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时间:2018-09-28
《急性和慢性帕金森病大鼠血脑屏障通透性变化的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、急性和慢性帕金森病大鼠血脑屏障通透性变化的研究作者:闫明俞陈虹杨赞章刘斐【摘要】目的通过观察帕金森病大鼠在不同时间点脑组织中伊文斯蓝(EB)含量变化来探讨急性和慢性PD大鼠血脑屏障通透性的变化。方法脑立体定向将6羟基多巴胺注入大鼠右侧纹状体建立PD模型。将大鼠随机分成对照组和模型组,后者又分为h,1h,2h,4周组,最后一组为慢性PD组。按BELAYEV法使用EB测定BBB通透性。结果急性PD大鼠BBB通透性在h达到高峰,1h逐渐下降,持续至2h,慢性PD大鼠与对照组相比无明显差异。结论急性PD时伴有BBB的通透性增加,而慢性PD时BBB的通透性未见改变。【关键词】帕金森病;血
2、脑屏障;伊文斯蓝Abstract:ObjectiveTostudythealterationofblood-brainbarrier(BBB)withparkinsondiseasemeasuredbyEBcontentinthebraintissueofratswithacuteandchronicparkinsonparkinsondiseasemodelwasestablishedbydirectinjectionof-OHDAintotherightstriatumratswererandomlydividedintocontrolgroupandmodelratsinm
3、odelgroupwerekilledathour,hour12,hourandlastgroupwaschronicparkinsonDiseaseratBBBpermeabilitywasassessedbyBelyaev'sBBBpermeabilityreachedthepeakathourafter-OHDAacutelesion,thendecreasedathour12,lastedBBBpermeabilityofchronicparkinsondiseaseratshadnosignificantdifferenceascomparedwithcontrolgr
4、oup.ConclusionThepermeabilityofBBBwillincreaseinacuteparkinsondiseaseratsbuthasnochangeinchronicityparkinsondiseaserats.Keywords:ParkinsonDisease;Blood-brainbarrier;EvensBlue 帕金森病是一种常见的中老年性疾病,主要病理学特征是中脑黑质部位多巴胺(dopamine,DA)能神经元变性死亡[1],引起纹状体内DA递质含量显著降低。6羟基多巴胺作为DA神经元的化学切断剂,注入脑内可引起DA神经细胞急性损伤致DA
5、含量下降。短期应用可致急性PD模型,长期应用可制作慢性PD模型。我们将6OHDA注入鼠脑右侧纹状体分别建立急性和慢性PD模型,通过测量伤侧脑组织伊文斯蓝(EvensBlue,EB)含量来观察血脑屏障通透性的改变,以探讨BBB的改变在急性和慢性PD发生中的作用。 1仪器与材料仪器和试剂脑立体定位仪,牙科钻,Varioskan型酶标仪,HM202型十万分之一天平,HHS精密电热恒温水浴锅(江苏金坛市医疗仪器厂),高速冷冻离心机;6OHDA(sigma公司),阿朴吗啡(sigma公司),甲酰胺,伊文斯蓝(上海新中化学厂生产),Millipore超纯水系统。动物分组健康雄性Wist
6、ar大鼠,体重220~250g室温20~25℃,湿度50%~70%饲养,白天-黑夜分别1h睡眠和活动,自由进食、饮水。随机分为对照组和模型组,后者按损伤后不同观察时相点又分为h,1h,2h,4周组。每组6只。 2方法.1动物模型制作实验鼠用%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,固定于脑立体定位仪上,齿杆较耳杆低约。头皮正中切口约cm,剥离骨膜,暴露前囟。定位方法依据Paxinos&Watson所著《TheRatBraininStereotaxicCoordinates》找到前囟。在右侧纹状体钻一直径为1mm的小孔,用固定于立体定位仪上的微量注射器延针孔垂直进针。模型组:用10μl微量注射器抽
7、取μlOHDA注入右侧纹状体内,注射速度0.μl/min,进药后留针1min,退针min。缝合头皮,腹腔注射庆大霉素以预防感染。对照组:接受同样位点的注射,注射生理盐水μl,其他过程同模型组。术后放回笼中,单笼饲养,常规饲料,自由进食、饮水。.2行为学检测筛选慢性PD模型第4组实验鼠术后第2周开始经皮下注射新鲜配制的阿朴吗啡,检测大鼠旋转行为。每周1次,直至术后4周。手动记数每分钟旋转次数及30min内旋转总次数。恒定向损伤对侧旋转且旋转圈数超过r/min的大鼠视为阳性,连续4
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