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1、性传播疾病的实验诊断第一节概述一、概述二、重点介绍艾滋病、梅毒、淋病、非淋菌性尿道炎、生殖器疱疹、尖锐湿疣、软下疳、性病性淋巴肉芽肿的临床检测方法及临床意义；2个概念性病（VD）：是指通过性交传染的、具有明显生殖器损害症状的全身性疾病。4种性传播疾病（STD）：是指通过性接触可以传染的一组传染病,在我国,人们简称为性病。包容20余种概述历史上：（传统）把通过性活动传染的疾病称为性病（Venerealdiseases,VD）主要指:梅毒(syphilis)淋病(gonorrhea)性病肉芽肿软性下疳四种又称—经典性病概念更新上世纪７０年代以来发现：许多病原体也可以
2、通过性生活传播迄今为止大约已发现２０余种性病同时：四种性病大都有了明确诊断手段及治疗方法，明显地得到了抑制1970年，世界卫生组织把旧名称“性病”改为“性传播疾病”。（Sexuallytransmitteddiseases,STD）我国重点防治的性病艾滋病(AIDS):获得性免疫缺陷综合症，HIV梅毒(syphilis)：由梅毒螺旋体梅毒亚种所致慢性性传播疾病尖锐湿疣(condylomaacuminatum)：由人乳头瘤状病毒（hpv）引起淋病(Gonorrhea)：淋病奈瑟菌生殖器疱疹(genitalherpes)：由单纯疱疹病毒感染非淋菌性尿道炎(NGU)：
3、沙眼衣原体和解脲脲原体软下疳(chancroid)：杜克嗜血杆菌所致生殖器部位性病性淋巴肉芽肿(lymphogranulomaVenereum)：由沙眼衣原体引起，第四性病STD的诊断：病史—接触史临床表现实验室检查STD监测和疗效判断的重要依据—实验室检查一、艾滋病的实验室诊断理论依据—大量血清学流行病学资料:V→几周↓→IgM抗体出现很快↓IgG抗体出现并一直存在（无免疫源性）实验目的：检测抗—HIV抗体（IgG主）用于诊断实验：HIV血清学初筛试验HIV血清学确证试验HIV血清学初筛试验一、酶联免疫吸附试验ELISA法的基本原理是免疫反应物通过化学或免疫学
4、的方法形成酶结合物，酶结合物能与待检样品中相应的抗原或抗体结合成为免疫复合物,然后加入酶底物,经酶的催化或水解作用,无色底物产生颜色,用肉眼、分光光度计观察结果初筛实验方法明胶颗粒凝集试验（PA）双抗原夹心法：p24抗原免疫荧光试验(IFA)标本要求：新鲜全血2ml，无抗凝确证实验方法二、免疫印迹试验基本原理：HIV全病毒抗原经过PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸
5、纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应,血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合。加入抗人IgG酶结合物和底物后,抗体结合带呈现紫褐色。临床意义初筛试验：阴性结果:基本可排除HIV感染，必要时2-3月复查阳性结果:其它初筛方法重复试验，阳性报告HIV抗体待查，进一步做确证试验确诊试验：结果阳性的标本可报告HIV抗体阳性其它相关试验用于预后及抗病毒治疗疗效观察实验室指标的检测：1CD4+细胞和CD8+细胞计数CD4+淋巴细胞正常值为500-1600个/ul,CD4+/CD8+的正常比值为（1.5-1.7）：12病毒载量测定(viralload,VL)实
6、际上，体内复制的病毒的数量是不能直接测量的，一般用血浆中HIVRNA的拷贝数代表HIV的病毒载量。HIV病毒载量与疾病进展速率和预后有强相关关系，其它相关试验P3实验室：病毒分离培养相关抗原检测二、梅毒的临床分期后天梅毒：一期梅毒二期梅毒三期梅毒(晚期梅毒)先天梅毒梅毒一期皮损-硬下疳梅毒二期皮损梅毒晚期损害二、梅毒的实验室诊断梅毒：由梅毒螺旋体梅毒亚种所致慢性性传播疾病。检查病原体的试验测抗体—血清学检查检查病原体的试验暗视野显微镜检查法（WHO推荐）临床意义：直接检查到梅毒螺旋体，可确证梅毒；是早期梅毒检测最好的方法。梅毒螺旋体抗体检测两组试验：1.非密螺旋
7、体抗原试验（初筛）2.密螺旋体抗原试验（确证）两组试验的目的都是检测抗体非密螺旋体抗原试验（抗-脂质抗体-非特异性）密螺旋体抗原试验（抗-梅毒螺旋体抗体-特异性）非密螺旋体抗原血清学试验方法：1.性病研究实验室试验——VDRL2.不加热血清反应素试验——USR3.快速血浆反应素环状卡片试验——RPR4.甲苯胺红试验——TRUST四种初筛方法原理：当人体感染梅毒螺旋体4周～10周左右后，血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性反应素抗体(主要是IgM和IgG)目的：抗-脂质抗体四种初试验筛方法的比较VDRLUSRRPRTRUST抗原成分心磷脂、卵磷脂、胆固醇同
8、前+EDTA+氯化胆碱同
