大豆异黄酮分离及其检测方法研究概述

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1、维普资讯http://www.cqvip.com22粮食与油脂2006年第5期大豆异黄酮分离及其检测方法研究概述高荣海，李长彪，刘长江，孟宪文(沈阳农业大学食品学院，沈阳ll0l61)摘要：该文从几个方面论述层析法和高效液相色谱法等分离大豆异黄酮方法，和紫外分光光度法、三波长吸光光度法、高效液相色谱一质谱法、气相色谱法等检测大豆异黄酮方法及其这些分离检测方法特点和操作要点，还简要介绍医学免疫法测定大豆异黄酮方法。关键词：大豆异黄酮；大豆异黄酮分离方法；大豆异黄酮检测方法SurveyontheMethodsofSeparationa

2、ndDetectionforSoyIsoflavoneGAORong-hai，LIChang-biao，LIUChang-jiang，MENGXian-wen(FoodScienceCollegeofShenyangAgriculturalUniversity，Shenyang110161，China)Abstract：Theseparationmethodsofisoflavonesfromsoybeanbyhighperfomanceliquidchrom-atography(HPLC)andchromatographyand

3、thedetectionmethodsofisoflavonebyultraviolet—visiblespectrophotometry(UV)、three—wavelengthspectrophotometry、highperfomanceliquidchroma-tography—Massspectrometer(HPLC—MS)、gaschromatography(GC)werediscussedfromseveralaspectsinthispaper．Inaddition，thecharacteristicofthes

4、eseparationanddetectionmethodsandthemainpointsofoperationwerereviewedalso．Atlast，thedetectionmethodofisoflavonoidsonmedicalimmunologywasintroducedbriefly．KeyWords：isoflavones；separationmethodofisoflavone；detectionmethodofisoflavone中图分类号：TS202．3文献标识码：A文章编号：1008-9578(20

5、06)05-0022-03大豆异黄酮(soybeanisoflavone，简称ISO)是一类黄酮这类具有中等极性物质。硅胶吸附能力强弱与其从大豆中分离提取主要活性成分，具有异黄酮类化合硅醇基含量多少有关，硅醇基能通过氢键吸附水分而物典型结构㈩。一般来说，大豆异黄酮是一类化合物总丧失吸附力，因此硅胶在使用前必须在高温下除去水称，它包括三种游离型苷元染料木素(genistein)，大豆分活化。徐德平等利用硅胶柱层析和反相担体柱层黄素(daidzein)和黄豆黄素(glycitem)。九种结合型葡析从大豆中提取分离到大豆苷元糖苷、染料木

6、素糖苷、萄糖苷，其中B一葡萄糖苷形式为：染料木苷大豆苷元、染料木素4个异黄酮单体。姚开等采用(genistin)，大豆黄苷(daidzin)和黄豆黄苷(glycitin)。另300~400目硅胶、洗脱体系为氯仿一甲醇(5：1，v／v)、二种糖苷结合形式为：6一氧一酰基结合物和6一氧一流速为1．0ml／min，可使染料木苷、大豆苷、染料木素丙二酰基结合物。研究表明，染料木素，大豆黄素和黄和大豆苷元4种主要单体组分得到分离。豆黄素是大豆异黄酮主要生理活性成分。目前，大豆1．2聚酰胺柱层析法异黄酮单体分离方法主要有层析法和高效液相色谱聚

7、酰胺对酚类物质具有较强吸附力原理是基于法等；大豆异黄酮检测方法多采用紫外分光光度法其酰胺羰基与酚羟基之间可形成氢键，它适用于不同(uV)、高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱一质谱类型黄酮化合物分离，且具有吸附力强、分辨率高特点。联用法(HPLC—MS)等。本文主要论述分离和检测大豆姚开等n采用聚酰胺柱层析法，流速为1．0ml／min，用异黄酮方法及其各自特点。20％(v／v)甲醇作为洗脱液可分离出含量为85．3％1大豆异黄酮分离方法(w／w)大豆苷，再用4o％(v／v)甲醇洗脱分离出含量为大豆异黄酮单体分离方法主要有硅胶柱层

8、析法、87．0％(w／w)染料木苷。聚酰胺柱层析法、葡聚糖凝胶柱层析法、高效液相色谱1．3葡聚糖凝胶柱层析法法、高速逆流色谱法等。葡聚糖凝胶是根据分子大小而将混合物进行分1．1硅胶柱层析法离，一般是以分子量递减次序被洗脱，适用于纸色谱、硅胶柱层析法