β酪啡肽功效学研究进展

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1、β-酪啡肽-7功效学研究进展营养与食品卫生M150879吴鹏目录一、β-酪啡肽的简介（1）酪啡肽的定义（2）β-酪啡肽的发现（3）β-酪啡肽的结构特征二、β-酪啡肽-7的制备（分离、纯化、鉴定）三、β-酪啡肽-7的主要生理功能及研究进展四、展望酪啡肽的定义酪啡肽又称酪蛋白吗啡、酪蛋白阿片肽、外啡肽，是酪蛋白在消化酶作用下释放的，能被机体直接吸收，具有多种生物学功能的乳源生物活性肽之一。是重要的乳源阿片肽。它具有行为调节及免疫调节作用，能抑制肠道运动，促进胰岛素分泌，对产乳及内源性器官发育生长因子有协同作用

2、。酪蛋白是乳中最重要的成分。乳源生物活性肽是酪蛋白在消化酶作用下释放的，能被机体直接吸收，具有多种生物学功能。其中酪啡肽是最重要的乳源生物活性肽之一。β-酪啡肽-7(beta-asomor-phin-7p）是从牛乳β-酪蛋白的酶解产物中分离出来的具有阿片活性的七肽物质，为β-酪蛋白第60-66氨基酸残基片段。β-酪啡肽的发现1979年，Brantl等在豚鼠回肠纵肌肠肌中分离到一个牛乳酪蛋白的酶解产物，其是一个含有7个氨基酸残基的寡肽，命名为β-酪啡肽-7，序列为Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pr

3、o-lle，为牛β-酪蛋白第60-66位氨基酸残基片段，它具有很高的阿片活性，能够与u型阿片受体结合。后来人们又发现了β-酪啡肽-4、β-酪啡肽-5、β-酪啡肽-6、β-酪啡肽-8、β-酪啡肽-11。β-酪啡肽的发现β-酪啡肽的结构特征牛β-酪啡肽是由牛β-酪蛋白分解产生的含有3-11个氨基酸的多肽，都是以牛β-酪蛋白的第60位的酪氨酸作为起始氨基酸;人的β-酪啡肽的结构和牛的非常相似，在N端都具有Tyr-Pro-Phe（酪氨、脯、苯丙）的序列。目前科学家发现了多种长度的β-酪啡肽，其主要包括β-CM-4

4、,β-CM-5,β-CM-6,β-CM-7,β-CM-8和β-CM-11，研究表明:对于所有含有不同数量氨基酸残基的β-酪啡肽，在N-末端含有相同的氨基酸序列Tyr-Pro-Phe，这对于保持β一酪啡肽的生物活性是非常重要的。在酶促降解方面β一酪啡肽是非常稳定的，其能够抵抗多种蛋白酶(如胃蛋白酶和胰蛋白酶)的降解，这种特性与其肽链中富含脯氨酸有关。β-酪啡肽-7的制备人和动物乳被认为是最接近完美的食品，酪蛋白是乳中最主要的蛋白，占乳蛋白的80%左右。这些生物活性肽本身以非活性状态存在于蛋白质氨基酸序列之中

5、，当在一定条件受蛋白酶作用下，可形成有活性的生物活性肽。β一酪啡肽-7是从牛乳β-酪蛋白的酶解物中分离出来的具有阿片活性的一个七肽物质。β-酪啡肽-7的制备一、酪蛋白酶解方法：称取600mg酪蛋白，加双蒸水溶解，另加少量NaOH助溶;待酪蛋白充分溶解后加少量HC1，定容。称取胃蛋白酶，使酶与底物浓度之比为1:25;于37℃水浴保温，实验组保温时间分别作用60min,90min,120min,150min;酶解结束后加入15%三氯乙酸终止反应，取上清，用NaOH调整pH至7.1。二、反相高效液相色谱（RP-

6、HPLC）鉴定酪蛋白酶解产物中的β-CM-7方法：1.待测液的预处理:取各时间点酪蛋白酶解液的上清液2m1，经0.22um微孔滤膜过滤，用于RP-HPLC分析。2.用缓冲液平衡层析柱，待运行结果显示稳定的基线时，分别取各时间点的20ul酪蛋白酶解上清液手工进样。3.检测波长215nm，流速0.75，线性洗脱运行30min。4.将加样酪蛋白酶解上清液换成β-CM-7标准品，制定标准峰。5.内标法检测:在待测样品中加入标准β-CM-7溶液，用以增强待测样品的分析结果。三、葡聚糖凝胶（Sephadex）G-15

7、凝胶层析分离纯化酪蛋白酶解上清液结果：120min酪蛋白酶解上清液，经葡聚糖凝胶G-15层析结果图，在215nm消光读数，绘制的洗脱曲线。收集不同组分洗脱液，按管号为6-19,20-35,36-50，51-73,74-89,90-120加以合并，得到6个组分。其中第六组分(箭头所指)中最有可能含有β-CM-7等小分子物质。三、β-酪啡肽-7的主要生理功能及研究进展酪啡肽的主要生理功能：1.对胃肠道运动的影响(降低收缩力，抑制葡萄糖吸收等)2.对免疫功能的影响（促进免疫器官发育等）3.对生殖内分泌的影响（影

8、响动物发情、排卵、性成熟等）4.对采食的影响（增加高脂饲料采食等）5.镇痛、镇静作用（作用同吗啡，镇静止痛、诱导睡眠）6.对神经系统的作用（促进神经母细胞瘤神经细胞的生长）7.其它作用（导致健忘症，抗焦虑）研究进展（1）Brantl等发现β-酪啡肽-7能够显著降低豚鼠回肠收缩力（2）谈寅飞等体外研究发现β-酪啡肽-7可促进仔猪胃窦分泌胃泌素（3）宗亚峰的研究发现β-酪啡肽-7能够抑制小肠对葡萄糖的吸收（4）凌明亮等还发现β-酪