究、疾病的分子诊断以及新药开发提供了一个平台。鉴于汞离子对环境和人类健康的危害,发展简单、快速、低成本的汞离子

4、检测技术对生命、环境、医学以及工农业生产等都具有重要的意义。核酸的结构和功能对重金属离子非常敏感,因此,构建基于核酸的汞离子生物传感器引起人们的关注。近年来,有人报道核酸中thymine能与汞离子特异性结合,形成T-Hg2+-T配合物。之后,T-Hg2+-T配合化学成为构建汞离子生物传感器研究的热点。本文主要致力于DNA检测的新型分子信标的设计和基于基于新型分子信标和胸腺嘧啶—汞(Ⅱ)配位作用的DNA和Hg~(2+)检测技术研究【摘要】:随着人类基因组计划的完成,科学工作者的研究重心开始由单纯的获取和收集基因组信息向通过基因信息分析对生命过程做出预报和新发现

5、转移。因此,在后基因组和蛋白质组时代,迫切需要发展高灵敏、高选择性的定量研究基因组信息的工具。分子信标就是最理想的工具之一。因其独特的性质和多功能性,分子信标已被广泛应用于核酸的实时定量检测、活体分析、化学与生物传感器、疾病诊断等领域。为满足不同的需要,在经典分子信标的基础上,人们设计了许多新型的分子信标。分子信标的迅速发展,为基因组和蛋白质组研究、疾病的分子诊断以及新药开发提供了一个平台。鉴于汞离子对环境和人类健康的危害,发展简单、快速、低成本的汞离子检测技术对生命、环境、医学以及工农业生产等都具有重要的意义。核酸的结构和功能对重金属离子非常敏感,因此,构

6、建基于核酸的汞离子生物传感器引起人们的关注。近年来,有人报道核酸中thymine能与汞离子特异性结合,形成T-Hg2+-T配合物。之后,T-Hg2+-T配合化学成为构建汞离子生物传感器研究的热点。本文主要致力于DNA检测的新型分子信标的设计和基于T-Hg2+-T配位作用的新型汞离子检测技术的构建。具体内容如下:第一章绪论首先系统介绍了分子信标的发现及应用研究,包括分子信标结构、工作原理、优化设计及应用现状。接着介绍了基于T-Hg2+-T配位作用的汞离子生物传感器的研究进展。最后阐述了本论文设计思路和研究意义,指出论文的创新之处。第二章基于电活性-非电活性转换

7、分子信标直接均相检测DNA本章设计了一种新型的电化学分子信标,即“电活性-非电活性转换分子信标”,直接用于均相检测DNA。该电化学分子信标由一段3’、5’端标记有电化学标记物胭脂红酸,自身能够形成茎-环结构的单链寡核苷酸组成(简称为CAs-MB)。CAs-MB在关闭状态时,两端标记的胭脂红酸单体在茎部互补序列的作用下相互接近,并形成二聚体,从而导致电化学信号的淬灭;与完全互补目标DNA序列杂交时,CAs-MB将发生构象转换,即由自由卷曲的茎-环结构转换为刚性的DNA双链,胭脂红酸二聚体变为单体,从而恢复了胭脂红酸单体的电信号。CAs-MB的电化学信号强度与完

8、全互补目标DNA序列的浓度在0.06-1.4μM范围

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